163407. lajstromszámú szabadalom • Eljárás L-triptofán előállítására fermentációs úton
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI LEÍRÁS 163407 Bejelentés napja: 1970. VII. 31. (GU—283) Közzététel napja: 1972. MI. 28. Megjelent: 1975. IV, 30. Nemzetközi osztályozás: C 12 d 13/06 •ÉliiÉlfl Bejelentés napja: 1970. VII. 31. (GU—283) Közzététel napja: 1972. MI. 28. Megjelent: 1975. IV, 30. ORSZÁGOS TALÁXMÁNYI HIVATAL Bejelentés napja: 1970. VII. 31. (GU—283) Közzététel napja: 1972. MI. 28. Megjelent: 1975. IV, 30. .'. ILÄ"*-" \ Feltalálók: Thiemann Joseph Ernst vegyész, Appiano Gentile (Como), Pagani Hermes vegyész, Milano, Olaszország Tulajdonos: Gruppo Lepetit S.p.A. Milano, Olaszország Eljárás L-triptofán előállítására fermentációs úton í A találmány L-triptofán fermentációval történő előállítására vonatkozik. A találmány tárgya közelebbről olyan javított fermentációs eljárás, amellyel L-triptofán nagy hozammal állítható elő. Ilyen hozam az eddig ismert és gazdaságosnak elfogadott eljárásokkal nem volt 5 elérhető. Az L-triptofán nagyon fontos tápanyag, mivel esszenciális aminosav. Az L-triptofán hiánya komoly patológiás állapotokat okoz. Ennek ellenére éveken keresztül nem vált lehetővé az L-triptofán ipari méretekben alkal- 10 mázható előállítása. Az aminosavak fermentációval történő előállítását csak rendkívül korlátozott mértékben végzik többnyire azért, mivel a mikroorganizmusok nem halmoznak fel jelentősebb mennyiségben aminosavat. Néhány aminosav akkumulációját auxotrop (ser- 15 kentő) mutánsokkal sikerült elérni, az L-triptofán esetében azonban ezt nem sikerült megvalósítani. Az aminosav fermentációval történő akkumulálásának sikertelensége azzal magyarázható, hogy a mikroorganizmusoknál egy úri. önemésztő rendszer (feedbeck system) 20 alakult ki, ez korlátozza az aminosavak termelését olyan mértékben, hogy csak a sejtek fenntartásához szükséges mennyiségű aminosav képződik. De reptesszáh mutánsok előállítására, amelyeknél az L-triptofán nem gátolja a képződéséhez szükséges en- 25 zim rendszert, triptofán antimetabolitokra rezisztens telepeket izoláltak. {Adelberg, H. A. szerző a „J. Bacteriol." 76, 326, 1958.) Korábbi közlemények és szabadalmak ismertetik prekurzoroknak a fermentációs táptalajhoz való ada- 30 golását, ahol prekurzorként például indolpiroszőlősavat, indolt, indoltejsavat, antranilsavat használnak fel. Ezekkel a műveletekkel azonban a hozam javulása nagyon korlátozott és csak alacsony %-os hozamok érhetők el. Azt találtuk, hogy a Bacillus subtilis mutációjával előállítható mikroorganizmus fermentálásával afltranilsav vagy indol prekurzort tartalmazó fermentációs táptalajban olyan L-triptofán hozam érhető el, amely sokkal magasabb, mint az eddigiek. A Bacillus subtilis mutációjával kapott mikroorganizmust S—10 rövidítéssel jelöljük. Ezzel a törzzsel az L-triptofán a mikroorganizmusok fermentációjánál általánosan használt táptalajokon termelhető. Ez a táptalaj természetes vagy mesterséges szén- és nitrogén-forrásokat tartalmazhat. Meglepő módon azt találtuk azonban, hogy L-triptofánra számítva magasabb hozamok érhetők el egy ún. szintetikus táptalajon, amely természetes anyagokat, mint pl. peptont, élesztőkivonatot, marhahúskivonatot, kukoricalekvárt stb. nem tartalmaz. Ez a megfigyelés teljesen új és a találmány szerinti eljárás egyik jellemzője. Külön bizonyításra nem szorul, hogy a szintetikus táptalajok felhasználása gazdaságossági szempontból is előnyösebb. Ennek folytán a találmány szerinti eljárásban az L-triptofán-termelő új mikroorganizmus és az igen gazdaságos szintetikus táptalaj különösen előnyössé teszi a nagyipari gyártást. A következő példákban részletesebben leírt eljárás szerint az S—10 mutáns egyik törzsét aerob körüliné-163407 1
