161218. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 67-694 antibiotikum és gyógyászati célra alkalmas funkciós származékai előállítására

161218 17 C) Infravörös abszorpciós spektrum A 67—694 antibiotikum infravörös abszorpciós spektruma ásványolajban az 1. ábrán látható. X a hullámhosszt jelenti fx-han, v a frekvenciát cm_1-ben és T a százalékos áteresztőképességet. A legnagyobb csúcsokat és sávokat az 5. táblázatban foglaltuk össze. A következő rövidítéseket alkalmaztuk. e — erős, k —közepes, gy — gyenge és sz — széles. Az adatokat /«-ban adjuk meg. Az ásványolajnak tulajdonítható csúcsokat elhagytuk. 5. táblázat 2,87 3,70 5,80 5,92 6,17 7,11 7,60 7,82 7,98 8,44 8,57 9,00 k gy e k—e k—e gy k k gy e e e 9,32 9,55 9,73 10,17 10,37 11,15 11,48 11,87 11,95 12,62 13,95 e e k k—e k gy—k gy gy—k gy gy gy, sz D) Mágneses magrezonancia spektrum A 67—694 antibiotikum infravörös abszorpciós nancia spektrumát a 2. ábra mutatja be. A spektrumot Varian A—60—A spektrométerrel (Varian Associates, Kalifornia) vettük fel, a felvételhez 40 mg 67—694 antibiotikum 0,4 ml deutero-kloroformos oldatát használtuk fel, amely kevés deutériumoxidot is tartalmazott A ö és T értékeket ppm-ben adjuk meg, etalonként tetrametilszilánt használtunk. A 2. ábrán a teljes spektrum felett a spektrum egy részlete látható, amely a teljes spektrumban 9,8 ppm-nél jelenne meg, és így kívül esne a spektrum bemutatott részén. Ennek a csúcsnak az intenzitása arra enged következtetni, hogy e csúcsnak a spektrum értelmezése szempontjából jelentősége van. Ej Oldhatóság Oldószer víz metanol aceton kloroform benzol dietiléter Oldhatóság nagyon rossz jó jó jó jó rossz F) pH-stabilitás A 2—10 közötti pH-tartományban aktivitásváltozást nem észleltünk, amikor a 67—694 antibiotikumot alkalmas pufferral hígított etanol-18 ban feloldottuk, és 100 °C-os hőmérsékleten 30 percig melegítettük. 5 G) Stabilitás enzimekkel szemben A 67—694 antibiotikum stabiütását tripszinnel, kimotripszinnel, pepszinnel és a-amilázzal szemben vizsgáltuk. E célra 1 mg/ml-es enzimoldatokat készítettünk Mcllvaine-féle pufferrel az enzimekre nézve maximális pH-értékekkel. A maximális pH-értékek a tripszinre és kromotripszinre 8, a pepszinre 2,2 és az a-amilázra 4. 200 jug antibiotikumot oldottunk fel 0,5 ml vízben, majd 0,5 ml enzimoldattal elegyítettük, és 37 °C-on 24 órán át melegítettük. Az oldatot 0,1, 2,5 és 24 óra múlva Escherichia coli-val és Staphylococcus aureus-szal vizsgáltuk. Az enzimeknek ebben az időszakban nem volt lényeges aktivitáscsökkentő hatásuk az antibiotikusan aktív anyagokra. 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 H) Színpróba A 67—694 antibiotikum pozitív eredményt ad a „Molisch-keményítő-KI" és „Elsőn Morgan" próbákban és negatív reakciót biurettel, ninhidrinnel és a Sakaguchi-próbában. Az infravörös abszorpciós spektrum, a mágneses magrezonancia spektrum és a kémiai és fizikai sajátságok arra utalnak, hogy a 67—694 antibiotikum egy makromolekula tercier aminocsoporttal. Ezenkívül legalább két észterezhető hidroxilcsoportja van, amelyek közül az egyik szelektív módon észterezhető. A mágneses magrezonancia spektrumból ezenfelül még aldehidcsoportra is lehet következtetni. A találmány felöleli még a 67—694 antibiotikum gyógyászati célokra felhasználható (nem toxikus) származékait is, mint például a gyógyászati célokra felhasználható sókat és észtereket. Tipikus ilyen sók a savaddíciós sók; ezek szervetlen savakkal, pl. sósavval, kénsavval vagy foszforsavakkal vagy azok reakcióképes származékaival, pl. e savak sóival, vagy szerves savakkal, pl. ecetsavval, borostyánkősavval, citromsavval, tejsavval, monohidroxiborostyánkősawal, malonsavval, maieinsawal, dihidroxiborostyánkősavval, glutársavval, laurinsavval, adamantánsavval, f ahéjsawal, kámforsawal, palmitinsavval, sztearinsawal és undecilénsawal állíthatók elő. A sók előállítására a 67—694 antibiotikumot vagy olyan antibiotikusan aktív anyagot, amely ezt az antibiotikumot tartalmazza, vagy amelyet a 67—694 antibiotikum tartalmaz, vagy ezek reakcióképes származékait, savakkal vagy ezek reakcióképes származékaival reagáltatunk, és a keletkező sókat elkülönítjük. Tipikus gyógyászati célokra alkalmas észterek a karbonsavakkal, pl, ecetsavval, propionsavval, vajsavval, valeriánsavval, kapronsavval, oktánsavval, sztearinsawal, borostyánkősavval, benzoesavval, ftálsavval, fenilecetsavval, fenoxiecetsavval vagy adamantánsavval alkotott észterek. A felsorolt 9