163641. lajstromszámú szabadalom • Eljárás peptid szintézisben alkalmazható közbenső termékek előállítására
163641 5 zobahőmérsékletre emelkedik, majd 80 ml kloroörmot adunk hozzá. Ezután az elegyet egymásután ízzel, 5% -os vizes nátriumhidrogénkarbonát oldatai, 1 n sósavval és vízzel mossuk. A kloroformos azist elválasztjuk, szárítjuk és vákuumben bepároluk és a maradékhoz etilacetátot és petrolétert adajolunk. Az elegyet hűtőszekrényben állni hagyjuk s a kristályok leszűrése után 7,7 g N-benziloxi-kar)onil-L-fenilalanil-L-izoleucin-etilésztert kapunk, a átermelés 87,5%, o.p.: 98—99 C°. [a]f,°: -10,0° C = l, etilalkoholban). 2. példa (1) 12,6 g N-benziloxikarbonil-L-valint 70 ml etrahidrofuránban oldunk, majd az oldathoz 21 ml 25 g/100 ml foszgén tartalmú) foszgén-éter elegyet idagolunk keverés közben, —20C°-on. 15 perc núlva az oldathoz 30 perc alatt fokozatosan keve-és közben, —20 C° hőmérsékleten 7 ml trietilamin i0 ml tetrahidrofurános oldatát adjuk. A reakciólegyet további 30 percen át keverjük, majd tetralidrofurános trietilaminoldattal cseppenként semegesítjük. 150 ml száraz éter hozzáadása után az ilegyet 30 percen át keverjük —20 C°-on. A kivált rietilamin-hidroklorid kristályokat szűréssel eltávolítjuk. A szűrlethez 100 ml száraz petrolétert idunk és az elegyet hűtőszekrényben egy éjszakán it állni hagyjuk. A kivált trietanolamin-hidroklorid is kiindulási anyag-kristályokat szűréssel elválasztuk. A kapott szűrletet vákuumban jeges vízfürdőn jepároljuk. 10,6 g N-benziloxikarbonil-3-izopropil~ aziridinont kapunk olajként. Vékonyrétegkromatográfiás Rf érték: 0,9 85:15:3 arányú kloroform-etilacetát-ecetsav rendzerben). A vegyület infravörös abszorpciós spektuma a karbonil csoportnak megfelelő abszorpciós ávot mutatja 1840 és 1690 cm_1 -nél, de nincs az mino-gyöknek megfelelő abszorpció. (2) 300 ml kloroformban oldott 7,0 g glicin-etiliszter hidroklorid oldatot trietilaminnal semlegesíünk és az oldatot fokozatosan —20 C° hőmérséketen 10,6 g N-benziloxikarbonil-3-izopropil-azirilinon 30 ml tetrahidrofurános oldatához csepegtetük. A keveréket két órán át keverjük, ami alatt lőmérséklete szobahőmérsékletre emelkedik, és izután 200 ml kloroformot adagolunk hozzá, majd íz elegyet az 1. példa (2) pontjában leírtak szerint tezelve 13,8 g N-benziloxikarbonil-L-valil-glicinetilésztert kaptunk, kitermelése 81,7%, o.p.: 162— 164 C°, [aß 0: -27° (C = l, etilalkoholban). \3. példa (1) 12,6 g N-benziloxikarbonil-L-valint oldunk 70 ml tetrahidrofuránban. 21 ml (25 g/100 ml) foszgén tartalmú) foszgén-éter elegyet csepegtetünk az )ldathoz, keverés közben, —20 C°-on. 15 perc múl/a. 7 ml trietilamin 50 ml tetrahidrofurános oldatát idjiik az elegyhez, 30 perc alatt, —20 C° hőmérséketen történő keverés közben. A reakcióelegyet ovábbi 30 percen át keverjük, majd tetrahidrofu•ános trietilamin-oldatot hozzácsepegtetve semlegesítjük. Ezután a reakcióelegyet a 2. példa (1) Dontja alatt megadott módszer szerint kezelve 10,2 g vf-benziloxikarbonil-3-izopropil-aziridinont ka>unk, olaj alakjában. 6 (2) 30 ml metilalkoholt adagolunk -20 C°-on 10,2 g N-benziloxikarbonil-3-izopropil-aziridinon 30 ml tetrahidrofurános oldatához. Az oldatot 3 órán át keverjük, mialatt hőmérséklete szobahőmér-5 sékletre emelkedik. Az oldathoz ezután 300 ml etilacetátot adagolunk, és az elegyet az 1. példa (2) pontjában megadott módon kezelve 11,0 g N-benziloxikarbonil-L-valin-metilésztert kapunk, kitermelése: 82,8%. O.p.: 55—56C°.[a]g>: -18,9° (C=l, 10 metilalkoholban). 4. példa 6 g N-benziloxikarbonil-L-fenilalanint 40 ml tetrahidrofuránban oldunk. Az oldathoz — 20 C°-os 15 keverés közben 8,4 ml foszgén-éter keveréket adagolunk (amelynek foszgén tartalma 25 g/100 ml). 15 perc múlva 2,8 ml trietilamin 20 ml tetrahidrofurános oldatát adunk fokozatosan, —20 C°-on történő keverés mellett. További 30 perces keverés 20 után tetrahidrofurános trietilamin-oldattal cseppenként semlegesítjük. 60 ml száraz éter hozzáadása után az elegyet —20 C° hőmérsékleten 30 percen át keverjük. A kivált trietilamin hidroklorid kristályokat szűréssel elválasztjuk, a szűrlethez 40 ml száraz 25 petrolétert adunk, majd az elegyet hűtőszekrényben egy éjszakán át állni hagyjuk. Szűréssel elválasztjuk a trietilamin-hidroklorid és a kiindulási anyag kristályait, a szűrlethez 4,5 g L-alfa-hidroxi-izovaleriánsav-benzilésztert és 20 ml piridint adunk 30 — 20 C°-on, és az elegyet 3 órán át keverjük, mialatt hőmérsékletét szobahőmérsékletre emeljük. A reakcióelegyhez 300 ml etilacetátot adagolunk, az elegyet 1 n sósavval és telített, vizes nátriumhidrogénkarbonát-oldattal mossuk, szárítjuk és vá-35 kuumban bepároljuk. 9,8 g L-alfa-(N-benziloxikarbonil-L-fenilalanil-oxi)-izovaleriánsav-benzilésztert kapunk olaj alakban, kitermelése: 100%. A terméket katalitikusan redukáljuk metilalkoholban, palládium-szén katalizátor jelenlétében, 40 amikor is L-fenil-alanil-L-alfa-hidroxi-izovaleriánsavat kapunk. O.p.: 289—290 C°. [a]f°+l4,8° (C = 1,25 % -os ecetsavban). Elektroforézis során az elmozdulási távolság (2000 V, pH 3.75, 100 perc)=4,2 cm. 45 (Az L-fenilalanin elmozdulási távolsága 1,1 cm.) 5. példa (1) 22,3 g N-benziloxikarbonil-L-alanint 150 ml tetrahidrofuránban oldunk és az oldathoz cseppen-50 ként 50 ml foszgén-éter keveréket (melynek foszgén tartalma 20 g/100 ml) adunk, -20 C° hőmérsékleten, keverés közben. 15 perc múlva az oldathoz 30 perc alatt, keverés közben fokozatosan 14 ml trietilamin 50 ml tetrahidrofurános oldatát adjuk —20 55 C°-on. További 30 percen át keverjük az elegyet, majd cseppenként adagolva tetrahidrofurános trietilamin-oldattal semlegesítjük. Ezután a reakcióelegyet a 2. példa (1) pontjában leírtak szerint kezelve 18 g N-benziloxikarbonil-3-metil-aziridinont 60 kapunk olajos formában. Vékonyrétegkromatográfiás Rf érték 0,9 (85:15:3 arányú kloroform-etilacetát-ecetsav rendszerben). A vegyület kloroformban mért infravörös abszorpciós spektruma a karbonil-gyököknek meg-65 felelő abszorpciós sávot adta 1840 és 1690 ctrf-nél, 3
