162965. lajstromszámú szabadalom • Eljárás magas forráspontú fermentációs termékek kinyerésére

162965 8 szuszpenziót leszűrjük, és a szilárd anyago^ 2,00 ml friss amilacetáttal mossuk. A teljes oldószeres fázis térfogata 1050 ml, és 4,43 mg/ml penicillinnek megfelelő aktivitást tartalmaz. Az oldat egyrószét az -1. páldában leírt módon kristályosítva tisztítjuk. , 3. példa: 1 liter teljes monenzin fermentléhez, amely aktivitása 2,26 mg/ml, 1500 ml n-hexilalkoholt adunk. Az elegyet azeotrop desztillációnak vetjük alá 98 C°-on, atmoszférikus nyomáson, míg csak az oldószerfázis marad vissza. A szuszpenziót lehűtjük, szűrjük és a szilárd anyagot 100 ml friss n-hexüalkdhollal mossuk. A szűrletet vákuumban kb. 30 C°-on addig pároljuk be, míg egy olajos fázis marad vissza. Az olajhoz 500 ml metanolt adunk, és az elegyet egy olajos és egy metanolos fázisra választjük szét. A metanol 1,89 g monenzinnek megfelelő aktivitást tartalmaz. A monenzin egy részét a metanolos oldatot bepárolva és a maradékhoz vizet adva feltárjuk. A kristályos mohenzint ezután leszűrjük. 4. példa: Egy folyamatos ejtőfilmes bepárlóba 35 liter benzi'lalköholt töltünk. A bepárlót 70 Hgmm-es vákuum alá helyezzük 50 C°-on és az oldószert 18,17 liter/perc sebességgel cirkuláltatjuk. A bepárlóba folyamatosan 8,75 mg/ml aktivitású teljes monenzirufermentlevet töltünk, 50 liter/óra sebességgel, és 27 liter/óra sebességgel friss benzilalkoholt. Az azeotropot kondenzáljuk és a szárazanyagból és monenzinben dús oldószerből álló szuszpenziót időnként elvonjuk a bepárlóból, úgyhogy a bepárlótestben állandó, 35 literes térfogatot tartsunk. Az oldószert dekaniáljuk a szilárd anyagról, és megmérjük a monenzin aktivitást. A monenzinnek összes termelése a teÖjes fermentléből az Oldószeres extraktumba ezzel az eljárással 90%. 5. példa: Egy 1363 literes, 908 liter n-hexilalkoholt tartalmazó desztilláló berendezésbe lassan 454,3 liter feraientlevet töltünk, amely Xanthomonas campestris N'RRL B—«1459 mikroorgarizmus által termelt poliszaharidot, dextránt tartalmaz. A fermentlé szilárdanyag tartalma kb. 3%, viszkozitása pedig 7800 qp. A viszkozitás a poliszaharid koncentrációjának és molekulasúlyának jellemzője. Az elegyet 98 C°-on azeotrop desztillációnak vetjük alá, és az azeotrop elegyet a fejben kondenzáljuk. A desztilláció végeztével a hőmérséklet 102 C°-ig emelkedik. Az n-<hexílalkoholban oldhatatlan dextránt leszűrjük és 71 C°-os meleg levegővel szárítjuk. A száraz, olajmentes poliszaharid termék hosz-10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 szú szárítás során is stabil. A terméket vízben eredeti térfogatára visszaoldva, az oldat viszko, zitása 7100 cp. 6. példa: A példában bemutatjuk a ceíalosporin P feltárását teljes cetfalosporin C fermentléből. A ceíalosporin P mikrobiális szteroid vegyület, amely nyomnyi mennyiségiben van jelen a teljes ceíalosporin C fermentlében. A szteroidot nehéz kinyerni és tisztítani. 150 ml teljes ceíalosporin C íermentlevet, melynek pH-ját 10,5-re állítottuk be 5 N nátriumhidroxiddal, és 250 ml n-hexilalkoholt vákuumban kb. 35 C°-on azeotrop desztilláiciónak vetünk alá és ezt addig végezzük, míg csak egy folyadékfázis marad vissza. Az oldószeres fázist dekantáljuk a szilárd anyagról és a ceíalosporin P tartalmat papírkromatográfiávail vizsgáljuk. A mérés pontosságán belül megállapítható, hogy a ceíalosporin P teljesen az oldószerbe ment át. A ceíalosporin P elválasztását az oldószerből bepárlással végezzük. 7. példa: 200 ml, 6,80 mg/mí aktivitású ceíalosporin C teljes fermentlé és 200 ml n-hexilalkohol elegyét azeotrop desztillációnak vetjük alá, vákuumban kb. 30 C°-on, míg csak a szilárd anyagnak az egy folyékony fázisban alkotott szuszpenziója marad vissza. A szuszpenziót leszűrjük, és a szilárd anyagot 49 C°-on szárítjuk. A szilárd anyagnak ceíalosporin C-re történő analízise azt mutatja, hogy az oldószerben oldhatatlan ceíalosporin C 78%-át nyertük ki a száraz szilárd termékben. 8. példa: 200 ml, 41S0 mg/ml aktivitású, 9,5 pH-értékre 1 N nátriumhidroxiddal beállított tilozin teljes fermentlé és .250 ml n-thexilalkohol elegyét vákuumban 30 C°-on addig Vetjük alá azeotrop desztillációnak, míg csak egy folyékony fázis marad. A desztillációs maradékot szűrjük, és a szűrlet mutatja az analízis szerint a tilozin aktivitást. 9. példa: A citromsav fermentatív úton előállított szerves sav. Oldhatósága vízben 20 C°-on 207 mg/ /ml, míg benzilalkoholban csak 65 mg/ml. Ez az extrakciós úton történő kinyerést megnehezíti, mivel a víz és benzilalkoíhol között rossz a 60 megoszlási koefficiens. Ezért a citromsavat a fermentléből a 8. példában leírt módszerrel vihetjük át a benzilalkoholba, a teljes tilozin fermentlé helyett teljes citromsavfermentlevet, a hexilalkohol helyett pedig benzilalkoholt hasz-65 nálva.