161267. lajstromszámú szabadalom • Rögzített univerzális kromatográfiás vékonyréteg és eljárás annak előállítására
3 mái cellulózzal hígítva. A vonatkozó szakirodalom szerint (Stahl: „Dünnschichtchromatographie, Springer, Berlin, 1967, pp. 44—49)' az ioncserélő lemezek felbontó- és elválasztóképessége viszonylag csekély. A találmány célja, hogy lehetővé tegye a vékonyrétegben, végbemenő ioncserélő kromatográfiai és összekapcsolja az ioncsere előnyeit a vékonyréteg-kromatográfia előnyeivel. Fenti cél megvalósítása érdekében kísérleteket végeztünk olyan vékonyréteg-kromatográfiás lemez előállítására, amely ioncserélő gyantát tartalmaz, és így sokoldalúan felhasználható vizes oldatokban töltéssel rendelkező vegyületek elválasztására. Ez az igény régóta fennáll, de a gyakorlatban nem tudták kielégíteni, mert a vékonyréteg-készítésben szóbajöhető rögzítőanyagokkal, pl. polivinilalkohollal készített vékonyréteg víz vagy vizes oldat hatására lepereg a szilárd alaplemezről. Kísérleteink során a találmány alapját képező alábbi felismerésekre jutottunk: a) Az ioncserélő műgyantás vékonyréteg-kromatografálás megvalósítható, ha a gyantához adjuvánsként a hagyományos vékonyréteg-kromatográfiában használt szilárd hordozót keverünk. b) Az a) alatti módszer felhasználásával kapott lemez szerves oldószerekben megoszlásos kromatografálásra is felhasználható. c) Az a) alatti módon előállított lemez lehetővé teszi az ioncserélő kromatgráfia nagy felbontóképességének egyesítését a papír- és vékonyréteg-kromatográfia egyszerű detektálási lehetőségével. d) Az a) alatti módon előállított lemez szinergetikus hatást is eredményez, mert a lemez felbontóképessége legalább azonos vagy jobb, mint az azonos ioncserélő gyantát tartalmazó oszlopé, és emellett csökken az elválasztáshoz szükséges idő. Ez a hatás igen meglepő, mert az volt várható, hogy az ioncserélés szempontjából inert adjuváns hozzáadása következtében az ioncserélő hatás romlani fog vagy teljesen meg fog szűnni. A találmány olyan rögzített univerzális vékonyréteg-kromatográfiás lemezre vonatkozik, amelynek sima felületű szilárd, inert alaplemeze, valamint az utóbbira felvitt, szilárd hordozóból és rögzítő anyagból álló kromatográfiás vékonyrétege van. E lemezre a találmány értelmében az jellemző, hogy szilárd hordozója ioncserélő gyanta, valamint a vékonyréteg-kromatográfiában szilárd hordozóként használt adjuváns keverékéből áll. A találmány szerinti vékonyréteg-kromatográfiás lemez szilárd hordozójának ioncserélő gyanta komponenseként bármilyen ióncserélő gyantát felhasználhatunk; e gyanta tehát egyaránt lehet erős kationcserélő vagy anioncserélő, ül, gyenge kationcserélő vagy anioncserélő. A vékonyréteg-kromatográfiában szilárd hordozóként használt adjuváns előnyösen szilikagél, diatomaföld, alumíniumoxid, poliamid, mikrogranuláris cellulóz vagy ezek keveréké lehet. 161267 4 Rögzítőanyagként szobahőmérsékleten vízben és szerves oldószerekben oldhatatlan, de hidrofil inert anyagot, előnyösen polivinilalkoholt, keményítőt vagy agar-agart használhatunk. 5 A találmány továbbá eljárás a fenti rögzített univerzális vékonyréteg-kromatográfiás lemez előállítására. A találmány értelmében úgy járunk el, hogy a rögzítő anyag vizes oldatában diszpergáljuk az ioncserélő gyantát és az adjui0 vánst, majd az így kapott masszát egyenletes vastagságú rétegben alaplemezre visszük fel-A találmány szerinti vékonyréteg-kromatográfiás lemez felhasználható két-dimenziós kromatografálásra is,'; ahol az egyik dimenzióban ion-15 cserélő, a másik dimenzióban pedig megoszlási kromatográfia megy végbe. Ha a megoszlási kromatográfiához használt szerves oldószer nem tartalmaz savas vagy lúgos komponenst, például ecetsavat, hangyasavat, ammóniát vagy piridint, 20 ^§y a sorren d a kétféle kromatografálás között tetszés szerinti, minthogy a neutrális szerves közeg nem befolyásolja a gyanta tényleges ciklusát. Ha azonban a szerves oldószer tartalmaz savat vagy bázist, úgy az ioncserének meg kell előznie a megoszlási kromatográfiai, a gyanta belső ion-miliőjének megfelelő állapotban tartása céljából. Minthogy a szerves oldószer rendszerint tartalmaz savat vagy bázist, az első dimenzióban ioncserélő, a második dimenzióban pedig megoszlási kromatografálást célszerű végezm. A találmány szerinti vékonyréteg-kromatográfiás lemez főbb előnyei a következők: a) A vékonyréteg ugyanúgy szeparál, mint a 35 ha§pnló gyantát tartalmazó oszlop, de ugyanakkor a detektálásnál maradéktalanul érvényesülnek a papír- vagy vékonyréteg-kromatografálás előnyei. b) Az ioncserélő kromatográfia az első futta-40 tásra merőleges irányban kombinálható ugyanazon lemezen megoszlási kromatográfiával vagy vékonyréteg-elektroforézíssel. c) Sorozat-vizsgálatok egyidejű lefolytatására is alkalmas, 'ami oszlopkromatográfia esetén 45 csak nagyon drága és csupán egymást követő elemzéseket lehetővé tevő automatikus berendezés segítségével valósítható meg. d) Felhasználható az ioncserélő és a megoszlási kromatográfiával frakcionálható bármilyen 50 vegyület elválasztására, így elsősorban aminosavak, peptidek, aminocukrok nukleinsav-származékok és hormonok elemzésére. e) A könnyű detektálás és egyidejűleg nagyszámú vizsgálati anyag elemzésének lehetősége 55 kórházakban, klinikákon és mezőgazdasági laboratóriumokban is módot ad olyan vizsgálatok elvégzésére, amelyeket mostanáig csak bonyolult berendezésekkel, pl. aminosav-analizátorokkal tudtak lefolytatni. 60 A találmány szerinti eljárás foganatosítására az alábbi kiviteli példákat adjuk meg: 1. példa 110 ml 2%-os polivinilalkohol-oldathoz, amely 65 0,1 ml n-oktilalkoholt tartalmaz, 20 g 3,0—6,0
