161606. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-aminocefalosporánsav-származékok előállítására
161606 eleggyel, tetrahidrofuránnal és végül hexánnal. Szárítás után 7-(imidazolinil(2)-merkaptoacetilarnino)-cefalosporánsavat kapunk színtelen amorf porként, amely kromatográfiásan kimutatva egységes. Rf52 = 0,05; RfioiA = °-25 - °-P (evakuált kapilláris): 213-215* (bomlás közben). Optikai g forgatóképesség:fa|jj = *143*_^ 2* (vízben,c = 1). 3. példa 10 3,93 g brómacetil-7-ACA-t 3,45 ml N,N-diizopropiletilamin hozzáadása közben 27 ml metilénkloridban oldunik. Ehhez egy olyan oldatot adunk, amelyet úgy készítünk, hogy 1,43 g 2-merkaptotiazolint 2 ml dimetilformamidban oldunk, jg majd ezt követően 8 ml metilénkloriddal hígítjuk. 10 ml metilénkloriddal utánamossuk. 7 óra múlva az oldószert először vízsugárszivatty us vákuumban, majd kb. 0,3 Hgmm-es vákuumban HO'-os vízfürdőn) eltávolítjuk. így 7 g sűrűn folyó olajat kapunk. JQ Ennek a nyersterméknek 6,3 g-ját 27 ml 109;-os káliumdihidrogénfoszfát oldattal felvesszük. 0,3 ml 2-N szódaoldat hozzáadásával az oldat pH-ját 5-re állítjuk be. Ezután az oldatot választótölcsérbe öntjük, és először 55 ml metilénkloriddal, majd 90 ml etilacetattal extraháljuk. A 25 szerves lázisokat egymás után kétszer 45-45 ml pH = 5-ös foszfatpufferrel mossuk és eldobjuk. Ezután a? összes vizes fázist egyesítjük és 180 ml etilacetáttal kirázzuk, majd 11 ml I-N sósav hozzáadásával a pH-t 2,9-re állítjuk be és a vizes fázist konyhasóval telítjük. Jól kirázzuk, a fázisokat 30 elválasztjuk, és a vizes fázist még kétszer 90-90 ml etilacetáttal extraháljuk. A szerves fázisokat egymás után 45 ml telített konyhasóoldattal mossuk, nátriumszulfáttal szárítjuk, egyesítjük, és vákuumban szárazra pároljuk. Az amorf maradékot, 6 ml etilacetát-tetrahidrofurán (9:1) 35 elegyet hozzáadva, csaknem teljesen kikristályosítjuk. A kristályokat (1,76 g) leszivatjuk és etilacetáttal mossuk. Tisztítás céljából 15 ml tetrahidrofuránban oldjuk, egy spatulahegynyi „Norit"-tal szobahőmérsékleten rázatjuk, „Hyflo Supercel" rétegen keresztül szűrjük, a szűrőt 5 ml 40 tetrahidrofuránnal mossuk, az oldószert vákuumban eltávolítjuk és az amorf maradékot 5 ml etilacetát-tetrahidrofurán (9:1) elegyből kikristályosítjuk. A kristályokat leszivatjuk, etilacetáttal mossuk, és magas vákuumban szárítjuk. így tiszta 7-(tiazolinil-(2)-merkaptoacetilamino)- 45 cefalosporánsavat kapunk. O.p.: 131-138* (evakuált kapillárisban, bomlás közben). A nátriumsó előállítása céljából 1,6 g savat 32 ml metanolban szuszpendálunk, és 2,1 ml 3-M metanolos nátriummetilhexanoátot adunk hozzá. Az így kapott oldatot vákuumban 8-10 ml térfogatra pároljuk be és 50 kb. 2,5 órán át -20*-on állni hagyjuk. Ezután leszivatjuk és a nátriumsót egymás után 12 ml metanol-etilacetát (1 : 1) eleggyel, 5 mi etilacetáttal és hexánnal mossuk. A nátriumsó olvadáspontja: 185-186* (bomlás közben). Optikai forgatóképesség: |a|'D ° = •120*il* (vízben, c = 1). IU52 = 0,26 :>5 Rf10 iA=0,55. 4. példa 60 3.93 g bróm-acetil-7-ACA-t 20 ml metilénkloridban oldunk, 3,45 ml diizopropiletilamin hozzáadása közben. Ehhez egy olyan oldatot adunk, amelyet úgy állítunk elő, hogy 1,22 g 3-merkapto-l,2,4- triazolt 10 ml dimetilformamidban oldunk, és ezt 10 ml metilénkloriddal hígítjuk. 65 10 ml metilénkloriddal utánamossuk. 7 óra múlva az oldószert először vízsugárszivatty us vákuumban, majd kb. 0,2 Hgmm-en (30-40*-os vízfürdőn) ledesztilláljuk, és így 10,5 g barnás olaj marad vissza. Ezt a nyersterméket 20 ml 10%-os kálium hidrogénfoszfát oldatban 70 felvesszük. 0,9 ml 2-N szódaoldat hozzáadásával a pH-értékef 5-re állítjuk be. Ezután az oldatot választótölcsérben egymás után 80 ml metilénkloriddal és 30 ml etilacetáttal extraháljuk. A szerves fázisokat kétszer 20-20 ml 5 pH^u foszfatpufferrel mossuk. Az egyesített vizes fázisokat ezután 76 300 ml etilacetáttal kirázzuk, és a pH-t 1,0 ml koncentrált sósav hozzáadásával 2.9-re állítjuk be. így egy színtelen csapadék keletkezik, amely mind a két fázist telíti. A valasztótólcsér egész tartalmát üvegszűró'n leszivatjuk, és a maradékot 100 ml etilacetáttal utánamossuk. Ezt a csapadékot kb. 150 ml tetrahidrofuránnal ismét eldörzsöljük, és így a messzemenően tiszta és kristályosodó 7-(l .2.4-rriazolil-(3)-merkaptoacetilamino) -cefalosporánsav kioldódik. A mindként fázist tartalmazó szűrletet elválasztjuk, és ebből még további nyers kristályos terméket kapunk. Az egyesített nyers kristályos terméket 30 ml tetrahidrofurán-metanol (1:1) elegyben oldjuk, egy spatulahegynyi „Norit"-tal szobahőmérsékleten rövid ideig rázatjuk, „Hyflo Supercel" szűrőrétegen szűrjük, és a szűrőt a fenti elegy 3 ml-ével és 5 ml metanollal tiióssuk. Ezután a szűrletet vákuumban kb. 5 ml-re pároljuk be, majd beoltás után az anyag gyorsan kikristályosodik. O.p.: 149-151* (bomlás ko/hril I A sav 1,55 g-ját 50 ml metanolban oldjuk, és 1,85 ml 3-M metanolos nátriumetilhexanoátot adunk hozzá. A tiszta oldatot vákuumban kb. 10-12 ml-re bepároljuk, amikoris az' lassan kristályokat képez. További 2 ml tetrahidrofuránt adunk hozzá és 2 órán át -20"-on állni hagyjuk. Ezután leszivatjuk és a maradékot egymás után metanol-tetrahidrofurán (1:1) eleggyel, tetrahidrofuránnal, etilacetáttal és hexánnal mossuk. A tiszta nátriumsó optikai forgatóképessége: lalr? = 113* • 1*; O.p.: 220-230* Mbomlás közben). Rf, ,=0,21; Rf, „, / = 0,5 5. példa 393 mg (1,0 mmól) brómacetil-7-ACA-t 258 mg N,N-dii/opropil-etilamin hozzáadása közban 2,0 ml metilénkloridban oldunk. Ezután 180 mg 2,5-dimerkapto-l,3,4-tiadiazolt 0,5 ml dimetilformamidban oldva, majd ezt 2,2 ml metilénkloriddal higítva készített oldatot adunk hozzá. 1 ml metilénkloriddal utánamossuk 6 óra múlva az oldószert először vízsugárszivattyús vákuumban, majd kb. 0,2 Hgmm-en (30*-os vízfürdőn) ledesztilláljuk, és kb. 1,1 g sárgás olaj marad vissza. Ezt a nyersterméket 10 ml lO^os káliumdihidrogénfoszfát oldatban felvesszük és 0,3 ml 2-N szódaoldatot hozzáadva, a pH-értéket 5-re állítjuk be. Ezután választótölcsérben egymás után 20 ml metilénkloriddal és 30 ml etilacetáttal extraháljuk. A szerves fázisokat egymás után kétszer 10-10 ml pH = 5 foszfatpufferrel mossuk. Ezután a vizes fázisokat egyesítjük, és 40 ml etilacetáttal kirázzuk. 2,7 ml I-N sósavat hozzáadva, a pH-t 2,9-re állítjuk be és a vizes fázist konyhasóval telítjük. Erős rázás után a fázisokat elválasztjuk és a vizes oldatot még kétszer 20-20 ml etilacetáttal utánaextraháljuk. A 3 szerves fázist egymás után 8 ml telített konyhasóoldattal mossuk. Ezután nátriumszulfáttal szárítjuk, szűrjük és vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot etilacetát-tetrahidrofurán (9:1) elegyből kikristályosítjuk. A 7- (5-merkapto-l,3,4-tiadiazolil-(2)-merkapto-acetilaminö)-cefalosporánsav 130-142*-on olvad, bomlás közben (evakuált kapillárisban). RÍ52 = 0,36;Rfioi.A = 0,6. 6. példa 11,75 g 3-(dezacetoximetil)-3-benzoiltiometil-7-brómacetilamino-cefalosporánsavat 8,75 ml N-etil- diizopropilamin hozzáadása közben 75 ml dimetilformamidban oldunk. Ehhez 3,58 g 2-merkapto-tiazolin 25 ml dimetilformamidos oldatát adjuk és fény kizárásával szobahőmérsékleten állni hagyjuk. 20 óra múlva az oldószert vákuumban (0,5 - 1 Hgmm) nagyrészt eltávolítjuk és a keletkezett olajos maradékot 250 ml pH = 6-os foszfatpufferrel és 250 ml ecetészterrel felvesszük. Ezután a vizes fázis pH-ját 6-ra állítjuk be és elválasztjuk a fázisokat. A szerves fázist eldobjuk. A vizes fázis pH-ját sósavval 2,3-ra állítjuk be és konyhasóval telítjük. Egymás után 1000, 250 és 250 ml ecetészterrel extraháljuk. Az ecetészteres extraktumot telített 3
