163969. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 9-(delta-D-arabinofuranozil)-purin-származékok előállítására
7 163969 8 400 ml 1:1 arányú éter-pentán elegybe önijük. A csapadékot leszűrjük, éterrel mossuk, 90 ml metanolban szuszpendáljuk, és 10 ml tömény ammóniumhidroxid-oldattal reagáltatjuk. Az elegyet 30 percig szobahőmérsékleten tartjuk, majd 0 CJ-ra hűtjük, és a kivált 2-acetamido-6-metiltio-purint leszűrjük. A csapadékot metanollal mossuk és vákuumban 60 CJ -on szárítjuk. 8,3 g 279—288 CJ -on bomlás közben olvadó vegyületet kapunk. 4,46 g 2-acetamido-6-metiltio-purin, 4,87 g 2,3,5-tri-O-benzil-a-D-arahinoíuranozil-klorid, 2 g trietilamin, 4—A molekulaszita és 200 ml acetonitril elegyét 1 héten át szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelégyet szűrjük, és a terméket tartalmazó szűrletet vákuumban sziruppá bepároljuk. A szirupszerű maradékot metanolban oldjuk, az oldatot Dowex—1 gyantával (hidrogénkarbonát-íorma) kezeljük, majd a terméket szilikagél-oszlopon kromatográfiaijuk. Eluáiószerként benzol-etilacetát elegyet nasznáiunk. Az eluátum bepárlása után szirupszerú 2-acetamido-6-metiltio-9-.(2,3,5-tri-0-benzil-J tf-D-arabinoíuranozil)-purint kapunk. 1,13 g, a fenti lépésben -előállított termék 20 mi etanollal készített oldatához 0,25 ml 10 n nátriumhidroxid oldatot és 0,5 ml vizet adunk. Az elegyet 30 percig 70 Cu -on keverjük, majd vákuumban szárazra pároljuk. A terméket éterrel extraháljuk. Az éteres oldat bepárlása után 0,92 g 2-amino-6-me1áltio-9-(2,3,5-tri-0-benzii-l ff-D-arabinofuranozil)-purint kapunk. A terméket NMR spektrum alapján azonosítjuk, amely megfelel a várt szerkezetnek. A kapott 0,92 g dezaoetilezett vegyületet vízmentes éterben oldjuk, és az oldatot 50 ml folyékony ammóniához adjuk. A reakcióelegyhez részletekben 0,28 g fémnátriumot adunk. •A reakció lezajlása után az elegyhez néhány ammóniumklorid-kristályt adunk, majd az ammóniát elpárologtatjuk. A maradékot benzollal extraháljuk, vízben oldjuk, és a terméket Dowex: —1 gyantaoszlopon (formiát^forma) kromatografáljuk. Eluáiószerként 0,02 n hangyasavoldatot használunk. 130 mg 2-ämino-6-merkapto-9-(^-D-arabin.ofuranozil)-purint kapunk, amely 300 C°-nál magasabb hőmérsékleten olvadás nélkül bomlik. A termék ultraibolya abszorpciós spektrumában a következő maximumok jelennek meg: pH—l: 260 m/t, 344 m^; pH =11: 251 m/í, 270 m^tt (váll), és 320 m/t. 3. példa: 2-Amino-6-metiltio-9-^-D-arabinofuranozil)-purin 105 mg 2^amino-6-merkapto-9-(^-D-arabinofuranozil)-purin és 0,4 g Dowex—1 gyanta (hidrogénkarfoonát-forma) 5 ml vízzel készített szuszpenziójáihoz keverés közben 0,23 g (0,1 ml) metiljodidot adunk. Az elegyet 2 .órán át szobahőmérsékleten tartjuk, eközben a reakció menetét ultraibolya spektrum felvételével (metanolban) követjük. Amikor az elegy kiindulási anyagot már nem tartalmaz (a 345 rnu-hoz tartozó csúcs eltűnik), a gyantát kiszűrjük és 50 ml metanollal mossuk. A szűrletet és a mosó-5 folyadékot egyesítjük és csökkentett nyomáson 40 C~-on bepároljuk. A maradékhoz acetont adunk, és az elegyet 40 C°-on bepároljuk. 87 mg piszkosfehér terméket kapunk, amely 168— 171 C'-on olvad. 4. példa: m 2-Amino-6-hidroxi-9-i(jö'-D-arabinofuranozil)-15 -purin , 10 mg/ml koncentrációjú adenozin-dezamináz enzim szuszpenzió (borjúbél-nyálkahártyából izolált enzim) aktivitását 38 C°-on mérjük. Az 20 enzim-szuszpenzió aktivitása 210 ^tmól/perc. 191 mg 2,6-diamino-9-(/ tf-D-arabinofuranozil)-purin 800 ml 1 mmólos foszfátpuff érrel (pH =7,1) készített oldatához 50 /*g adenozin-dezamináz enzimet adunk. A reakcióelégyet 2 órán át 38 25 Cű -on tartjuk, majd az elegyet fagyasztva számítjuk. A porszerű maradékot forró metanollal extraháljuk. A metanolos oldatot szűrjük és bepároljuk. A szilárd maradiékot metanollal . eldörzsöljük, az elegyet szűrjük, és a szűrletből 30 a metanolt lepároljuk. A szilárd maradékot 25 ml meleg metanolban oldjuk, és a terméket az oldat hűtésével kristályosítjuk. 2-Amino-6^hidroxi-9-(yS-D-arabinofuranozil)-'purint kapunk; op.: >300 C°. A termék vízben rosszul oldódik. 5. példa: 2-Hidroxi-—6-ammo-9-^-D-arabinofuranozil)-purin 40 150 mg 2,6-diamino-9^-D-arabinofuranozil)-purin 6,7 ml vízzel, 0,5 ml 1 n sósav-oldattal és 0,7 'ml jégecettel készített oldataihoz szobahőmérsékleten, 24 óra alatt 120 mg szilárd nát-45 riumnitritet adunk. A reakcióelégyet vízzel hígítjuk, és a kivált 2-hidroXi-6-amino-9-(/?-D-arabinofuranozil)-purint leszűrjük, A terméket tisztítás céljából híg vizes nátriumhidroxid-oldat-50 ban oldjuk, az oldatot szűrjük, és a szűrletet • ecetsavval pH =6 értékre savanyítjuk. A 'kivált terméket leszűrjük, acetonnal mossuk és szárítjuk. 70 mg 2-hidroxi-6-*aimino-9j(/?-D~arabinofuranozál)*purin-imonohidrátot kapunk; op.: 55 >300 C° (kb. 258 C°-on sötétedik). Ultraibolya spektrum sávjai: Ama3C (pH = l): 235 mjti, 241 mju (inflexió), 282 m/t. 3-max (pH= 11): 248 rn.fi , 283 m/t. 60 A termék mintáját forró 0,1 n sósavoldatbarc hidrolizáljuk. 2-Hidroxi-6-aminoHpurint kapunk. A terméket vékonyrétegkromatogriáfiás elemzés alapján (oldószerrendszer: izopropanol, ammóniumszulfát) azonosítjuk, hiteles mintával ösz-65 szehasonlítva. • 4
