164311. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a 23 671 RP és 23 672 RP antibiotikumok előállítására
3 164311 4 1350 k 1345 váll 1330 k 985 váll 965 k 920 k 455 k 420 gy 395 gy n e e k gy n gy nagyon erős erős közepes gyenge nagyon gyenge 10 Kromatográfiai adatok: Vékonyréteg-kromatografálást végeztünk kovasavgél H és alumíniumoxid H 75:25 arányú 15 keverékén a következő körülmények között: vizsgálati mennyiség 100 jug, kifejlesztés tiszta etflacetáttal 22C°-on telített zárt térben, 20 előhívás porlasztott tömény kénsawal. Ilyen körülmények között a 23 671 RP Rf értéke 0,26. 25 Vékonyréteg-kromatografálást végeztünk Merck F 254 kovasavgélen, kifejlesztőszerként 1:1:1 térfogatarányú etilacetát-kloroform-aceton keveréket használva és az előhívást a fent leírt körülmények között végezve. 30 A 2. táblázatban közöljük a 23 672 RP infravörös abszorpciós vonalait hullámszámban (cm-1 ) kifejezve: 2. táblázat 3450 n e 1240 k 895 gy 3210 váll 1210 gy 860 gy 2965 e 1185 váll 830 k 2921 e 1155 n e 800 gy 2890 váll 1135 gy 777 k 2870 gy 1108 e 740 n gy 2830 váll 1090 váll 715 n gy 2040 n gy 1075 k 692 gy 1740 n e 1070 gy 655 váll 1625 k 1055 n e 635 váll 1450 e 1025 váll 595 k 1405 k 995 e 545 k 1375 e 975 váll 490 k 1347 k 955 k 450 k 1325 k 922 váll 415 váll 1255 gy 912 k n e = nagyon erős e = erős k = közepes gy = gyenge n gy = nagyon gyenge Ilyen körülmények között a 23 671 RP Rf-értéke 0,62. A 23 672 RP antibiotikum fizikai-kémiai 35 tulajdonságai a következők: Külső megjelenés: fehér kristályos por. Elemi összetétel: a 23 672 RP antibiotikum szénből, hidrogénből és oxigénből áll a következő 40 arányokban: C 58,6-58,7%, H 8,4-8,5%, O 32,6-32,8%. Oldhatóság: a 23 672 RP antibiotikum gyakorlatilag oldhatatlan 20C°-os vízben, oldható alkoholokban, acetonban, éterben, dimetilformamidban 45 és klórozott szénhidrogénekben. Olvadáspontja (Kofler-padon): 153-155 C°. Forgatóképessége: [a]\? is = -71,0+ 1,5° (c = 1, metanolban). 50 Ultraibolya spektrum: metanolos oldatban a 23 672 RP elnyelési maximumot mutat 285nm-nél (Ei^m =0,67) és minimumot 254nm-nél (El^n =0,40). 55 A 3. ábrán látható a 23 672 RP ultraibolya spektruma metanolos oldatban 10,6, 106 és 1155 Mg/cm3 koncentrációban. Infravörös spektrum (meghatározva káliumbromiddal készült keverék- 50 ben): a spektrumot a 4. ábra mutatja, az abszcisszán egyrészt felül a mikronokban kifejezett hullámhosszak, másrészt alul a cm-1 -ben kifejezett hullámszámok, az ordinátán pedig az optikai sűrűségek vannak feltüntetve. 65 Kromatográfiai adatok: Vékonyréteg-kromatografálást végeztünk kovasavgél H és alumíniumoxid H 75:25 arányú keverékén. Ilyen körülmények között a 23 672 RP Rf-értéke 0,17 (á meghatározást a 23 671 RP-re megadott módon végezve). Vékonyréteg-kromatografálást végeztünk Merck F 254 kovasavgélen, kifejlesztőszerként etilacetátot használva, ily módon 0,38 Rf-érték adódott, 1:1:1 térfogatarányú etilacetát-kloroform-aceton keveréket használva pedig az Rf-érték 0,50 volt. Antibiotikus hatás és toxicitás A) Bakteriosztatikus hatás in vitro A 23 671 RP és 23 672 RP termékek bakteriosztatikus hatását számos mikroorganizmussal szemben hígításos módszerrel határoztuk meg. Minden mikroorganizmusra megállapítottuk az anyagnak azt a legkisebb koncentrációját, amely meghatározott körülmények között meggátolja a mikroorganizmus látható fejlődését egy alkalmas táptalajon. A meghatározások eredményét a 3. táblázatban közöljük. A legkisebb gátló koncentrációt az anyag mikrogrammjaiban fejezzük ki 1 cm3 vizsgált közegben. 2
