162758. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-alfa-ciano- acilamino-cefalosporánsavszármazékok előállítására

162758 21 22 Szilikagélen végzett vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat során Rfs2A = 0,44, Rf etilacetátjégecet (9:1) rendszerben, 16 cm futástávolságnál = 0,93. 12. példa 207 mg 7-(a-fenil-a-ciánacetilamino)-cefalosporánsav 4,5 ml pH 6,7 (10%-os) foszfátpufferes oldatában 86 mg 2-metil-l,3,4-tiadiazolin-5-tiont (lásd Acta Chimica Scand., 20, 69 [1966]) szuszpendálunk. Ezután 2,7 ml 10%-os kálium-dihidrogén-foszfát oldat intenzív keverés közben történő hozzáadásával a pH-t 6,5-re állítjuk és nitrogénatmoszférában 7 óra alatt 60o-on melegítjük. Ezután lehűtjük az elegyet, és kétszer 40— 40 ml etilacetáttal extraháljuk. A szerves fázisokat 3—3 ml pH 6,5 pufferrel visszamossuk, majd eldobjuk. Az egyesített vizes fázisokra 50 ml etilacetátot rétegezőnk, és intenzív keverés közben 4 n sósavoldattal pH 2,6-re állítjuk. Az ekkor keletkezett barna csapadékot szűréssel eltávolítjuk. A fázisokat eltávolítjuk, a vizes fázist konyhasóval telítjük, és 30 ml, majd 20 ml etilacetáttal extraháljuk. A szerves fázisokat kétszer 5-5 ml telített konyhasóoldattal kirázzuk, majd nátriumszulfát felett szárítjuk és vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot kloroform-aceton (1:1) elegyben oldjuk, 20 g szilikagéllel töltött oszlopon (átmérő-magasság arány 1:9) szűrjük és vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot kevés acetonban oldjuk és 3 m metanolos nátrium-ct-etil-hexanoátoldattal 7-(a-fenil-a-ciánacetilamino)-3-(2-metil-l,3,4-tiadiazol-5-iltio)-metilcef-3-em-4-karbonsav-nátrmm sóvá alakítjuk át (102 mg). Szilikagélen végzett vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat során Rfs2A — 0,49, Rf etilacetátjégecet (9:1) rendszerben, frontelmozdulás 15 cm, Rf = 0,25. Összehasonlításképpen 7-brómacetil-cefalosporánsavra Rfs2A =

0,41, etilacetátjégecet (9:1) rendszerben 15 cm-es írontelmozdulásnál Rf = 0,36. 13. példa 521 mg 7-[a-tienil(2)-a-ciánacetilamino]-cefalosporánsav 9 ml 10%-os foszfátpuff err el pH = = 6,7 készített oldatában 152 mg l-metil-5-merkapto-tetrazolt szuszpendálunk. A reakcióelegy pH-ját 3,75 ml 10%-os kálium-dihidrogén-foszfát oldat hozzáadásával 6,5-re állítjuk be intenzív keverés mellett, majd nitrogénatmoszférában 7 óra hosszat 60 C°-on tartjuk. Az elegyet lehűtjük és egymásután 50 ml majd 25 ml etilacetáttal extraháljuk. A szerves fázist kétszer egyenként 5 ml pufferral (pH = 6,5) visszamossuk és elöntjük. Az egyesített vizes fázisokat 80 ml etilacetáttal rétegezzük és erős keverés közben 2n sósav segítségével 2,6-ra állítjuk be a pH-t. A keletkező barna csapadékot szűréssel eltávolítjuk. A fázisokat elválasztjuk, a vizes oldatot konyhasóval telítjük és 50 ml, majd 25 ml etilacetáttal extraháljuk. Ezután a szerves fázist kétszer egyenként 10 ml telített konyhasóoldattal kirázzuk, nátriumszulfát felett szárítjuk és vákuumban kb. 5 ml térfogatra töményítjük be. Ehhez az oldathoz intenzív keverés közben cseppenként 5 ml hexánt adunk és a reakcióelegyet 5 több órán keresztül hűvös helyen állni hagyjuk. A maradékot leszívatjuk és etilacetát-hexán 1:1 arányú elegyével mossuk. A szürletet acetonos oldatból 2,5 g semleges szilikagélen adszorbeáljuk. 10 A száraz adszorbeátumot 25 g semleges szilikagéllel töltött oszlopra visszük fel 0: 2,0 cm, magasság =17 cm és 2 térfogatrész kloroform és 1 térfogatrész aceton elegyével eluáljuk. Az első 50 ml-t eldobjuk, a következő frakciók tartal-15 mázzák a nyers reakcióterméket. Ezeket vákuumban szárazra bepároljuk, a maradékot 40 térfogatrész acetonban oldjuk, 10 térfogatrész metanolt adunk hozzá, majd 3 m metanolos nátrium-a-etilhexanoát hozzáadásával a 7-[a-tie-20 nil(2)-a-ciánacetilamino]-3-(l-metiltetrazol-5--tio)-metilcef-3-em-4-karbonsav nátriumsójává alakítjuk át. Szilikagélen végzett vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat során RÍBSA = 0,42 Rf etilacetát-25 jégecet (9:1) rendszerben 15 cm-es futástávolságnál = 0,3. 14. példa 30 675 mg 7-(a-p^klórfenil-(i-ciánaoetilamiino)-cefalosporánsav 15 mg 10%-os foszfátpufferrel pH = 6,7 készített oldatában 228 mg l-metil-5--merkapto-tetrazolt szuszpendálunk. A reakcióelegy pH-ját 5,6 ml 10%-os dikáliurn-hidrogén-35 foszfát oldat hozzáadásával 6,5-re állítjuk be intenzív keverés mellett és az elegyet nitrogénatmoszférában 7 óra hosszat 60 C°-on tartjuk. Az elegyet lehűtjük és egymásután 80 ml, majd 40 ml etilacetáttal extraháljuk. A szerves fázist két-40 szer egyenként 5 ml pufferrel (pH = 6,5) visszamossuk és elöntjük. Az egyesített vizes fázisokat 100 ml etilacetáttal rétegezzük és intenzív keverés közben a pH-t 2n sósavval 2,6-re állítjuk be. A keletkező barnás csapadékot szűréssel eltávo-45 Htjuk. Elválasztjuk a fázisokat, a vizes fázist konyhasóval telítjük és 80 ml, majd 40 ml etilacetáttal extraháljuk. Ezután a szerves fázist kétszer egyenként 10 ml telített konyhasóoldattal kirázzuk, nátriumszulfát felett szárítjuk és 50 vákuumban kb. 10 ml térfogatra bepároljuk. Ehhez az oldathoz erős keverés közben kis adagokban 10 ml hexánt adunk, majd több órán keresztül hűvös helyen állni hagyjuk. Leszívatjuk, majd a maradékot etilacetát és hexán 1:1 55 arányú elegyével mossuk. A szürletet eldobjuk. A maradékot acetonos oldatból 4 g semleges szilikagélen adszorbeáljuk. A száraz adszorbeátumot 40 g semleges szilikagéllel töltött oszlopra visszük fel (0 2,4 cm, magasság: 18,5 cm) és 2 60 térfogatrész kloroform és 1 térfogatrész aceton elegyével eluáljuk. Az első 60 ml-t eldobjuk, a következő frakciók tartalmazzák a nyers reakcióterméket. Ezeket vákuumban szárazra bepároljuk, a maradékot 40 térfogatrész acetonban 65 oldjuk, 10 térfogatrész metanolt adunk hozzá és 11