160606. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 8-izo- prosztaglandin-F1-analógok előállítására
45 Frakciók Eluált Oldószer anyag súlya mgnban 17. 18. 19. 20. 21. 22. 5% metanol—95% etilacetát 5% metanol—95% etilacetát 5% metanol—95% etilacetát 5% metanol—95% etilacetát 5% metanol—95%: etilaoetát 5% metanol—95% etilacetát 12 7 4 2 1 0 A 15., 18., 19. és 20. frakciót egyesítjük és a fenti módon ismét kromatograf áljuk. Az első és a második kiwmaitograf álásból származó megegyező frakciókait egyesítjük és így összesen 61 mg részben kristályos anyagot kapunk (a két tennék közül a poiárosabb), továbbá 13 mg anyagkeveréket, amely vékonyréteg-kromatográfiás analízis szerint főleg a poiárosabb termék, valamint 15 mg kevésbé poláros terméket, ami 8-izo-PGFijS . A poiárosabb frakciót (8--ázo-PGFia ) éter és SkeUy-solve B (hexán-izomerek elegye) oldószerelegyből kristályosítjuk, így 8 mg 8-izo-PGFia -t kapunk viaszszerű kristályok formájában; op. 60—61°. 160606 jük és a maradék bárhiárjd-oldalíot hozzáadjak. A bóarhidrid-oldat hozzáadagolásálhoz klb. 45 perc idő szükséges. A reakcióelegyet ezután szobahőmérsékleten 45 percig, keverjük, és az 5 oldószert csökkentett nyomáson végzett bepárlással eltávolítjuk. A manadékot 500 ml éterben oldjuk és 0°-ra hűtjük jieges-metanolos hűtőfürdővel. Ezután 10—15 perc alatt 150 ml 3 n vizes nátriumhídroxidoldatot adunk hozzá, iűi-10 közben a hőmérsékletet 5° alatt tartjuk, ezt követően 15 perc leforgása alatt 80 ml 30%-os hidrogónperoxidot adagolunk be, mimellett a hőmérsékletet 10° alatt tartjuk. Az elegyet ezután 35 percig szobahőmérsékleten keverjük és 1S a rétegeket elválasztjuk. A vizses fázist kétszer éterrel és háromszor etílacetáttal extraháljuk. A szerves oldatokat egyesítjük és telített vizes nátriuanlklarid-oldattal mossuk, majd magnéziumszulfát felett szárítjuk, szűrjük és esökken-20 tett nyomáson bepároljuk. Így 89 g maradékot kapunk, amely 6-karbetO3á-biciklq[3.1.0]hexán-3~ol és 6-karbetoxi-bicíklo[3.1.0}hexán-2-ol elegyéből áll, és főleg a 3-olt tartalmazza. 25 19. példa: 17. példa: A 6^exo-(cisz-l '-jheptenil)-2a^(6''-teiiibometoxihexil)-ibiciklo[3.1.0]hexán-3-onnak és 2>/J-izomer jenek izomerizálása 1,2 g 6-exo-(cisz-r-'heptenil)-2a-(6"-fcarbometoxihexü)«biciklo;[3.1.0]hexám-3~ont feloldunk 100 ml száraz dimetoxietánban. 400 mg kálium-terc.-Jbuitoxidot adunk hozzá, és az elegyet 25°on nitrogén alatt tartjuk egy óra hosszat. Ezután a káhum-terc.butoxidot semlegesítésére elegendő mennyiségű 3 n sósavat adunk hozzá. Az elegyet 500 ml vízzel hígítjuk, majd három ízben, alkalmanként 100—100 ml-«s részleteikben, ©tilacetátital extraháljuk. Az etilacetátos kivonatokat szárítjuk és bepárolunk; így maradékhez jutunk, amelyet szüikagélen kromatografáljuk (eluálás 5% etilacetátot tartalmazó Slkellysolve B-vel). Az eluátum bepárlása után 380 mg kiindulási anyagot (a), továbbá 700 mg megfelelő ^-izomert kapunk. A fenti eljárást követjük, de kiindulási anyagként ß-izamext használunk, és így ugyanilyen eredményéket kapunk. 6~Karbetoxi-biciklo[3.1.0]hexán~3-ol 3Q tetrahidropiranil-éter és g-farbetoxinbiciklo[3.1.0]hexán-2-ol tetrapiramal-éter 88,0 g 6^karbetoxi-biciklo[3.1.0]hexán-3-olb61 és 6^kar, betoxi-ibiciklo[3.1.0]hexán^2-olból álló elegyet és 88 ml dihidropiránt 0o -ra hűtünk és 40 csepp foszforoxikloridot adunk hozzá. Az elegyet 0°-on 2 óra hosszat, majd szobahőmérsékleten 18 órán át keverjük. Az elegyet ezután metilénkloriddal hígítjuk és telített vizes natriumhidrogénkarbonét-oldattal mossuk. A rétegeket elválasztjuk és a vizes fázist három ízben metilénkloriddal extraiháljuk. A szerves fázisokat egyesítjük és vízzel mossuk (a mosóvizeiket visszaextraháljufc), nátmumszulfát felett szárítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk, amikoris maradékot kapuink. Ezt csökkentett nyomáson desztilláljuk; előbb 18 g előpárlatot kapunk amely 40°-on forr 1,3—0,4 Hg mm nyomáson, ezután 75,3 g e-karbetoxi^bieiklofS.l.O]hexán-3-ol tetrahidropiraaiil-Héter és 6-karbetoxi-bicikloí[3.1.0]hexán-2-ol tetrahidropiraniléter elegyet kapunk, 98—131° (0,3—1,0 Hg mm) forrásponttartományon belül. 35 40 45 50 18. példa: 6-Karbetoxi-bicilklö[3.1.0]hexán-r3-ol és 6-karbetoxi-biciklo[3.1.0]hexán-2-ol 96,46 g 6-karbetoxi-biciklo{3.1.0Jhexén 500 ml száraz éterrel készült oldatát nitrogén alatt keverjük és szobahőmérsékleten eseppenfcént hozzáadagoljuk 266 ml 1,0 mólos bórhidridoldatnak mintegy a felét. A reakcióelegyet 0°-ra lehűtss 60 65 20. példa: .) PGEi, PGEi-metilésziterből A. Enzim-készítés Táptalajt készítünk, amely 2% fcukoricalekvárt (carelőz és glükóz egyenlő résziarányú keveréke) tartalmaz csapvízben. Ezt sósav hozzáadásával 4,5 pH-ra megsavaaayítjuk és 1% men
