162965. lajstromszámú szabadalom • Eljárás magas forráspontú fermentációs termékek kinyerésére
9 162965 10 10. példa: A Cephalosporium acremonium által termelt exoenziim, az Arilamidáz III vízben oldható, azonban igen oldhatatlan szerves oldószerekben. 670 egység per mg protein specifikus akti.vitású teljes fermentlevet azeotrop úton desztillálhatunk, n-ihexilalkolhollal, míg csak egy folyadékfázis marad vissza. Az oldhatatlan enzimet a desztillációs maradéktól szűréssel választhatjuk el. Hasonló elválasztást érhetünk el a hexilalkohol helyett benzilalkoholt használva. 11. példa: 2500 ml cefalosporin C teljes fermentlé aktivitását 5,92 mg/ml-nek mértünk. Az N-klóracétil-cefalosporin C származékot állítottuk elő. a teljes fermentlevet kilencszeres egyenértéknyi vegyes propionsav-klórecetsavanhidriddel kezelve. Ezután a táptalajhoz 2500 ml ciklohexanont adunk, és az elegyet 40 C°-on és 20 Hgmm nyomáson azeotrop desztillációnak vetjük alá. Mikor már csak egy fázis maradt, a szuszpenziót leszűrjük, és a szűrletet egy liter ciklohexanonnal mosva eltávolítjuk a szilárd anyagon adszorbeált N-klóracetil-cefalosporin C-t. 1490 ml antibiotikus aktivitású oldószert kapunk, ez 82,4%-os termelésnek felel meg. 12. példa: 1135 liter teljes cefalosporin C fermentlé aktivitását 5,61 mg/ml-nek mértük. Az N-klóracetil-cefalosporin CHSzármazékot állítjuk elő, a teljes fermentlevet a cefalosporinra - számított hétszeres egyenértéknyi vegyes propion-klórecetsavanhidriddel kezelve. Ezután 1135 liter ciklohexanont adunk hozzá, és az elegyet egy recirkulációs bepárlón 50 C°-on és 60 Hgmm nyomáson azeotrop desztillációnak vetjük alá. Mikor már csak egy folyadékfázis maradt, a szuszpenziót leszűrjük, *-330 liter, antibiotikus aktivitású oldószer marad vissza, a termelés 54%. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás 200 C° feletti forrásponttal rendelkező fermentációs termékek előállítására, vizes fermentléből, azzal jellemezve, hogy a fermentléhez olyan szerves oldószert adunk, amely a vízzel azeotrop elegyet alkot, és melynek 100 gjában a víz 25 C°-on legfeljebb 10 g mennyiségben oldódik, az elegyet addig vetjük alá azeotrop desztillációnak, míg a maradék víz teljesen oldódik a szerves oldószerben, és a fermentációs terméket elválasztjuk a desztillációs maradéktól, mikoris az eljárás során a fermentléhez a szerves oldószert feleslegben adagoljuk a víz azeotrop úton történő eltávolításához szükséges mennyiséghez képest. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja azzal jellemezve, hogy olyan fermentlevet használunk . kiindulási anyagként, amelyben a fermentációs termék oldva v,an, és 5 a desztillációs maradékból a fermentációs terméket szűréssel, az oldószer lepárlásával egy, a terméket nem oldó oldószer adagolásával történő kicsapással, nem oldódó só képzésével, vagy extrakcióval választjuk el. 10 3. A 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja vízben és szerves oldószerben egyaránt oldódó fermentációs termék elválasztására a fermentléből azzal jellemezve, hogy olyan fermentlevet használunk kiindulási anyagként, 15 melyben a fermentációs termék oldva van, és a desztillációs maradékból a fermentációs terméket az oldószer bepárlásával, egy, a terméket nem oldó oldószer adagolásával történő kicsapással, nem oldódó só képzésével, vagy ex-20 trakcióval választjuk el. 4. A 3. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja penicillin V, penicillin G, tilozin vagy eritromicin elválasztására,,vizes f érmen t-25 léből azzal jellemezve, hogy a fenti antibiotikumokat tartalmazó vizes fermentléből indulunk ki, és a desztillációs maradékból a fermentációs terméket a maradék szűrése után az oldószer lepárlásával, .egy, a terméket nem oldó oldószer 30 adagolásával történő kicsapással, nem oldódó só képzésével vagy extrakcióval választjuk el. 5. A 3. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja N-klóracetil-cefalosporin elválasztására vizes fermentléből azzal jellemezve, hogy 35 az N-Klóracetil-oefalosporint tartalmazó vizes fermentléből indulunk ki, és a desztillációs maradékból a fermentációs terméket a maradék szűrése után az oldószer lepárlásával, egy, a terméket nem oldó oldószer adagolásával tör-40 ténő kicsapással, nem oldódó só képzésével vagy extrakcióval választjuk el. 6. A 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja szerves oldószerben oldhatatlan fermentációs termék elválasztására fermentlé-45 bői azzal jellemezve, hogy a fermentációs terméket tartalmazó vizes fermentléből indulunk ki, és a desztillációs maradékból a fermentációs terméket szűréssel választjuk el. 7. A 6. igénypont szerinti eljárás foganato-50 sítási módja cefalosporin C előállítására azzal jellemezve, hogy cefalosporin C fermentléből indulunk ki, és a desztillációs maradéktól a cefalosporin C-t szűréssel s?áias2tjuk el. 8. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganato-55 sítási módja vízben oldhatatlan fermentációs termék elválasztására fermentléből azzal jellem mezve, hogy a vízben oldhatatlan terméket tartalmazó vizes fermentléből indulunk ki, ós a desztillációs maradéktól a fermentációs termé-60 ket szűréssel, az oldószer lepárlásával, egy, a terméket nem oldó oldószer adagolásával történő kicsapással, nem oldódó só képzésével vagy extrakcióval választjuk el. 9. A 8. igénypont szerinti eljárás foganato-65 sítási módja szerves oldószerben oldható fer-5