162135. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a polimixinekből származó ciklusos polipeptidek előállítására

162135 5 6 2. példa Összetétel: számított: N-*0 23,98% talált: N-'O 23,70% 5 3,51 g kolisztinnek 140 ml dirnetilformamiddal készült oldatához hozzáadunk 16,5 g vegyes (3--piridil^metil)-(p^nitrofenil)-karbonátot. Kb. 20 C°-on való 48 órai keverés után az oldhatatlan részt kiszűrjük, és a szűredéket 0,3 torr nyomáson 55 C°-on bepároljuk. Az üvegszerű maradékot feloldjuk 180 ml forrásban levő nitrometánban; a tevés oldhatatlan részt szűréssel elválasztjuk. A szűredéket 2,5 óra hosszat 0 C°-on tartjuk, 'majd a keletkezett csapadékot szűréssel elválasztjuk, 10 ml jeges nitrometánmal mossuk, majd 0,3 torr nyomáson 50 C°-on 16 őra hosszat szárítjuk. Így 3,85 g penta-N-(3-piridil-metoxikarbomil)-kólisztint kapunk. Rf = 0,74 (kovasavgélen, 50:20:6:24 térfogaitarányú n-butanol-piridin-ecetsav-víz rendszerrel). Összetétel: számított: C 57,28%, H 6,82%, N 15,94% talált: C 57,70%, H 6,67%, N 15,78% j. példa 1,3 g penta-N-(3-piridil-metoxikarbonil)-kolisztinnek 150 ml metanollal készült oldatához hozzáadunk 1,3 g p-nitroperbenzoesavat, A reakciókeveréket 20 C°-oin 16 óra hosszat keverjük, majd 20 torr nyomáson 50 C°-on bepároljuk. A száraz maradékot 3 ízben szobahőmérsékleten, majd 3 ízben 50 C°-on 20 ml acetonnal mossuk. 0,3 torr nyomáson 20 C°-on megszárítva 959 mg penta-N-(N-oxido-3-piridil-metoxi-karbonil)-kolisztint kapunk. R; = 0,32 (kovasavgélen ; 50:20:6:24 térfogatarányú n-butanol-piridinecetsav-víz rendszerrel). 4. példa 10,9 g 3-hidroximetil-piridinnek 200 ml etilacetáttal készült 0 C°-ra hűtött oldatához hozzáadunk 21,96 g p-nitroperbenzoésavat. 0 C°-on való 15 perces keverés után a reakciókeveréket lassan kb. 20 C°-ra hagyjuk melegedni, a keletkezett csapadékot szűrőre visszük, 100 ml etilacetáttal mossuk, és 0,3 torr nyomáson kb. 20 C°-on megszárítjuk. Az így kapott terméket 200 ml desztillált vízben szuszpendáljuik, ehhez a szuszpenzióhoz 90 ml karbonátfázisban levő Amberlite IRA 402 gyantát adunk, és a keveréket 25 percig kb. 20 C°-on keverjük. A gyantát szűréssel eltávolítjuk, és 2 ízben 100—100 ml desztillált vízzel mossuk. A szűredéket és a mosófolyadékot egyesítjük, és 20 torr nyomáson 55 C°-on bepároljuk. A kapott olajat 80 ml forró etilacetátban oldjuk. Az oldatot lassan 20 C°-ra hagyjuk hűlni, és 15 percig ezen a hőmérsékleten tartjuk, majd a csapadékot szűréssel elválasztjuk, és 50 ml etilacetáttal mossuk. 0,3 torr nyomáson 20 C°-on megszárítva 11,6 g 3-hidroximetil-piridin-N-oxidot kapunk 90 C° olvadásponttal (Kofler-blokkon), 5. példa 1 g 3-hidraximetil-piridin-N-oxidnak 14 ml piridinnel készült 0 C'°-ra -hűtött oldatához kis részletekben 30 perc alatt hozzáadunk 1,61 g p-nitrofemlklórformiátot. A reakciókeverék keverését 17 óra hosszat 20 C°-on folytatjuk. A keletkezett csapadékot szűréssel elválasztjuk, 2 ízben 4 ml piridinnel mossuk, és 0,3 torr nyomáson 20 C°~ori megszárítjuk. Így 1,2 g vegyes (N-oxido-3-piridil-metil)-(p-nitrofenil)-karbonátot kapunk. Olvadáspontja 160 C'° (Koflerblokkon). 6. példa 15,1 g vegyes (3-piridil-metil)-(p^nitrofenil)karbonátnak 400 ml kloroformmal készült oldatához hozzáadunk 12,1 g p-nitroperbenzoesavat. 20 C°-on való 16 órai keverés után a kivált csapadékot szűrőre visszük, és 2 ízben 100 ml kloroformmal mossuk. A szűredóket és a mosófolyadékot egyesítjük, és 17 torr nyomáson 30 C°-on szárazra pároljuk. A maradékot 600 ml éterben szuszpendáljuk, ós a szuszpenziót 10 percig élénken keverjük. Az oldhatatlan részt szűréssel elválasztjuk, és ismét 600 ml éterben szuszpendáljuk. 10 perces keverés után az oldhatatlan részt szűréssel elválasztjuk, 100 ml éterrel mossuk, és 0,3 torr nyomáson 20 C°-on megszárítjuk. Ily módon 14,9 g vegyes (N-oxido>-3-piridil-metil)-(p-nitro'fenil)-ka,rbonátot kapunk. Rf = 0,4 (kovasavgélen; 2:8 térfogatarányú metanol-l,2-diklór-etánnal). 7. példa 12 g kolisztinnek 900 ml dimetilfoirmamiddal készült szuszpenziójához hozzáadunk 30 g ve-50 gyes (N-oxido-3-piridil-metil)-(p-nitrofenü)-karbonátot. 20 C°-on való 64 órai keverés után az oldhatatlan részt szűréssel elválasztjuk. A szűredéket 0,3 torr nyomáson 50 C°-on térfogata 2lz

részére koncentráljuk. A koncentrátumhoz 55 500 ml étert adunk. A kivált olajat elválasztjuk, és 500 ml metanolban oldjuk. A kapott oldathoz 500 ml étert adunk. Olaj válik ki, majd kikristályosodik. 20 C°-on való 15 órai állás után a kivált kristályokat szűréssel elválasztjuk, 100 ml 60 éterrel mossuk, és csökkentett nyomáson (0,3 torr) 20 C°-on megszárítjuk. Ily módon 16,8 g penta-N-(N-oxido-3-piridil-metoxikarbonil)-kolisztint kapunk. Rf = 0,32 (kovasavgélen; 50:20:6:24 térfogatará-65 nyú n-butanol-piridin-ecetsav-víz rendszerben). 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 3