161218. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 67-694 antibiotikum és gyógyászati célra alkalmas funkciós származékai előállítására
161218 23 egyesítjük, és vákuumban szárazra bepároljuk. A maradékot acetonban oldjuk, dietilétert adunk hozzá, a keletkező csapadékot szűréssel vagy centrifugálással elválasztjuk és eldobjuk. A szüredéket, illetve a centrifugából kilépő folyadékot vákuumban szárazra bepároljuk. Az így kapott antibiotikusan aktív anyag a 67—694 antibiotikum 1000 jug/mg aktivitással és a következő jellemzőkkel: 24 Olvadáspont [a] E 2" D 70/8 1 cm 110—114 °C —33,4° (0,3% etanolban) 238 (240 mu-on) Az infravörös és mágneses magrezonancia spektrumok az 1. és 2. ábrán láthatók. A többi kémiai és fizikai sajátságok azonosak a már megadottakkal. 5. példa Alternatív elkülönítési-tisztítási eljárás A 2. példa szerint kapott fermentlé pH-értékét n nátriumhidroxid-oldattal kb. 9,5-re állítjuk be, majd 20 literes etilacetát adagokkal ismételten extraháljuk. Az egyesített kivonatokat vákuumban bepároljuk, a maradékot kloroform-metanol elegyben (9:1 térfogatarány) oldjuk, és az oldatot kovasavat tartalmazó oszlopra viszszük fel. A kloroform-etanol eleggyel (8:2 tér fogatarány) végzett eluálás folyamán 5—5 ml-es frakciókat gyűjtünk. Az egyes frakciókból vett minták egy részét Staphylococcus aureus-os, másik részét vékonyréteg-kromatográfiai meghatározásokra használjuk fel. A hasonló Rf értékű frakciók egyesítése után — a 67—694 antibiotikumot tartalmazóké 0,4—0,5 — az oldószert vákuumban elpárologtatjuk. A maradékot acetonban oldjuk, és dietilétert adunk hozzá. Csapadék képződik, azt szűréssel vagy centrifugálással elválasztjuk és eldobjuk. A szüredéket, ill. a centrifugálásból visszamaradó folyadékot vákuumban szárazra bepároljuk. Az ilyen módon kapott termék a 67—694 antibiotikum, aktivitása kb. 1000 jug/mg, és fizikai jellemzői azonosak a 4. példában megadottakkal. 6. példa A 67—694 je iű antibiotikum káliumdihidrqgénfoszfát sója 500 mg 67—694 antibiotikumhoz 13 ml vízben 130 g káliumdihidrogénfoszfátot adunk, és a keveréket két órán át szobahőmérsékleten keverjük. 50 mg aktív szén hozzáadása után még 15 percig keverjük, az oldatot leszűrjük és liofilezzük. A kívánt terméket kapjuk. Olvadáspontja 118—121 °C; [Ű]D = 21,2° (0,3% vízben). Az ismertetett módszer alkalmazásával és egyenértékű mennyiségű, vízben hasonló oldhatósági! savak, pl. sósav, kénsav, foszforsav, tejsav, monohidroxiborostyánkősav, ecetsav, borostyánkősav, citromsav, maionsav vagy maleinsav felhasználásával a megfelelő, gyógyászati célokra alkalmas savaddíciós sókhoz jutunk. Ezek a sók általában in vitro és in vivo hasonló, gyak-5 ran teljesen azonos antibakteriális spektrumot adnak, mint a szabad bázis. Az esetleg mutatkozó különbségek az eltérő oldhatóságoknak tulajdoníthatók. Vizes közegekben való oldhatósági viszonyaik miatt ezek a sók különösen alkal-10 masak orális és parenterális beadásra szolgáló vizes készítményekben és oldatokban való alkalmazásra. 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 7. példa A 67—694 jelű antibiotikum tartarátsója 1 g 67—694 antibiotikumot 60 ml dietiléterben oldunk, és hozzáadjuk 250 mg dihidroxiborostyánkősav 1,5 ml etanolos oldatát. A keveréket 15 percig keverjük, majd a kivált sót szűréssel elválasztjuk. Mosás után megszárítva a kívánt terméket kapjuk. Olvadáspontja 129—134, °C; [O]D = 12° (0.3% vízben). Az ismertetett módszer alkalmazásával és egyenértékű mennyiségű, éter-alkohol elegyben hasonló oldhatóságú savak, pl. glutársav, laurinsav, adamantánsav, fahéjsav, kámforsav, palmitinsav, sztearinsav vagy undecilénsav felhasználásával a megfelelő, gyógyászati célokra alkalmas savaddíciós sókhoz jutunk. Ezek molekulasúlyuk és jó oldhatósági viszonyaik miatt különösen alkalmasak helyi készítményekben, pl. krémekben és kenőcsökben való alkalmazásra. 8. példa A 67—694 antibiotikum monoacetátja 1,0 g 67—694 antibiotikumot feloldunk 10 ml vízmentes acetonban, és 0,17 ml ecetsavanhidridet adunk hozzá. Miután a keveréket szobahőmérsékleten 4 órán át kevertük, lassan és további keverés közben 1,2% ammóniumhidroxid-oldatot adunk hozzá a termék leválasztására. Szűréssel való elválasztás, vizes acetonos és vizes mosás és szárítás után a terméket vizes acetonból átkristályosítjuk. Olvadáspontja 122— —116 °C; [O]D = —25° (0,3% etanolban). 9. példa A 67—694 antibiotikum monoizoválerianátja 2,0 g 67—694 antibiotikumot feloldunk 10,0 ml vízmentes acetonban, és 0,65 ml izovaleriánsavanhidridet adunk hozzá. A keveréket szobahőmérsékleten 16 órán át keverjük, majd lassan és további keverés közben 1,2%-os ammóniumhidroxid-oldatot adunk hozzá a termék leválasztására. A csapadékot szűrőre visszük, vizes acetonnal és vízzel mossuk és megszárítjuk. Vizes acetonból átkristályosítva a címben megnevezett vegyületet kapjuk. 12
