161479. lajstromszámú szabadalom • Eljárás glutaminsav és/vagy aszparaginsav- komponenseket tartalmazó polipeptidek szintézisére
161479 17 18 Számított: C: 58,69%, H: 7,70%, O: . 20,77%, N: 12,84%. Talált: C: 58,33%, ,-H: 7,70%, O: 20,72%, N: 12,84%. 3. példa: H-Tyr-Ile-Pro-Lys(BOC)-Glu(OtBu)-Gln-Lys(BOC)-NH2 előállítása 1. lépés: Z-Tyr-Ile-Pro-Lys(BOC)-Glu(OtBu)-Gln-Lys-(BOC)-NH2 előállítása Feloldunk 1,0 g védett heptapeptid-metilésztert (2. példa, 9. lépés) 10 ml metanolban 0°-on ammóniával telítjük és lezárva szobahőmérsékleten állni hagyjuk 3 napig. Az oldószert csökkentett nyomáson elpárologtatjuk, a párlási maradékot N citromsav oldattal eldörzsöljük, szűrjük, vízzel, etilacetáttal és éterrel mossuk, szárítjuk. 0,75 g (75%) anyagot kapunk. Op.: 189— 192 nolban). Ry 4 0,21—0,32. [a]f —44,56° c = 1, meta-10 Analízisa: C^HggO^N^ (M: 1294,52) képlet alapján: Számított: C: 59,38%, H: 7,71%, O: 21,01%, N: 11,90%. Talált: C: 59,32%, H: 7,77%, O: 21,07%, N: 11,89%. 2. lépés: H-Tyr-Ile-Pro-Lys(BOC)-Glu(OtBu)-Gln-Lys(BOC)-NH2 előállítása 50 ml metanolban a szokásos módon hidrogenolizálunk 2,6 g (2 mmól) védett heptapeptidamidot (1. lépés). A reakció befejeztével a katalizátort szűrjük, a szűrletet csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A párlási maradékot éterrel eldörzsöljük, szűrjük és szárítjuk. 2,25 g (96%) anyagot kapunk. Op.: 175—179° R2 . 0,53 —0,65. 4. példa: Z-Glu-Glu-Phe-Glu-Glu-Ala-N2H 3 előállítása 1. lépés: Z-Glu(OtBu)-Ala-OMe előállítása 25 30 40 45 pendáljuk) és mossuk 50—50 ml vízzel, 0,5 N kénsavval, vízzel, 5%-os nátrium-bikarbonátoldattal, vízzel, végül magnézium-szulfáton megszárítjuk és bepároljuk. A párlási maradék kristályos anyag, melyet éterben szuszpendálunk és kiszűrünk, szárítunk. 23,15 g (91%) védett dipeptidésztert kapunk. Op.: 95—98°, By 0,60—0,65. [a] 2£ —10,85° (c = dimetilformamidban). Analízisa: C21 H 30 O 7 N 2 (M: 422,461) képlet alapján: Számított: C 15 O Talált: C O 59,7%, H: 7,15%, N: 6,6 %, 26,5 %. 59,8%, H: 7,20%, N: 6,65%, 26,4%. 2. lépés: H-Glu(OtBu)-Ala-OMe-(COOH)2 elolts állítása 23,2 g (55 mmól) fenti védett dipeptidésztert oldunk 200 ml metanolban, majd 4,95 g (55 mmól) vízmentes oxálsav és kb. 0,5 g csontszenes palládium hozzáadása után hidrogénezzük. A reakció végén a katalizátort kiszűrjük, a metanolos oldatot betöményítjük és a dipeptidészter-oxalátot éterrel kristályosítjuk. 20,0 g (96%) anyagot kapunk. Op.: 127—129°, R4 f 0,18—0,28, Analízisa: Cí5 H. 2(i O d 'N 2 (M: 378,092) képlet alapján: Számított: C 35 O Talált: C O 47,6%, H: 6,9%, N: 7,4%, 38,05%. 47,7%, H: 6,9%, N: 7,5%,, 37,95%. 35,5 g (60 mmól) karbobenzoxi-r-terc.-butil-glutaminsav diciklohexilammónium sót szuszpendálunk 200 ml éterben, majd a szuszpenziót 130 ml 0,5 N kénsavval összerázzuk. A vizes fá- 50 zis elválasztása után az éteres oldatot előbb 20 ml 0,5 N kénsavval, majd vízzel mossuk semlegesre. Végül megszárítjuk magnézium-szulfáton és bepároljuk. A párlási maradékot feloldjuk 60 ml vízmentes tetrahidrofuránban és 55 előbb 6,66 ml (60 mmól) N-metil-morfolint, majd —15°-ra hűtve 7,92 ml (60 mmól) klórszénsav-izobutilésztert adlunk hozzá keverés közben. A keverést folytatva 10 perc után a kialakult vegyes anhidridhez csurgatjuk 13,9 g 60 (60 mmól) alanin-metilészter-klórhidrát és 8,82 ml (60 mmól) trietilamin 100 ml kloroformos Számított: C szuszpenzióját (csaknem tiszta oldat!). Éjszakai O állás után a reakcióelegyet bepároljuk, a mára- Talált: C dékot 100 ml benzolban feloldjuk (illetve szusz- 65 O 3. lépés: Z-Clu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-OMe előállítása 35,1 g (67,8 mmól) karbobenzoxi-y-terc.-butilglutaminsav diciklohexilammónium sóból az 1. lépésben leírt módon vegyes anhidridet készítünk 7,22 ml (65 mmól) N-metil-morfolin, valamint 8,58 ml (65 mmól) klórszénsav-izobutilészter segítségével. A vegyes anhidrid oldatához 22,0 g (59 mmól) dipeptidészter-oxalát (2. lépés) és 16,0 ml (118 mmól) trietilamin 100 ml tetrahidrofurános oldatát adjuk, majd a reakcióelegyet éjszakán át állni hagyjuk. A reakcióelegy feldolgozása az 1. lépésben leírt módon történik, a benzolos oldat párlási maradékából ciklohexánnal kristályosítjuk a védett tripeptidésztert. 29,5 g (82,4%) anyagot kapunk. Op.: 113—115°. R« 0,42—0,95. [a]2 g —15,1° (c=l, dimetilf ormamidban). Analízisa: C30 H 4g O 10 N3 (M: 607,684) képlet alapján: 59,3%, H: 7,45%, N: 6,9%, 26,3%. 59,2%, H: 7,3%, N: 6,7%, 26,2%. 9
