161093. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gentamicin C komplex és paromomicin előállítására

3 161093 4 családba tartozik és egyik törzs esetében sem írták le gentamicin vagy gentamicinhez hasonló antibiotikum egyidejű termelését. A paromomicint termelő törzsek általában a csupán egyetlen szénatom térállásában külön- 5 böző paromimicin I és paromimicin II jelzésű; vegyületek elegyeit termelik. Az I jelzésű komponens mennyisége általában legalább 80—90%. A továbbiakban a paromomicin megnevezés alatt a szakirodalomhoz hasonlóan, a fenti össze- 10 tételű elegyeket értjük. Kutatásaink során találtunk egy olyan Streptomyces törzset (jelzés S—244), amely egyidejűleg gentamicin és paromomicin termelésére képes. A termelt gentamicin a gentamicin C komp- 15 lexszel azonos összetételű. A termelt paromomicin mindenben, tehát I és II jelzésű komponens jelenlétében, illetve arányában is megegyezik a forgalomban levő paromomicinekkel. A termelési körülményektől függően a törzs egyes ese- 20 tekben csekély mennyiségű neomicint is termel. A törzs gentamicin termelő képességét oly mértékben tudtuk fokozni, hogy lehetőség nyílt a paromomicin mellett a gentamicin gazdaságos ipari előállítására is. 25 A találmány szerinti eljárásban felhasznált Streptomyces törzset talajmintából izoláltuk. Leírása a Schierling, B. E. D. Gottlieb: „Methods Manual. International Cooperative Project for 30 Description and Deposition if Type Cultures of Streptomycetes" (Delaware, Ohio, 1964) követelményeinek megfelelően a következő: Légmicélium színcsoport: (Ettlinger et al. tip.) „griseus". 35 A légmicélium színe fehér, fehéressárga, fehéresszürke vagy sárga. Szubsztrátmicélium színe: sárgásbarna. Spóratartók típusa: kevésbé szabályos, sokkanyarulatú spirálisok (a kanyarulatok száma 40 • meghaladja a hatot): Spórafelület: (elektr. optika) sima. 1. Keményítő-agar: A légmicélium gyengén fejlett, lisztes bevonat, fehéresszürke. A szubsztrátmicélium kissé ráncos, apró pontszerű tele- 45 pékből összenőtt lepel Co5b okkersárga színű. Halványsárga oldódó pigment. 2. Glicerin-aszparagin-agar: Nem tipizálható, gyengén fejlett, po'rszerű légmicélium. A szubsztrátmicélium közepesen fejlett, apró pont- 50 szerű telepekben Co6a világos okkersárga színű. Oldódó pigment nincs, 3. Burgonya-agar: A levegőmicélium jól fejlett „griseus" karakterű, „yellow" series 2 ba (pale yellow). A szubsztrátmicélium Coo3a ok- 55 kersárga színű, erősen gyűrődött, igen fejlett, Világossárga oldódó pigment diffundál a tápközegbe. 4. Zabpehely-agar: Légmicélium gyéren fejlődött, nem jellemezhető. A szubsztrátmicélium g0 összefüggő, gyengén fejlett, vékony lepel, színe C.o6a világos okkersárga. A táptalajba pigment riém diffundál. 5. Élesztőkivonat-malátakiyonat-agar: Levegőmicélium gyengén fejlett, lisztszerű, fehéres- 65 szürke. Szubsztrátmicélium enyhén gyűrt, kissé kidomborodó Coo3a okkersárga színű. Oldódó pigment nincs. 6. Pepton-élesztőkivonat-vas-agar: A légmi* micélium nagyon gyér, nem karakterizálható. A szubsztrátmicélium Coo4s világosbarna színű, erősen gyűrődött, kidomborodó. Sem melanoid, sem egyéb pigment nem észlelhető a tápmédíumban. 7. Tirozin-agar: Lisztszerű, gyengén fejlett, fehéres, nem jellemezhető légmicélium. A szubsztrátmicélium kissé ráncos, közepesen fejlett, Coo4s világosbarna színű. Pigment nincs. 8. Glükóz-pepton-agar: A légmicélium fehér, finom, vékony, egységes bevonat. A szubsztrátmicélium erősen gyűrt, feltornyosodó Coo3m sötét okkersárga színű telep. Pigment nem diffundál a tápközegbe. 9. Glicerin-glicin-agar: A légmicélium fehér, közepes fejlettségű, erősen gyűrt, helyenként feldomborodó, Coo3a okkersárga színű. Gyenge halványsárga oldódó pigment termelés. Nitrát redukció: Pozitív. (Nitrátot nitritig redukálja.) Zselatint 4 nap után kezdi folyósítani, 8 nap után teljes folyósítás. Melanin: Negatív. C-f orrás értékesítő spektrum: Pridham— Gottlieb féle szintetikus alap tápközegben (J. Bact. 56, 107 [1948]). L-arabinóz Glicerin Inozit Raffinóz D-mannit D-xilóz Dextróz D-fruktóz D-mannóz Ramnóz Szaharóz Kontroll ± + + + + + + + + + —+ + + + + + + + + + + + ± + + + erős — növekedés és értékesítés + + közepes növekedés és értékesítés + gyenge növekedés és értékesítés + növekedés és értékesítés nyomokban — növekedés és értékesítés nincs. A fenti tulajdonságok alapján az S—44 jelzésű törzs a Hütter-féle rendszerezés szerint (R. Hütter: Systematik der Streptomyceten, Basel, [1967]) a Streptomyces longisporoflavus-szal azonos, és így határozottan megkülönböztethető valamennyi gentamicint és paromomicint termelő törzstől. A Streptomyces longisporoflavus csoportba tartozó törzsek által eddigi ismereteink szerint termelt antibiotikumok (novobiocin = albamicin, aspartocin) mind határozottan megkülönböztethetők mind a gentamicintől, mind a paromomicintől. Mindezek alapján kétségtelen, hogy az S—244 jelzésű törzs az Actinomycetalés rend Streptomycetaceae családjába tartozik. Ez a felismerés • 2