160678. lajstromszámú szabadalom • Eljárás A16884 jelzésű antibiotikum előállítására

160678 15 öntünk, és az agárról óvatosan lekaparva a spórákat és sejteket, vizes spóraszuszpenziót készítünk. A keletkezett szuszpenzió 1 ml-ével oltunk be 100 ml térfogatú vegetatív táptalajt, amelynek összetétele a következő: glükóz szójaliszt kukoricalekvár kalciumkarbonát nátriumklorid ionmentesített víz 15,00 g 15,00 g 5,00 g 2,00 g 5,00 g 1 liter A vegetatív táptalaj pH-ját nátriumhidroxidot hozzáadva pH 6,7 értékre állítjuk. A vegetatív táptalajt 36 órán át 30 °C-on rázatjuk, reciprok rázógépen, 5,1 cm lökettel, 108/perc fordulattal. Az így keletkezett inokulumot használjuk fel az A16884 antobiotikum továbbiakban leírt előállítására. A következő összetételű termelő táptalajt készítjük: 15 20 16 zabliszt glicerin csapvíz 5 4. példa: 20,00 g 10,00 g 1 liter A16884 antibiotikumot állítunk elő az 1. példában leírt módszerrel, azzal a különbséggel, hogy a következő összetételű termelő talajt 10 használjuk: gyapotmagliszt glicerin glükóz csapvíz 20,00 g 10,00 g 5,00 g 1 liter 5. példa: A16884 antibiotikumot állítunk elő az 1. példában leírt módszerrel, azzal a különbséggel, hogy a következő összetételű termelő táptalajt használjuk: szójaliszt 15,00 g kazein 1,00 g nátriumnitrát 3,00 g glükózszirup (50% glükóz) 20,00 g csapvíz 1 liter 100—100 ml termelő táptalajt osztunk szét 500 ml-es Erlenmeyer lombikba, és ezeket 120 cC-on 30 percig sterilizáljuk. Lehűtés után mindegyik lombikot 5% vegetativ inokulummal inokuláljuk. A lombikokat 72 órán át 30 °C-on rázatjuk 250/perc fordulatú rotációs rázógépen. A fermentáció ideje alatt a táptalajt 0,4 tf/tf/ /perc mértékben steril levegővel levegőztetjük. Az izolálást a 8. példában leírt módszerrel végezzük. „Distiller's solubles" (Nadrisol 5,00 g szójaliszt (Nutrisoy 200D) 5,00 g mogyoróliszt 5,00 g blackstrap melasz 5,00 g zabliszt 5,00 g glicerin 10,00 g csapvíz 1 liter és rotációs rázógép helyett 180/perc löketű rázógépet használunk. 3. példa: A16884 antibiotikumot állítunk elő az 1. példában leírt módszerrel, termelő táptalajként a következő összetételű levet használva: 25 30 35 40 2. példa: A16884 antibiotikumot termelünk az 1. példában leírt módszerrel, de termelő táptalajként a következő összetételt használjuk: 50 55 60 65 glükóz 20,00 g oldható keményítő 10,00 g pepton (Wilson's 159) 30,00 g kazeinhidrolizátum („N-Z Amine Type A", Sheffield Chemical Co.) 4,00 g magnéziumszulfát heptahidrát 5,00 g nátriumkarbonát 2,00 g csapvíz 1 L100 ml 6. példa: Másik spórás Streptomyces lipmanii NRRL 3584 tenyészetet készítünk, az organizmust agar csövön növesztve. Az agarcső összetétele a következő: dextrin gyapotmagliszt élesztőextraktum Meer agar ionmentesített víz 10,00 g 10,00 g 1,00 g 25,00 g 1000 ml A táptalaj pH-ját nátriumhidroxid hozzáadásával pH 7,0-re állítjuk be. Az agarcsövet Streptomyces lipmanii NRRL 3584 spórákkal oltjuk be, és 7 napon át 30 °C-on inkubáljuk. Az agarlemezre 2 ml steril marhahússzérumot öntünk, és a spórákat lekaparva spóraszuszpenziót állítunk elő. Steril liofilizálócsőbe 0,1 ml keletkezett szérumos spóraszuszpenziót mérünk, és ezt gömbbé liofilizáljuk. Az így keletkezett liofilizált gömböket használjuk a következő összetételű vegetatív táptalaj inokulumaként: glükóz dextrin Bacto-tripton. élesztőextraktum 5,00 g 10,00 g 5,00 g 5,00 g 8