164059. lajstromszámú szabadalom • Új eljárás L-piroglutamil-L-hisztidil-L-prolin-amid előállítására

MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1971. VII. 06. (HO-1390) Német Szövetségi Köztársaság-beli elsőbbsége: 1970. VII. 07. (P 20 33 600.9) Közzététel napja: 1973. VII. 28. Megjelent: 1975. IV. 30. 164059 Nemzetközi osztályozás: C 07 c 103/52 Feltalálók: Dr. Wissmann Hans vegyész, Bad Soden, dr. König Wolfgang vegyész, Langenhain, dr. Geiger Rolf vegyész, Frankfurt/Main, Német Szövetségi Köztársaság Tulajdonos: Farbwerke Hoechst Aktiengesellschaft Vormals Meister Lucius und Brüning, Frankfurt am Main, Német Szövetségi Köztársaság Új eljárás L-piroglutamil-L-hisztidil-L-prolin-amid előállítására 1 2 A piroglutaminsav peptidjeit többnyire nehéz tiszta állapotban előállítani. Különösen nehéz a tiszta L-piroglutamil-L-hisztidil-L-prolin-amid elkészítése, amely a Biochem. und Biophys. Res. Commun. folyóiratban megjelent közlemény [37, 5 705 (1969)] szerint azonos a tireotropin bontó faktorral [(Thyreotropin Releasing Factorral) (TRF)]. A fenti peptidamid előállítása a szokásos peptidkémiai módszerekkel [1. Helv. Chim. Acta 53, 63 (1970)] nehézségekbe ütközik, mivel a 10 prolinamidból és a piroglutaminsavból kiinduló szintézis összes közbenső terméke vízoldható, és ezért nehezen kezelhető és tisztítható. Meglepő módon azt találtuk, hogy a piroglutamilpeptidek igen jó hozammal állíthatók elő 15 glutaminilpeptidekből, ha az utóbbiakat trifluorecetsawal forraljuk. Ha a művelet előtt a glutamin és/vagy a prolinamid amidcsoportjait trifiuorecetsav hatására könnyen lehasadó csoportokkal, így 4,4'-dimetoxi-benzhidril, 2,4-dimetoxi-benzil-, 20 2,4,6-trimetoxi-benzil- vagy xantü-csoporttal védjük meg, akkor vízben nehezen, etilacetátban viszont részben oldódó, könnyen tisztítható közbenső termékeket kapunk. A találmány tárgya új eljárás L-piroglutamil-L- 2

$ hisztidil-L-proli-amid előállítására. A találmány szerinti eljárás lényege az, hogy a) valamely (I) általános képletű vegyületet, amely képletben R hidrogénatomot, 4,4'-dimetoxibenzhidril-csoportot (Mbh-csoportot), 2,4-dimetoxi- 3° benzil-, 2,4,6-trimetoxi-benzil- vagy xantil-csoportot jelent, Ac terc-butiloxi-karbonil-, benziloxi-karbonil-, adamantiloxi-karbonil-, izobomiloxi-karbonÜ-csoportot jelent, a peptidkémiában szokásos kondenzációs eljárások szerint, előnyösen diciklohexil-karbodiimid segítségével 1-hidroxi-benzotriazol vagy 3-hidroxi-4-oxo-3,4-dihidro-l,2,3-benzotriazin. jelenlétében, vagy e vegyület aktív észterét - például p-nitrofenilésztert, N-hidroxi-szukkcinimid-észtert vagy 1-hidroxi-benzotriazol-észtert (II) képletű vegyülettel reagáltatunk, vagy b) valamely (III) általános képletű vegyületet -amely képletben Ac jelentése egyezik a fent megadottal - a peptidkémiában szokásos kondenzációs eljárások szerint, előnyösen diciklohexil-karbodiimid segítségével, 1-hidroxi-benzotriazol-, N-hidroxi-szukkcinimid vagy 3-hidroxi-4^oxo-3,4-dihidro-l,2,3-benzotriazin jelenlétében L-prolinamiddal vagy L-prolin4,4'-dimetoxi-benzhidrilamiddal reagáltatunk, majd a kapott (IV) általános képletű vegyületet -amelyben RÍ jelentése egyezik R jelentésével, R2 jelentése hidrogénatom vagy Mbh-csoport, jelentésük azonban egyidejűleg nem lehet hidrogénatom, Ac jelentése a fenti - anizol- vagy fenoltartalmű trifluörecetsawal visszafolyató hűtő alatt forraljuk, és adott esetben (ha Ac jelentése benziloxi-karbonil-csoport) a kapott terméket a trifluorecetsav-ani-164059