161415. lajstromszámú szabadalom • Eljárás prosztaglandin-F2 alfa-sav és észterei előállítására
161415 7 8 mértékben a kevésbé kívánt ^-izomert, mint ha a PGE-savat vagy -észtert közvetlenül PGF-savvá vagy -észterré redukálnánk, a korábban ismert módszerekkel. A jelen találmány szerinti új eljárások ezért lényeges haladást jelentenek ezen a szakmai területen. Ha ez kívánatos, a PGFa -sayat vagy a PGF a észtert ismert eljárásokkal elválaszthatjuk a VIII. és XII. általános képletű elegyekben levő PGF^savtól vagy PGF^-észtertől. Az elválasztásra alkalmas eljárások ugyanazok, mint amelyeket a megfelelő PGE-savak vagy -észterek közvetlen karbqnil-redukciója útján kapott, PGFa - és PGFß-savakbol és -észterekből álló, ismert elegyek elválasztására használnak. Lásd például Schneider már idézett közleményét, Bergström és szerzőtársai: Arkiv Kemi. 19, 563 (1963) és Acta Chem. Scand. Iß, 969 (1962), 1,097-533 számú brit szabadalom leírása, Granström és szerzőtársai : J. Bipl. Chem- 240, 457 (1965), valamint Green és szerzőtársai: J. Lipid. Research 5, 117 (1964). A találmányt jobban meg lehet érteni az alábbi példák segítségével: 1. példa. PGF2a -metilészter. 0,50 g PGE2 10 ml diklórmetánnal készült oldatát feleslegben levű éteres diazometán-oldattal keverjük. 25 C°-on történő 10 percnyi reagáltatás után a reakcióelegyet szárazra pároljuk és a maradékot (metilészter) 25 ml vízmentes tetrahidrofuránban oldjuk. Nedvesség kizárásával 5 ml hexametildiszilazánt és 1 ml trimetilklórszilánt adunk hozzá, és a kapott fehér színű zavaros elegyet 16 órán át 25 C°-on tartjuk. Az elegyet ezután 50 C°-on és csökkentett nyomáson bepároljuk és így egy olajos anyag és egy szilárd anyag keverékéből álló elegyet kapunk. Az elegyhez benzolt adunk (25 ml) majd csökkentett nyomáson bepároljuk és ezt megismételjük. A maradékot ezután 135 ml metanolban oldjuk és az oldatot 0 C°-ra hűtjük. Nedvesség kizárásával a hűtést 0 C°-on folytatjuk és 2 perc leforgása alatt hozzáadunk 0,50 g nátriumbórhidridet 25 ml — 5 C° hőmérsékletű metanolban oldva. A kapott elegyet 10 percig 0 C°-on keverjük. Ezután 2 ml acetont adunk hozzá és az elegyet még 10 percig keverjük; majd 0,8 ml ecetsavat adunk hozzá és az elegyet csökkentett nyomáson 10 ml térfogatra bepároljuk. Ezt az elegyet azután 25 ml telített, vizes nátriumklorid-oldattal hígítjuk és a hígított elegyet három ízben etilacetáttal extraháljuk. Az egyesített etilacetátos kivonatokat szárítjuk és bepároljuk. A maradékot 25 ml metanolban oldjuk és az oldatot 10 ml vízzel hígítjuk. Az elegyet 25 C° hőmérsékleten tartjuk 16 órán át, majd a metanol eltávolítása céljából csökkentett nyomáson betöményítjük. A kapott maradékot három alkalommal etilacetáttal extraháljuk. Az egyesített kivonatokat szárítjuk és bepároljuk, majd a maradékot 50 g szilikagélen (Merck, Darmstadt) kromatografáljuk. Az eluálást egymásután 250 ml 50% etilacetátot tartalmazó Skellysolve B-vel (a Skellysolve B hexán izomerek elegye), 250 ml 75% etilacetátot tartalmazó Skellysolve B-yel, 750 ml etilacetáttal és 250 ml 10% metanolt tartalmazó etilaeetáttal végezzük. Az etilacetátos ejuátum bepárlásával 0,375 g PGF2c[ metilésztert kapunk. Az etilacetát-metanol elegygyel kapott eluátumokat bepároljuk és így PGF2a -5 és PGF2j 3-metilészterből álló keveréket kapunk, amely 20% (súlyszázalék) PGF2a -metilésztert tartalmaz. 2. példa. PGF2a -metilészter. 10 16,0 PGE2 150 ml diklórmetánnal készült oldatát dietiléteres diazometán-oldat feleslegével keverjük. 25 C°-on történő 10 percnyi reagáltatás után a sárga színű oldathoz néhány csepp ecetsavat adunk adiazometán feleslegének elbontása céljából. 15 A kapott oldatot csökkentett nyomáson bepároljuk és a maradékot (metilészter) feloldjuk 300 ml vízmentes tetrahidrofuránban. Nedvesség kizárásával 50 ml hexametildiszilazánt és 10 ml trimetilklórszilánt adunk hozzá és a kapott elegyet 20 órán 20 át 25 G° hőmérsékleten lassan keverjük. A zavaros fehér színű elegyet ezután 50 C°-on és csökkentett nyomáson sziruppá pároljuk be. A sziruphoz két alkalommal 200—200 ml vízmentes benzolt adunk, és mindkét esetben csökkentett nyomáson bepá^ 25 roljuk az elegyet. Ezután a maradékot 2500 ml, 5 C°-ra előhűtött metanolban oldjuk. A kapott oldatot 0 C° hőmérsékletre hűtjük. 46 g nátriumbórhidridet feloldunk 2500 ml -10 C°-ra hűtött metanolban és az oldatot keverés közben részle-30 tekben 10 perc leforgása alatt hozzáadjuk az előbbi oldathoz olyan ütemben, hogy a reakcióelegy hőmérséklete 10 C°-ra emelkedjen. Az egész reakcióelegyet ezután még 10 percig 10 C°-on keverjük. Ezt követően 50 ml acetont adunk hozzá, és az 35 elegyet további 10 percig keverjük. Ezután 75 ml ecetsavat adunk hozzá, és az elegyet csökkentett nyomáson és 40— 50 C° hőmérsékleten 1000 ml térfogatra bepároljuk. Az elegyhez ezután 200 ml vizet adunk és 3 órán át 25 C°-on keverjük. Ezt 40 az elegyet csökkentett nyomáson bepároljuk a metanol eltávolítása céljából. A kapott maradékot négy ízben etilacetáttal extraháljuk. Az egyesített kivonatokat telített, vizes nátriumklorid-oldattal mossuk, vízmentes magnéziumszulfáttal szárítjuk 45 és csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot kevés benzolban feloldjuk, és az oldatot 50% etilacetátot tartalmazó Skellysolve B-vel megnedvesítve betöltött 1 kg szilikagélen kromatografáljuk. Eluálásra egymásután a következő oldósze-50 reket használjuk: (A) 5 liter 50% etilacetátot tartalmazó Skellysolve B, (B) 5 liter 75% etilacetátot tartalmazó Skellysolve B, (C) 2 liter etilacetát, (D) 1 liter etilacetát, (E) 1 liter etilacetát, (F) 10 liter etilacetát, (G) 1 liter etilacetát, (H) 1 liter 55 10 % metanolt tartalmazó etilacetát és (I) 4 liter 10% metanolt tartalmazó etilacetát. A megfelelő eluátumokat összegyűjtjük és csökkentett nyomáson valamennyit bepároljuk. Az (F) eluátum maradéka 9,67 g PGF2a-metilészter. Az (E) eluátum 60 maradékát, valamint a (D) és a (G) eluátumok egyesített maradékát ugyanilyen módon különkülön kromatografáljuk, arányosan kisebb mennyiségű szilikagélt és oldószereket használva. így összesen további 1,73 g PGF2ct -metilésztert ka-65 punk. 4
