163865. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új antibiotikumok előállítására

7 163865 8 nak. A spórák tömegének színe a különböző' táptalajokon a fehértói a sárgáig vagy vörösig változik. |Shirling, E.B. and Gottlieb, Inter. Bull. Systemic Bacterid., J^ 313-340 (1966)]. Ez a tenyészet beilleszthető Tresner és Backus fehér, sárga és vörös csoportjaiba |Applied Microbiology, 11, 335-338 (1963)). A Becker és munkatársai eljárásán |App.Microbiol., L2_, 421 -423 (1964)) alapuló sejtfal elemzés 5 a diaminopimelinsav mezoizomerjének jelenlétét mutatja. A tenyészet melanin-negatív. A tenyészet 35 C°-os vagy ezt meghaladó inkubációs hőmérsékleten képes jó fejlődésre. növekedésre. Az A-201-hez hasonló más Streptomyces spp-k a ; Streptomyces alboflavus és a Streptomyces canescus. A Streptomyces alboflavus viszont melan'n pigmentet. A Streptomyces canescus pedig gömbalaku spórákat termel. Az A-201-termelő Streptomyces capreolus NRRL 3817 törzs rendszertani vizsgálataiban a Streptomyces faj jellemzésére kidolgozott International Streptomyces Project (Nemzet- -közi Streptomyces Tervezet) (Shirling and Gottlieb) ajánlásaiban említett módszereket alkalmaztuk. A rendszertani tanulmányok eredményeit a következő fejezetekben foglaljuk össze. A szinmegnevezeseket az Inter Society Color Council, National Bureaus of Standards (ISCC. NBS) módszerének 20 megfelelően adtuk [Kelly, K.L. and Judd, D.B., U.S. Department of Commerce. Circ, 553 (1955)]. A zárójelben lévő betűk a Tresner és Backus-ban megadott szintömbökre, az aláhúzott betűk és számok az ugyanott megadott szinlapokra vonatkoznak. A zárójelben lévő számok a Maerz, A. és Paul, M.R. Dictionary of Color (Szinszótár). McGraw-Hill, New ^ York (1950) c. munkájában megadott szintömbökre vonatkoznak. Az ISP számok az International Streptomices Project táptalajokra vonatkoznak, amelyek összetételét Shirling es Gottlieb adják meg (u.o.). Amennyiben ellenkező értelmű megjegyzés nincsen, észleléseinket 30 C°-on végzett 14-napos jn inkubáció után tettük. A Streptomyces capreolus NRRL 3817 mikroszkópos morfológiája, tényészeti jellemzői és fiziológiája 3b Mikroszkópos morfológia A spórák az oválistól a kissé hengeresig terjedő alakúak és hosszú, csavarodó, összefűzödött láncokban helyezkednek el. lánconként 10-50 vagy ennél több spórával. Az elektron- *Q mikroszkópos megfigyelés szerint a spórák felülete sima. A spórák méretei az 1.005-2.01 mikron x 0,67-1.005 mikron között változnak. Tény észeti jellemzők 45 Paradicsompép-zabliszt agar - Jó növek'dés gyér légmicéliumokkal és spórákkal: fW) fehér b. Ellenfénvhen szürkés sárgás barna (13 B 5). oldható pigment nincs. Czapek-agar - Jó növekedés gyei legmiceliuinokkdi es .-,-, spórákkal. (R) halvány narancssárga 3ca. (10 B 3). Ellenfényben halványsárga (10 B 2). Oldható pigment nincs. Élesztőkivonatos agar — Bőséges növekedés légmícéliumok vagy spórák nélkül. Ellenlényben erősen sárgás lila (2F9). Nincs oldható pigment. Benett-agar - Bőséges növekedés légmícéliumok vagy ^'i spórák nélkül. Ellenfényben mérsékelt vörös (3H10). Oldható pigment nincs. Agar-táptalaj - Elég jó növekedés légmícéliumok vagy spórák nélkül. Ellenfényben halvány szürkésbarna. Oldható pigment nincs. , p Emerson-agar Jó növekedés légmícéliumok vagy spórák nélkül. Ellenfényben sötét szürkéssárga (13K3). Oldható pigment nincs. Glükóz- aszparagin agar - Jó növekedés légmícéliumok vagy spórák nélkül. Ellenfényben erős sárgás lila. Oldható pigment nincs. 65 Kalciummalatos agar - A növekedésezen a táptalajon oly gyenge volt, hogy szint nem jelöltünk meg. Tirozinos agar - Elég jó növekedés gyér légmicéliumokkal és (Y) halványsárga 2 db (HCl). Ellenfényben halványsárga zöld (10B1). Oldható pigment nincs. 2. sz. ISP- táptalaj. Bőséges növekedés légmicélium vagy spórák nélkül. Ellenfényben szűrkés vöröses narancs (11A8). Oldható pigment nincs. .-?. S7 /.?/' táptalai Eléggé jó növekedév a közepe«, mennyiségű légmicélium és spórák (R) szürkés sárgás liba 5cb (4A9) szinűek. Oldható pigment nincs. •i ÍZ. ISI- táptalaj. Oyer novekeües gyei legmicehummal és spórákkal (W) fehér b^ Ellenfényben halvány sárga zöld (10B1). Oldható pigment nincs. 5. sz. ISP- táptalai - A növekedés a táptalajon oly gyenge volt, hogy szinmegjelölést nem végeztünk. Fiziológiai jellemzők: Zselatin-emésztés-negatív Nitrátredukció - pozitív Melanin pigment termelés - negatív a) Élesztő peptonkivonatos-vas agar- negatív b) Tripton-élesztőkivonatos-húsleves - negatív. Hőmérsékleti igény: 26 és 30 C" között csak vegetatív növekedés észlelhető. 37 C°-on jó vegetatív növekedést észlelünk. 43-49 C°-on jó vegetatív növekedés és jó légmicéliumképződés figyelhető meg. 55 C°-on nincs növekedés. A táptalaj (szubsztrátum) színének érzékenysége a pH változását nem befolyásolja A II. táblázat az A-201-termelő Streptomyces capreolus NRRL 3817 törzsön elvégzett szénhasznosítási tesztek ered menyeit foglalja össze. A táblázatban használt jelölések értelmezése a következő: * - pozitiv hasznosítás (•) = valószínű hasznosítás (-) = kérdéses hasznosítás - = nincs hasznosítás II. táblázat A S. capreolus NRRL 3817 törzs szénhasznosítása Szénforrás Reakció 1-arabinóz (- ) cellobióz • i-inozit (-) d (•) xilóz d-mannit -d (-) fruktóz (-I d(*) raffinóz szacharóz (-) 1 (•) ramnóz dextróz • kontrol (szénmentes) Amint azt már a megelőzőkben említettük, a Streptomyces capreolus NRRL 3817 törzs táptalajon tenyésztve az A-201A és A-201B antibiotikumokat termeli. Táptalajként számos különféle táptalaj használható. A termelés gazdaságossági szempontjainak figyelembevételével viszont a legnagyobb hozam és az izolálás, elválasztás könnyűsége szempontjából egyes táptalajokat előnyben részesítünk. A növekedéshez a legjobb táptalajt általában a több szénhidrát- és nitrogénforrást tartalmazó többalkotóju táptalaj jelenti. Szénhidrát forrásként dextrineket. melaszt, glükózt, glicerint és más ezekhez hasonló vegyületeket alkalmazhatunk. Jó nitrogénforrások az aminosavkeverékek, a peptonok és más ezekhez hasonló anyagok. A szójaliszt szénhidrátot és nitrogént egyaránt szolgáltat. 4