163464. lajstromszámú szabadalom • Szögmérőműszer, két tengely körül elforgatható irányzókészülékkel
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1970. VI. 08. (AE—320) Német Demokratikus Köztársaság-beli elsőbbsége: 1969; VI. 09. (WP 6a/140 363) Közzététel napja: 1973. IV. 28. Megjelent: 1976. Hl. 31. 163467 Nemzetközi osztályozás: C 07 g 7/018 Fejjfcalálók: Töpper Horst oki. vegyész, Piesche Klaus oki. biológus, Dr. Schäfer Gerhardt oki. vegyész, Radebeul, Német Demokratikus Köztársaság. Tulajdonos: VEB ARZNEIMITTELWERK Dresden, Radebeul, Német Demokratikus Köztársaság. Eljárás fibrinolitikus aktivitású proteáz izolálására í A találmány tárgya eljárás fibrinolitikus aktivitású proteáznak igen tiszta formában történő izolálására. A streptokináz alkalmazása mellett egyre több kísérletet végeznek abból a célból, hogy a trombolitikus terápiát fibrinoldó hatású proteolitikus enzimek fel- 5 használásával bővítsék. Az ilyen proteázoknak már igen csekély mennyisége képes az artériás és vénás vérrögöket feloldani. A terápiásán használható proteáznak igen nagy tisztaságúnak és fiziológiás körülmények mellett toxikus mellékhatások nélkül fibrinolitikusan 10 aktívnak kell lennie. Ismeretes, hogy bizonyos penészgombák fibrinoldó aktivitással rendelkező proteázokat is tartalmazó proteolitikus enzim-keveréket képeznek. 15 Ugyancsak ismeretes, hogy az Aspergillus oryzae-ből Aspergillin 0 néven fibrinolitikus proteáz izolálható [Proc. Sjoc. exp. Biol. N. y., 99, 504 (1958)]. A proteázt a tenyészetek szűrleteiből közvetlenül, vagy IRA 400 műgyantaioncserélőn végzett előzetes tisztítás után 20 szerves oldószerekkel kicsapva dúsítják. Ezt követően a kapott csapadékokat újra szuszpendálják, szűrik és a ballasztanyagokat réz-, cink-, illetve kadmiumszulfát hozzáadásával kicsapják. A hatóanyagtartalmú folyadékot dialízis után liofilizálják [Lancet 2, 443 (1959)]. 25 A. P. Truant és F. G. Norstrom (3 256 157 sz. USA-beli szabadalmi leírás) Aspergillus oryzae, Aspergillus flavus vagy Absidja coerulea fermentálásával fibrinolitikus aktivitású proteázt állítanak elő ojy módon, hogy a tenyészet szflrletét0Co-on kétszeres térfqg^túj — 20 C°- 30 ra lehűtött etanollal elegyítik és a kivált aktív anyagot leszívatják, vagy a tenyészet szűrletét tanninoldattal elegyítik és a hatóanyagtartalmú csapa#kot 48 óra állás után +4 C°-on acetonnal keverik, amikor az acetonban oldhatatlan hatóanyag visszamarad. Ezt követően a vákuumban szárított hatóanyagot vízben szuszpendálják, az oldhatatlan részt kicentrifugájják és a hatóanyagtartalmú oldatot dialízis utáa Ijofilizélják. A 671648 sz. kanadai szabadalmi leírás eljárást ismertet nagyaktivitású fibrinolitikus szerek előállítására Aspergillus oryzae felhasználásával oly módon, hogy a nyers preparátumot vízben oldják, az pldat pH-értékét sósavval 3,5—5,5-re beállítják, majd térhálósított Dextran Sephadex G—50-en kromatografálják és sósavas vízzel végzett előhívás után a hatóanyagtartalmú frakciókat liofilizálják. B. A. Kudrjaschov [Ber. d. Akad. d. Wiss. der UdSSR 755,4,939 (1936)] azt találta, hogy az Aspergillus oryzae-n kívül az Aspergillus awamori is tartalmaz egy fibrinolitikus hatású anyagot, melyet Stefanini fentemlített módszerével (Proc Soc. exp. Biol., N. Y. 99, 504 (1958)] izplált. A. A. Imschenetzki és tsai [Ber. d. Akad. d. Wiss. der UdSSR 163, 3,737 (1965)] eljárást ismertetnek fibrinolitikus hatású proteáz előállítására Aspergillus terricola-ból, amely szerint a hatóanyagot a tenyészet szűrletéből ammóniumszulfát vagy aceton hozzáadásával kicsapják. A csapadékot centrifugálják, vízben oldják, az oldhatatlan részeket kiszűrik és a szűrletet az ammóniumszulfát és a pigmentek elkülönítése céljából 163467 1
