164059. lajstromszámú szabadalom • Új eljárás L-piroglutamil-L-hisztidil-L-prolin-amid előállítására
5 164059 6 csapadékot leszívatjuk, vízzel és éterrel mossuk, végül levegőn szárítjuk. Hozam: 21,3 g. b) Z-Gln(Mbh)-His-OH [(III) általános képletű vegyület] 20,5 g Z-Gln(Mbh)-His-OMe-t feloldunk metanol, 65 ml víz és 160 ml dioxán elegyében, majd az elegy pH-ját 1 n nátriumhidroxid hozzácsepegtetésével 12,7 értékre állítjuk be, és az észtert önműködő autotitráló berendezés segítségével végzett pH-szabályozás mellett elszappanosítjuk. Fogyás: 45,2 ml 1 n NaOH-oldat. Az elegyet ezután 45,2 ml 1 ,n sósav-oldattal elegyítjük, vákuumban kis térfogatra bepároljuk és bőséges mennyiségű vízzel elegyítjük. A csapadékot forrásban levő etanollal kétszer kezeljük. Hozam: 11,5 g, olvadáspont: 186-189 C°. c) Z-Gln(Mbh)-His-ProNH2 [(IV) általános képletű vegyület] 96,5 g Z-Gln(Mbh)-His-OH 1 liter dimetilformamidban készített oldatához hozzáadunk 22,6 g H-Pro-NH2 «HCl-t 40,5 g 1-hidroxi-benzotriazolt, 19,2 g N-etilmorfolint, majd az elegyhez 0 C°-on 31 g diciklohexil-karbodiimid 150 ml dirnetilformamidban készült hideg oldatát adjuk. Az elegyet 1 órán keresztül 0 C°-on, majd éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. A kivált csapadékot másnap szűrjük, a szűrletet vákuumban bepároljuk. A párlási maradékot kevés vizet és alkoholt tartalmazó 1,5 liter etilacetátban oldjuk, az oldatot telített nátriumhidrogénkarbonát-oldattal és vízzel mossuk, nátriumszulfáton megszárítjuk és vákuumban bepároljuk. A párlási maradékot éterrel eldörzsöljük, majd leszívatjuk. Hozam: 97,2 g. A nyersterméket tisztítás céljából kétszer kezeljük forrásban levő etilacetáttal. Hozam: 73 g. [a]|j0 = -23,1° (c = 1, 90%-os ecetsavban). d) L-Piroglutamil-L-hisztidil-L-prolin-amid 51,8 g Z-Gln(Mbh)-His-Pro-NH2 -t feloldunk 520 ml 90%-os ecetsavban, majd a terméket Pd-katalizátor jelenlétében 3 órán keresztül hidrogénezzük. A katalizátort leszívatjuk és a szűrletet vákuumban bepároljuk. A párlási maradékot éterrel többször el dörzsöljük, majd 500 ml 9:1 arányú trifluorecetsav-anizol eleggyel 90 percen keresztül visszafolyató hűtő alatt forraljuk. A trifluorecetsavat vákuumdesztillációval eltávolítjuk, a párlási maradékot éterrel eldörzsöljük és leszívatjuk. A terméket 120 ml vízben oldjuk és 400 ml Amberlite IR-45-t tartalmazó oszlopon bocsájtjuk keresztül. Az oszlopot vízzel eluáljuk. Az eluátumot kis térfogatra bepároljuk, kevés aktívszén jelenlétében melegítjük, kispórusú szűrőn szűrjük és liofilizáljuk. Hozam: 17,0 g (67%). [a]2 D ° = -63° (c = l, vízben). 2. példa: L-Piroglutamil-L-hisztidil-L-prolin-amid előállítása Z-Gln(Mbh)-His-Pro-NH-Mbh-ból 5 [(IV) általános képletű vegyületből Rj, R2 = Mbh, Ac = Z = benziloxi-karbonil-csoport] az a) és b) eljárásváltozat szerint 10 a) Z-Pro-NH-Mbh 25 g (0,1 mól) Z-Pro-NH2 és 24 g (0,1 mól) 4,4'-dimetoxi-benzhidrol 200 ml jégecetben készített oldatához hozzáadunk 1 ml tömény kénsavat 15 és az elegyet 2 napon keresztül szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Az elegyhez ezután 800 ml vizet adunk, s a kiváló olajat hagyjuk kristályosodni. A csapadékot leszívatjuk, vízzel mossuk és etilacetátban oldjuk. Az etilacetátos oldatot 20 nátriumhidrogénkarbonát-oldattal és vízzel mossuk, nátriumszulfáton szárítjuk, végül vákuumban bepároljuk. A párlási maradékot éterrel eldörzsöljük és leszívatjuk. Hozam: 38,1 g (80%), olvadáspont: 123-126 C°. A terméket vékonyrétegkromatog-25 ráfíásan vizsgálva kevés Z-Pro-NH2 mutatható ki. Tisztítás céljából az anyagot etanol-víz elegyben átcsapjuk. Hozam: 36,65 g (77%), olvadáspont: 119-122 C°. 30 MD = ~5,1° (c = 1, dimetilacetamidban). Elemzés a C28 H 3 oN 2 0 5 (M: 474,6) képlet alapján: számított: C% 70,88: H% 6,34: 35 N%5,92: talált: C% 70,8 : H% 6,1 : N% 5,9 . b) H-Pro-NH-Mbh 29,2 g (616 mmol) Z-Pro-NH-Mbh 200 ml metanolban készített oldatához hozzáadunk kevés 45 Pd(OH)2 (/BaS0 4 -katalizátort, majd az oldaton hidrogéngázt vezetünk keresztül. A gázbevezetés közben az oldat pH-ját az önműködő titráló berendezés segítségével, In metanolos sósav-oldattal 4,5-ös pH-értéken tartjuk. A hidrálás befejeztével 50 az elegyet kovasavgélen szűrjük, a szűrletet bepároljuk és a maradékot 60 ml 2 n nátriumkarbonát-oldattal és 150 ml etilacetáttal extraháljuk. Az etilacetátos oldatot nátriumszulfáton szárítjuk és bepároljuk. A párlási maradékot 55 petroléterrel eldörzsölve kristályosítjuk. Hozam: 18,8 g (90%), olvadáspont: 93-98 C°. [a]£)° =-30,7° (c = l, dimetilacetamidban). Elemzés a C2 oH 24 N 2 03 (M: 340,4) képlet alapján: számított: C% 70,57: H% 7,10: N% 8,23: talált: C% 70,0 : H% 7,0 : 65 N% 8,6 . 3
