163539. lajstromszámú szabadalom • Eljárás száraz enzim-készítmények előállítására
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADAL LEÍRÁS I Bejelentés napja: 1969. III. 28. (FO-541) Német Demokratikus Köztársaság-beli elsőbbsége: 1968. III. 28. (WP 6a/131144) Közzététel napja: 1973. IV. 28. Megjelent: 1975. február 28. 163539 Nemzetközi oszt.: C 07 g 7/02, 7/028, C 12 d 13/10 Feltalálók: SCHÖPFEL Dietmar oki. vegyész, Berlin, MUSCHICK Klaus vegyészmérnök, Berlin, - Német Demokratikus Köztársaság -Tulajdonos: Forschungsinstitut für die Gärungsindustrie, Enzymologie und Technische Mikrobiologie, Berlin, - Német Demokratikus Köztársaság — Eljárás száraz enzim-készítmények előállítására 1 A találmány tárgya javított eljárás száraz enzimkészítmények előállítására szintetikus cserzőanyagok felhasználásával. Ismeretes, hogy a proteinek, kiváltképpen az enzimek a mikroorganizmusok tenyészeteinek szűrle- 5 teiből vagy növényi vagy állati szövetkivonatokból tannin vagy szintetikus cserzőanyagok segítségével leválaszthatók (Chem. Abstr. 70, 21005 és 35.15840 sz. japán szabadalmi leírás). A 159 730 sz. magyar szabadalmi leírásban ismertetett eljárás értelmében 10 száraz enzim-készítményeket állítanak elő III általános képletű, adott esetben szulfonált szintetikus cserzőanyag segítségével, ahol a képletben m jelentése 3-10, előnyösen 3,4 vagy 6, n jelentése 0, 1, 2 vagy 3, 15 o jelentése 1, 2 vagy 3, p jelentése 0 vagy 1, V -OHvagy-NH2 csoportot jelent, X jelentése —C(R)2 -csoport, ahol R hidrogénatomot vagy metilcsoportot képvisel, továbbá -S02 -, 20 -SO-, -S0 2NH- vagy -NH-csoport-, illetve abban az esetben, ha X jelentése olyan -C(R)2 -csoport, amelyben R hidrogénatomot vagy metilcsoportot képvisel, a cserzőanyag naftol- vagy ligninszulfonsawal kondenzált, vagy co-szulfonált 25 termékével. Kedvezőtlen protein-só koncentrációviszonyok esetén azonban előfordulhat, hogy az enzim-cserzőanyag-addukt csak nehezen vagy egyáltalán nem válik le. Néhány esetben a csapadék leválását azzal lehet 30 elősegíteni, hogy zselatin- vagy más proteinoldatok hozzáadásával a proteinkoncentrációt növelik. Az így kapott enzimkészítmények aktivitása azonban, az inaktív proteinekkel való hígítás következtében többnyire romlik. Sokszor az aktivitásra számított hozam sem kielégítő. A cserzőanyag koncentrációjának a proteinoldatban való növelése kedvezőtlen az aktivitás-hozam szempontjából és a cserzőanyag szerves oldószerrel végzett extrahálása után kapott enzimkészítmények fajlagos aktivitása nem megfelélő. A találmány célja az enzim-cserzőanyag-addukt lehetőleg kvantitatív kicsapásának elérése nagy aktivitáshozam mellett. A találmány feladata olyan eljárás kidolgozása, ahol a megfelelő sóknak a tenyészetek szűrleteihez a cserzőanyaggal való elegyítés előtt történő hozzáadásával azonnal jól elkülöníthető enzim-cserzőanyagaddukt válik ki. A találmány szerinti eljárással ezt úgy érjük el, hogy a szervetlen és/vagy szerves savakból és/vagy bázisokból képezett sók hozzáadása az enzim-cserzőanyag kicsapását, azonnal kiváltja és jól elkülöníthető csapadékot ad. így pl. igen megfelelőnek mutatkoztak, kiváltképpen az anionos szintetikus cserzőanyagok esetén, az egyértékű kationnal és egy- és/vagy többértékű anionnal rendelkező sók. A késztermék aktivitása annál nagyobb, minél jobban oldódik a só a víz-szerves oldószer-elegyben. Az anionos szintetikus cserzőanyagok többértékű 163539
