160813. lajstromszámú szabadalom • Eljárás PGA-típusú prosztaglandin-analógok előállítására
160813 47 48 Frakció Oldószer 6. 10 ml Skellysolve B, 40 ml etilacetát 7. 5 ml Skellysolve B, 45 ml etilacetát 5 8. etilacetát 9. etüacetát • 10. etilacetát 11. etilacetát 1 12. 100 ml etilacetát 10 A 6.—12. frakciókat egyesítjük és aeeton-Skellysolve B (hexán izomerek) elegyből kristályosítjuk. A kristályokat szűréssel elkülönítjük, éterrel mossuk és szárítjuk. Így 30 mg kristályos PGEi-et kapunk, melynek olvadáspontja 115—• 116°, autentikus PGEi-el kapott keverék-olvadáspontja pedig 114—114,5°. Optikai förgatóképességi diszperziós görbéje az autentikus PGEt optikai forgatóképességi diszperziós görbéjével azonos: C. A d,l—PGEi-metilészter észteráz-hidrolízise: Cladosporium resinae acilázt tartalmazó szupernatáns folyadákból 12 ml-t — melyet kb. három hétig fagyasztva tároltunk -r és 129 mg d,l-PGEi-metilésztert elegyítünk, és kb. 20 órán keresztül szobahőmérsékleten nitrogén alatt rázatjuk. Az elegyet ezután 100 ml acetonnal hígítjuk, szűrjük és a szűrletet csökkentett nyomáson bepároljuk. Az így kapott maradék d,l-PGEi-et tartalmaz. A maradékot Silic AR CC—4-en (Mallinokrodt) kromatografáljuk. Az oszlopot Skellysolve B-etilacetát és etilacetát-metanol eleggyel eluáljuk az alábbiak szerint : Frakció Oldószer 50 ml Skellysolve) B 45 ml Skellysolve B + 5 ml etilacetát 1. 40 ml Skellysolve B+10 ml etüacetát 35 ml Skellysolve B+15 ml etilacetát 30 ml Skellysolve B+20 ml etilacetát 2. 25 ml Skellysolve B + 25 ml etilacetát 3. 20 ml Skellysolve B+30 ml etilacetát 4. 15 ml Skellysolve B+35 ml etilacetát 5. 15 ml Skellysolve B+35 ml etilacetát 6. 10 ml Skellysolve B+40 ml etilacetát 7. 10 ml Skellysolve B+40 ml etilacetát 8. 5 ml Skellysolve B+45 ml etilacetát 9. 5 ml Skellysolve B+45 ml etilacetát 10. 50 ml etilacetát 11. 50 ml etilacetát 12. 50 ml etüacetát +1% metanol 13. 50 ml etilacetát +1% metanol 14. 50 ml etilacetát +2% metanol 15. 50 ml etüacetát +2% metanol 16. 100 ml etüacetát +3% metanol 17. 100 ml etilacetát +4% metanol 15 A frakciókat bepároljuk és vékonyréteg^kromatográfiával analizáljuk. A 7.-9. frakció d,l-PGEi-metilésztert (összesen 66 mg), a 10. és 11. 25 30 35 40 45 50 55 60 65 frakció d,l-PGEi és d,l-PGEi-metilészter elegyet (összesen 20 mg) és a 12.—16. frakció d,l-PGEt et (összesen 33 mg) tartalmaz. 21. példa d,l-8-izo~PGEi-metilészter az endo sorozatból. 47 mg 6-endo-(l'2'-diíüdroxiheptil)-2^-(6"-kar^ bometoxihexil)-bici'klo[3.1.0]hexan-3-on 2 ml száraz piridinnel készült oldatát jégfürdőben hűtv.? nitrogén alatt keverjük, majd az elegyhez U,.'i ml metánszulf onilkloridot adunk, és az cuegyet az olvadó jégfürdőben 2 V2 órán át tovább keverjük. Ezután az elegyet friss jégfürdővel újra lehűtjük, 10 ml hideg vízzel hígítjuk és 10 percig keverjük. Ezt követően jeget tartalmazó választótölcsérbe öntjük és három ízben, 25—25 ml-es részletekben, hideg etilaoetáttal extraháljuk. Az etilacetátos kivonatokat egyesítjük, 15 ml hideg vízzel, 15 ml hideg 10%-os kénsavval, 15 ml hideg vizes 10%-os nátriumkarbonát-oldattal és kétszer 15—15 ml hideg vízzel mossuk, majd nátriumszulfát felett szárítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk. Így a 6-endo-(r,2'-dihidroxiheptil)-2/9-(6"-karbometoxihexil)-biciklo [3.1.0] hexán-3-on biszmezilátját tartalmazó maradékot kapunk. Ezt a maradékot feloldjuk 2 ml acetonban és 1 ml vízben, majd szobahőmérsékleten mintegy 18 óra hosszat áüni hagyjuk, ezután az elegyet csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékhoz 10 ml vizet adunk és az elegyet három ízben, 20—20 ml-es részletékben, etilacetáttal extraháljuk. Az etilacetátos kivonatokat egyesítjük és 10 ml telített vizes nátriumhidrogénkarbonát-oldattal mossiík, majd nátriumszulfát felett szárítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk. A kapott maradók vékony-réteg-kromatográfiás analízis szerint (szilikagél-lemezen, előhívás etilacetáttal) d,l-8-izo-PGEi-metilészter. (Kitermelés 8 mg, Rf = 0,40) 22. példa PGEi és 15-epI-PGEi az endo-sorozatból 0,115 g 6-endo-(l',2, -dihidroxiheptil)-2 ;M -(6"-karbcwnetoxihexil)-biciklo [3.1.0] -hexan-3-on 4 ml száraz piridinnel készült oldatát jégfürdőben lehűtjük és nitrogén alatt keverjük, miközben 0,6 ml metánszulfonilkloridot adunk hozzá. A keverést folytatjuk és hagyjuk, hogy a jégfürdő mintegy 2 V2 óra alatt elolvadjon. A reakcióelegyet ezután egy friss jégfürdővel lehűtjük és 10 ml jég-víz keverékkel hígítjuk, majd további 10 percig keverjük. Ezt követően az elegyet zúzott jeget tartalmazó választótölcsérbe öntjük és három ízben, alkalmanként 25 ml-es részletekben, hideg etilacetáttal extraháljuk. A hideg etilacetátos kivonatokat egyesítjük és hideg vízzel, hideg 10%-os kénsavval, hideg vizes nátriumkarbonát-oldattal, és végül hideg vízzel mossuk, majd nátriumszulfát és káliumkarbonát felett szárítjuk és csökkentett nyomáson 40° alatti hő-24
