160370. lajstromszámú szabadalom • Eljárás korrinvázas vegyületek fenolformaldehid gyantakomplexeinek előállítására
3 Lényegesen kevésbé tisztított termékeket használnak tákarmánykiegészítőként az állattenyésztésiben. A beszárított baktérium-testeken kívül a feldúsítás különböző fázisaiból nyert konoentrátumokiból készítenek ilyen takarmánykiegészítőket. Ezek alkalmazásával az állatok takairmányértékesiítése rendkívül kedvezően befolyásolható. A mikroorganizmusokból nyert B12 -vitamin tartalmú kivonatok feldúsításána leginkább a fenolt és származékait használják [DBP 932 982]. Ezeket magukban vagy apoláros oldószerekkel hígítva, mint kivonatoló oldószereket alkalmazzák. Ismeretes továbbá, hogy egyes fenolok klórozott származékai savanyításkor kicsapódnak és egyidejűleg a vizes közegből a korrinoidokat is leválasztják. Ezekhez a műveletekhez általában a vizes térfogatra számított legalább 10 tf.% elfolyósított fenolt, vagy 2:—>5 sűly% klórozott fenolszármazékot kell használni. A leválasztás egy további ismert, de eléggé nehezen kivitelezhető módja esetében, a ciánokobalamin nagyobb tisztaságú koncentrált vizes oldatából, 2i% fenol hidegen történő hozzáadásával kristályos B^-vitarnin fenol-komplexet képeznek. Számos ismert eljárás alkalmaz különféle ioncserélő gyantákat, [DBP 933 643], melyek részben fenol-formaldehid alapanyagúak. Ezenkívül ioncserélő hatás nélküli, szilárd térhálós fenolformaldehid polikondenzátumok is adszorbeálják a korrinoidokat. Ismeretes, hogy a vizes oldatban levő sók az ilyenfajta gyanták kapacitását rendkívül lecsökkentik. Meglepő módon azt találtuk, hogy fenol és formaldehid gyengén savanyú körülmények között végzett kondenzációja útján egy olyan termék nyerhető, amelyet elegendő már rendkívül kis mennyiségben is, az ásványi sókat és egyéb szerves anyagokat tartalmazó feltárt és szűrt kivonatokhoz adni, hogy a korrinoidokat menynyiségileg leválasszuk az oldatból. A kivonat résziben fehérjéket is tartalmaz, a korrinvázas vegyületek tehát szabad és fehérjéhez kötött állapotban vannak, a reagens hozzáadása után a korrinoid-tfehérjekomplex megbomlik és ezáltal a leválasztás kapcsán kizárólag szabad állapotú korrinoidokat nyerünk. Az ilyen fenol-fo,rmaldehid kondenzátumnak az alkalmazása útján a több 100 m3 térfogatú fermentleivek feldolgozása műszakilag rendkívül nagymértékben leegyszerűsíthető, maga a kinyerés pedig igen gazdaságossá válik. A gyanta kondenzációs foka nem érheti el a novolakk típusú gyantákét, mivel azokban 1 molekulasúlynyi fenolra kfo. 0,8—0,9 molekulasúlynyi formaldehidet használnak, a találmány szerint pedig 1 mól fenol 0,3—0,7, előnyösen 0,5—0,6 mól formaldehiddel képezett kondenzációs termékét alakítjuk ki. A lúgos kezelés kapcsán az el nem reagált formaldehiddel különféle metilol-származékok is képződhetnek, így a korriinoidokkal való komplexképzés még jobban érvényesül. .Az előállított folyékony 4 gyanta polimer molekulánként 2—5 fenol-egységet tartalmaz: előállítási módját az alábbiakban ismertetjük. A találmány szerint ezt a kondenzátumot a feltárt fermentlé térfogatára 5 számítva 0,10/Q, körüli mennyiségi arányban adhatjuk a feltárt fermentléhez az abban jelenlevő Bi2-vitamin és/vagy egyéb korrinoidok, mint amilyenek a hidroxo-, nitrito-, sulfite-, rodanatokobalamin, a Bi2-koenzim és egyéb ko-10 enzimek, továbbá az inkomplett korrinoidok, mint amilyen a B faktor (kobinamid) és savas származékainak mennyiségi leválasztása céljából. A korrinoid-rfenol-lformaldehid gyantakoimplex segítségével rendkívül széles területen nyílik 15 lehetőség — műszakilag könnyen teljesíthető feltételek mellett — az említett korrinoidok feldúsítására, stabil közbülső termékek előállítására. így igen előnyösen felhasználható a komplex-20 képzés a nagy volumenű, feltárt és leszűrt, alacsony koncentrációjú ferrnentlevek korrinpid tartalmának leválasztására, amely lehetővé teszi, hogy a hatóanyagot jól kezelhető, kis menynyiségű csapadékként kinyerjük. A korrinoid-25 -fenolnformaldeMd gyantakomplex leszárítva, ill. finom porrá őrölve feldolgozási intermedierként is alkalmazásra kerülhet. Ez a korrinoid-tfenol-f ormaldehid gyantakomplex előállítható a feldolgozás bármelyik fázisá-30 ban levő vizes oldatból. A stabil korrinaid-ifenol-ttormaldehid gyantakomplex lehetőséget nyújt arra is, hogy segítségével a feldolgozó üzemrész gyártását egyenletessé tegyük, így az esetleg felgyülemlő ter-35 méket később alkalmas időpontban dolgozzuk fel. A gyantás adszoflbátum vízben nem oldódik, így mindenféle mikrobiális fertőzéstől vagy 40 enzimatikus, ill. hidrolitikus 'behatástól mentes. A korrinoid-fenol-tformaldehid gyantakomplex csapadéknak további előnye még, hogy a fényérzékeny származékokat, így a kohamid-, ül. kobinamid-koenzimeket, továbbá a szulfito-szár-45 mazékokat a fénybéhatástól védi; a leválasztott korriooid-fenol-formalddhid gyantakomplex a végzett papírkromatográfiás vizsgálatok szerint már lényegesen kevésbé érzékeny a fényre, mint maga a szabad korrinoid. 50 A kondenzátum elkészítésénél célszerűen úgy járunk el, hogy egy 5 literes, háromfuratú gömblombikha, amely keverővel, visszafolyó hűtővel és csepegtetős tölcsérrel van ellátva, bemérünk 1 kg szilárd fenolt és 74 ml n kén-55 savoldatot, majd vízfürdőn elfolyósodásig melegítjük. Elfolyósodás után a melegítést megszüntetjük, majd a keverés megindításakor a folyékony fenolhoz 215 ml-es részletekben 474 ml tömény formaldehid oldatot adagolunk. A kez-60 detfoen kb. 80 °C hőmérsékletű fenolokat a fórmaldehidrészletek hatására lassan tovább melegszik. Amikor a formaldehid 2;/3 részét már hozzáadagoltuk, a hőmérséklet 100 °C körül állandósul. Ekkor megtörténik a fázis-szétválás, tb azaz külön vizes fázis válik el. 2
