163708. lajstromszámú szabadalom • Eljárás peptidek előállítására 3-hidroxi-4-oxo-3,4-dihidro-1,2,3-benzotriazin jelenlétében
163708 félszintetikusan előállítható aminosavakat, pl. a-metilalanint, a-metil-3,4-dihidroxi-L-fenilalanint vagy /?-klóralanint is felhasználhatunk. A találmány szerint előállított végtermékeket a védőcsoportok lehasítása után gyógyászati hatóanyagként, vagy egyéb, értékes gyógyhatású peptidek szintézisében közbenső termékként használhatjuk fel. A gyógyhatású peptidek közül az alábbiakat említjük meg: Oxitocin, vasopressin, glükagon, ACTH, szekretin, tireokalcitonin és inzulin. A találmány szerinti eljárást az oltalmi kör korlátozása nélkül az alábbi példákban részletesen ismertetjük. A példákban az aminosavak nevét a nemzetközileg elfogadott szabályok szerint rövidítettek. Ezen kívül a következő rövidítéseket használjuk : z karbobenzoxi-csoport Boc terc-butiloxikarbonil-csoport TFA trifluoracetil-csoport OMe metoxi-csoport ONB p-nitrobenziloxi-csoport OBu' terc-butiloxi-csoport OOBT 4-oxo-3,4-dihidro-1,2,3-benzotriazin-3-oxi-csoport HOOBT 3-hidroxi-4-oxo-3,4-dihidro-l,2,3--benzotriazin Mbh 4,4'-dimetoxi-benzhidril-csoport Trt tritil-csoport MPCH l-(p-metoxi-fenil)-ciklohexil-csoport DMF dimetilformamid THF tfltrahidrofurán DCHA diciklohexilamin DCC diciklohexilkarbodiimid DC vékonyrétegkromatográfia 1. példa Izolált N-acil-aminosav-3-hidroxi-4-oxo-3,4-dihidro-l,2,3-benzotriazinészterek előállítása a) Z-Thr-OOBT 12,75 g (50 mmól) Z-treonin és 8,25 g (50 mmól) HOOBT 150 ml absz. tetrahidrofuránnal készített oldatához 0 C°-on 11 g DCC jéghideg tetrahidrofuránnal készített oldatát adjuk. Az elegyet 1 órán át 0 C°-on, majd 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük, a csapadékot kiszűrjük, és a szűrletet vákuumban bepároljuk. A maradékot izopropanollal eldörzsöljük és kiszűrjük, majd tetrahidrofurán-petroléter elegyből átkristályosítjuk. 16,57 g (84,5%) Z-Thr-OOBT-t kapunk, op.: 170 C°, [a$= -26,6° (c=2, dimetilformamidban). Elemzés: C19 H 18 N 4 0 6 képlet alapján (M=398,4): számított: C=57,28%, H=4,55%, N = 14,07%, talált: C=57,2 %, H=4,6 %, N=14,4 %. b) Z-Ser-OOBT Az la) példában leírt módon 2,4 g (10 mmól) Z-szerint 1,65 g (10 mmól) HOOBT-nal reagáltatunk. 3,25 g (84,7%) terméket kapunk, op.: 128— 130 C°, [a]?= -40,4° (c=2, dimetilformamidban). 10 15 Elemzés C18 H 18 N 4 0 6 képletre (M=384,4): számított: C=56,25%, H=4,20%, N=14,58%, talált: C=56,l %, H=4,6 %, N=14,9 %. c) Z-Asn(Mbh)-OOBT Az la) példában leírt módon 4,9 g (10 mmól) Z-Asn(Mbh)-OH-ot és 1,65 g (10 mmól) HHOBT-t dimetilformamid oldószerben reagáltatunk. 3,1 g (48,5%) 175—177 C°-on olvadó terméket kapunk. Elemzés C34 H 31 N 6 0 8 képlet alapján (M=637,65): számított: C=64,05%, H=4,90%, N = 10,98%, talált: C=64,2 %, H = 5,l %, N=ll,l %. A Z-Asn(Mbh)-OH kiindulási anyag előállítása: 27 g Z-Asn-OH és 24 g 4,4'-dimetoxibenzhidrol 250 ml jégecettel készített oldatához szobahőmérsékleten 0,5 ml tömény kénsavoldatot adunk. Az elegyet éjszakán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk, majd 750 ml vízbe öntjük. A kivált kristályokat kiszűrjük és meleg etilacetátban oldjuk. Az etilacetátos oldatot vízzel mossuk, nátriumszulfát fölött szárítjuk és vákuumban bepároljuk. A maradékot éterrel eldörzsöljük és szűrjük. 47,5 g (96%) terméket kapunk, op.: 176—1«0 C°, [a\%= +2,42° (c=2, dimetilformamidban). 2. példa Z-Ser-Leu-OBií előállítása a) Z-Ser-Leu-OBu' előállítása egykészülékes eljárásváltozat („a" eljárásváltozat) 24 g (0,1 mól) Z-szerin, 22,5 g H-Leu-OBzt.HCl és 16,2 g HOOBT 300 ml dimetilformamiddal készített oldatához 0 C°-on 13 ml N-etilmorfolint és 22 g CDC kevés dimetilformamiddal készített, jéghideg oldatát adjuk. Az elegyet 1 órán át 0 C°-on, majd 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük, a csapadékot kiszűrjük, a szűrletet vákuumban bepároljuk, és a maradékot etilacetátban felvesszük. Az etilacetátos oldatot telített nátriumhidrogénkarbonát-oldattal, 2 n citromsav-oldattal, telített nátriumkarbonát-oldattal és vízzel mossuk, nátriumszulfát fölött szárítjuk és vákuumban bepároljuk. A maradékot éterben oldjuk. Az oldhatatlan anyagot kiszűrjük, és a szűrletet bepároljuk. A maradékot kevés etilacetátot tartalmazó petroléterből kristályosítjuk. 36,5 g (89,4%) terméket kapunk, op.: 94—95 C°, MD = -36,05° (c=2, metanolban). Elemzés C21 H 32 N 2 0 6 képlet alapján (M=408,5): számított: C=61,74%, H=7,89%, N=6,86%, 55 talált: C=61,7 %, H = 8,2 %, N=7,0 %. b) Z-Ser-Leu-Obif (Z-Ser-OOBT-vel) 1,15 g (5 mmól) H-Leu-OBu*.HCl tetrahidrofurános szuszpenziójához 0 C°-on 0,65 ml N-etilmorfolint (5 mmól) és 1,95 g (5 mmól) Z-Ser-OOBT-t adunk. Az elegyet 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd bepároljuk, a maradékot etilacetátban felvesszük, és az oldatot a 2a) példában leírt módon feldolgozzuk, 3,4 g (83,34) terméket kapunk, op.: 93 C°. 20 25 30 35 40 45 50 60 65 3
