162933. lajstromszámú szabadalom • Eljárás N-tritil-imidazolok és sóik előállítására
11 162933 12 b) Sarjadzó gombákhoz Szőlőcukor táptalaj: 13 g oxid tápanyag 10 g szőlőcukor 1 liter tápoldatra. 1,5% agar-agar hozzáadásával az oldatot lemeztenyészet céljára kocsonyássá tettük. A sterilizálás (20 perc, 1 atm) utáni pH-érték = 6,2. Az inokulum bőrön élősködő gombáknál folyadéktenyészetben 1X104 fertőző rész pro 20 ml szubsztrátum, sarjadzó gombáknál átlagosan 2— —5X105 pro ml szubsztrátum. A tenyészetés hőmérséklete 28 C° volt, időtartama 24—96 óra. „In vivői" kísérleteik Terápiás hatás egéren és tengerimalacon (lásd: 2.-6. táblázatokat) a) Kísérleti candidiasis 20—22 g súlyú fehér egeréket ( ) a CF t— —SPF törzsből egyenként 1—2X106 Candida albicans sejtekkel (24 órás tenyészet, fotométeren zavarosságméréssel beállítva) a farökvénán intravénásán megfertőztünk. A 'kezeletlen állatok a fertőzés következeiében a fertőzést követő 3. naptól, főleg a 4. és 5. napon kimúltak. A terápiás kísérletben mindegyik dózisnál 20 állatot és 20 kontroli-állatot használtunk. A gyógyszert orálisan és parenterálisan, 1—0,5 órával a fertőzés előtt és 6—8 órával a fertőzés után adagoltuk. A minderikori dózist (a fertőzés napján kétszer 100 img/kg testsúly) orálisan 0,5 ml glukózagárban (5% glukóz, 0,2% agar-agar, 2% DMF a preparátum oldásához, víz ad 100) alkalmaztuk, parenterálisan pedig 0,2 ml 2%-os DMF-víz oldatban. b) Kísérleti trichophytia fehér egéren, Trichophyton quinkeanum által előidézve A CFi—SPF törzs 20—33 g súlyú hím vagy nőstény állatainak hátán a szőrt megnyestük, úgy, hogy az ~3—10 mm legyen ós a bőrt ne sértsük meg. Ezt követően az állatok megnyírt bőrrészét Trich. quindkeanum tápoldatban levő, 24 órás spóratenyészetének 0,2 ml-ével bedörzsölve megfertőztük. A trichophyton-tenyészet átlagosan 3000—4000 fertőző részt tartalmazott pro ml. Ezt a technikát alkalmazva 8—12 nappal a fertőzés után a fertőzés helyén számos (20-ig) 0,8—2,2 mm átmérőjű scutula képződött, amelyek a 16.—20. naptól leestek és kis, Véres sebhely maradt utánuk, Kontroll- és terápiásállatot egyaránt 20—20 darabot használtunk. Terápiás célból az állatoknak a fertőzés napjától a fertőzést követő 8. napig naponta egyszer per os 100 mg/kg dózist adagoltunk (24 órán át 0,5 ml glukóz-agar-oldatban szuszpendálva). A 14. napon megtszámoltük azokat az egereket, amelyeken scutula nem képződött, tehát fertőzés nem alakult ki. Perenterális vagy lokális terápiát alkalmazva azonos eredményeket kaptunk. c) Kísérleti histoplasmosis egéren, a Histoplasma capsulatummal előidézve Az egéren Histoplasma capsulatum által elő-5 idézett kísérleti histoplasmosis igen egyformán lefolyó fertőző kórképet mutat, ami a fertőzés utáni 4.—6. napon a fertőzött egér kimúlásához vezet. A fertőzést 5X105 H. capsulatum sejttel (36 órás tenyészet) intravénásán 0,2 ml térfogat-10 tal CFi—SDF törzsbeli egereken végeztük. A kontroll- és terápiás csoportban egyaránt 20—20 allatot alkalmaztunk. A terápiás dózis egyszer 100 mg/kg testsúly, orálisan, 1,5—0,5 órával a fertőzés előtt, vagy 3 órával a fertőzés 65 után. A fertőzést követő 6. napon megállapítottuk a fertőzést túlélő állatok számát, (Eredményék a táblázatokban.) d) Kísérleti fertőzés Aspergillus spórákkal 20 i. v. vagy i. p. formában fertőzve A CFt — SDF törzsibeli egereknél 5X104 csíra — főképpen a vesében végbemenő — kórképet okoz, ami a fertőzött állatok ~80%-nál a fer-65 tőzést követő 16.—20. napon elhullást okoz. A terápiát a fertőzés napján orálisan 2X50 mg/kg dózissal megkezdtük és 5 napon át folytattuk. A 20. napon a túlélő állatokat megszámoltuk. 30 e) Kísérleti Criptococeus-f ertőzés egéren A CFj—SPF törzsből származó 20—22 g súlyú fehér egerek (cT) farokvénáját egyenként IX X105 Criptococcus-sejttel fertőztk. A fertőzést 35 követő 2.—7. napon a kezeletlen állatok a fertőzés következtében kimúltak. A kísérletben 20— 20 terápiás és kontrollállatot használtunk. A terápiát orálisan és parenterálisan alkalmaztuk 1—0,5 órával a fertőzés előtt és 6—8 órával a 40 fertőzés után, Az orálisan beadott mindenkori dózist 0,5 ml glukóz-agárban (5% glukóz, 0,2% agar-agar, 2% DMF a készítmény feloldásához, víz ad 100) alkalmaztunk parenterálisan 0,2 ml 2%-os DMF-vizes oldatban. A dózis 2X50 mg/kg 5 testsúly, 24 óránként beadva. A fertőzést követő 5. napon a túlélő állatokat megszámoltuk. f) Kísérleti Microsporon-fertőzés tengerimalacon 50 Saját tenyésztésiből származó és dermatophyton fertőzéstől biztosan mentes, fehér simaszőrű tengerimalacok (<$ vagy $ ) sértetlen hátabőrét Mikrosporon 1,0 ml spóraszuszpenziójával, amely 55 mintegy 10 4 fertőző részt tartalmaz mililiterenként, bedörzsölve megfertőztük. Lokális terápiát alkalmaztunk 1%-os oldattal, a fertőzést követő 3. naptól a 16. napig. A bőr gombásodását nagyság és mélység szerint megállapítottuk, összeha-60 sohlítva a kezeletlen kontroUállatak állapotával. A gombásodás mértékét 0—5 számmal jeleztük, ahol 0 klinikailag fertőzésmentességet, 5 mély, véres fekélyesedést jelent. (A táblázatokban 0 = 100%, 5 = 0%.) 65 A találmány szerinti N-tritil-imidazolok mint 6
