159665. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3 béta-hidroxi-delta5(10)-sztereidok előállítására
ricafőzetet tartalmazó tápoldatot a Candida tropicalis St. Monilia H (Inst, für Gärungsgewerbe, Berlin) lemosott ferde agarkulturájával beoltjuk és 1 napon át, 30 C°-on, 145 ford./perc frekvenciával rázzuk. Ezzel az előtenyészettel 29 liter hasonló összetételű sterilizált közeget tartalmazó, 50 literes fermentort beoltunk és szilikonolaj SH hábzásgátló hozzáadása után 2:9 C°-on levegőztetés (1,65 m3/óra) és keverés (220 ford./perc) közben fermentáljuk. 24 óra fermentálás után az így kapott tenyészet 1,8 literét hasonlóképpen előkészített fermentorba steril körülmények között átvisszük és azonos feltételek mellett fermentáljuk. 8 óra fermentálás után 6,0 g, 200 ml dimetilformamidban oldott z(5<10) -ösztrén-17:/5-ol-3->on-et adunk az elegyhez és tovább fermentáljuk. A szubsztrát hozzáadása után a levegő mennyiségét a felére csökkentjük, a keverőt leállítjuk és további 35 órán át fermentálunk. Ezt követően a fermentor tartalmát 15, majd 10 liter metilizobutilketonnal éxtraháljuk és az extraktot 50 C° fürdőhőmérsékleten vákuumban bepároljuk. Az olajos nyersterméket 10% vízzel dezaktivált szilikagélen hexán és aceton elegyével kromatografálva fokozatosan eluáljuk és hexán/aceton-ból kristályosítjuk. Ily módon 36%-os hozammal kapjuk a /Í^O'-ösztrén-S^H/í-diolt. Op.: 149—150 C°: UV: £m = 6320. 3. példa: A 2. példában leírt körülmények között 6 g 17^-hidroxi-zl5(10) -ösztrén-3-ont Rhodotorula glutinis St. gracilis Reindl 21 (IPG) törzzsel fermentálunk, majd feldolgozzuk. A keletkezett nyersterméket a 2. példában leírt módon szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk, és aceton-hexán elegyből átkristályosítjuk. A kapott zí5( 10 )-ösztrén-a / (?,il7;^-diol 148—149 C°-on olvad. Termelés 17%. UV£ , 92 = 6200. 4. példa: A 2. példában leírtakkal megegyező körülmények között 6 g 17;^-hidroxi-zl5 < 10 >-ösztrén^3-ont Candida krusei (ATCC 6288) törzzsel fermentálunk, és feldolgozunk. A keletkezett nyersterméket a 2. példában megadott módon szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk, és aceton-hexán elegyből átkristályosítjuk. Az így nyert A5^-ösziiren^ß;l7,ß-dml 150—151 C°-on olvad. Termelés 45%. UVE 192 = 6500. 5. példa: A 2. példában megadott körülményeik között 6 g 17|^iidroxi-J5 < 10 >-ösztrén-3^>nt Candida ceylanoides (Schering M 9 F) törzzsel fermentálunk és dolgozunk fel. A keletkezett nyersterméket a 2. példában leírt módon szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk, majd acetonhexán elegyből át'kristályosítjuk. A kapott 6 y)5{io)_ösZ trén-3^,17i / ö-diol olvadáspontja 147—149 C° UVfi 192 = 6050. 6. példa: ,5 A 2. példában megadott körülmények között 6 g 17l a-metil-17!/3 l -hidroxi-/J 5(10) -ösztrén-3-ont Candida tropicalis St. Monilia H (IfG, Berlin) törzzsel, fermentálunk és dolgozunk fel. A ke-10 letkezett nyersterméket szilikagélen végzett oszlopkramatográfiával tisztítjuk, és acéton-Jhexán elegyből átkristályosítjuk. A kapott 17ia-metil-J5 <»>-ösztrén-3jft:17^diol 162,5--164 C°-on olvad. Termelés 25% UVB 194 =7120. 15 7. példa: A 2. példában megadott körülményeik között 6 g 17a-etinil-17^zJ5 < 10 )-ösztrén-3-ont Candida 20 tropicalis St. Monilia H (IfG, Berlin) törzzsel fermentálunk, és dolgozunk fel. A keletkezett nyersterméket szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk, és aceton-hexán elegyből átkristályosítjuk. Az így kapott 17a-etinil-/l5(10)-öszt-25 rén-3:/ S,17 / 5-diol 132—135 C°-on olvad, termelés 28%, UVJS 192 = 10 500. 8. példa: 30 A 2. példában megadott körülmények között 6 g 18-imetil-17i^-4hiidroxi-1 /l 5(,10 >-ö:sztrén-3-ont Candida tropicalis St. Monilia H (IfG, Berlin) törzzsel fermentálunk, és dolgozunk fel. A keletkezett nyersterméket szilikagéles oszlopkro-35 matográf iával tisztítjuk, és aceton-hexán elegyből átkristályosítva 160—102,5 C° olvadáspontú 18-metil-zl5 < 10 >-öSztrén-3^,17^~d;iolt kapunk. Termelés 37%, UVB m = 9600. 40 9. példa: A 2. példában megadott körülmények között 6 g /í5 ( 10 >-ösztrén-3,17-diont Candida tropicalis St. Monilia H (IfG, Berlin) törzzsel fermentá-45 lünk és dolgozunk fel. A keletkezett nyersterméket szilikagéles oszlopon kromatografálva tisztítjuk, majd etilacetátból átkristályosítva 129—130 C° olvadáspontú 3i#-hidroxi-;Zl5 < 10 >-ösztrén-17-ont kapunk. Az oszlopkromatográ-50 fia utolsó eluátumaiból melléktermékként J5(1< "-ösztrén-3/?,17i/?-diolt izolálunk, melyet hexánaceton elegyből kristályosítunk át. Op. 146— 149 C°. 55 10. példa: A 2. példában megadott körülmények között 6 g 17í/?-acetoxi~zl5 < l0 >-ösztrén~3-ont Candida tropicalis St. Monilia H (IfG, Berlin) törzzsel fer„0 mentálunk, és dolgozunk fel. A keletkezett terméket szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk, majd hexán-aceton elegyből átkristályosítva 3^-hidroxi-J5(10 )-ösztrén-17 J ö L acetátot kapunk, amely 110—112 C°-on olvad. Termelés G5 25%. 3
