159279. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a 7-aminocefalosporánsav származékainak előállítására
9 159279 10 Ebből a nyerstermékből 9,61 g-ot 100 ml dimetilformamidban szuszpendálunk és ezt követően 0,15 ml (Bu3 !Sn) 2 0 (tributilónoxid) adunk hozzá. Ezután az oldathoz 15 perc alatt 10,6 ml 45 ml dimetilformamidban oldott /?-klóretil- 5 -izooianátot csepegtetünk és még egy óráig keverjük. A reakcióelegyet leszűrjük és a szűrletet nagyvákuumban szárazra pároljuk. A gyantaszerű maradékot 500—5O0 ml absz. éterrel háromszor eldörzsöljük (éteroldható hányad: 10 4,03 g olaj eldobva) és utána 250 ml 10% 6,7 pH-jú foszfátpufferiben felvesszük, majd egymásután extraháljuk 1,5 liter és 0,5 liter etilacetáttal. A szerves fázisokat 100—100 ml 6,7 pH értékű puffer^oldattal kétszer extraháljuk 1S és utána eldobjuk. A vizes fázisokat egyesítjük, 1,5 liter etilacetáttal felülrétegezzük, 2 n sósav hozzáadásával a pH-t 2,4-re állítjuk, öszszerázzuk és a fázisokat elválasztjuk. Konyhasóval történt telítés után a vizes fázist még 20 kétszer extraháljuk 1—1 liter etilacetáttal, a szerves fázisokat egymásután kétszer mossuk 200—200 ml telített konyhasóoldattal, nátriumszulfát felett szárítjuk és vákuumban szárazra pároljuk. így 6,32 g amorf maradékot kapunk, 25 amiből nátrium-a-etilhexanöáttal a nátriumsó (nyerstermék) kapható. Ezt átsavanyítás és etilacetátos extrakció útján a kristályos savaiákká visszaalakítjuk. Ebből a fent leírt módon az 0-de2acetil-0-(/Mdóretilkarbamoil)-7- 30 -[tetrazoil-(il)-acetilamino]-cefalosporánsav nátriumsóját állítjuk elő. UV színkép ^max = 260 m/t (s = 9200). Optikai forgatóképesség (a )20 D = -j-i2il° ± 1° (c = 1 vízben). Vékonyrétegkiromatogram szilikagélen: RfioiA = 0,5; . 35 Rf52 = 0,23. 5. példa: 9,15 g 7-j[tetrazolil-(l)-acetilamino]-cefalosppránsav-nátriumot 270 ml vízben oldunk és 37°-on 240 mg acetilészterázzal a 4. példában leírt módon a 7Hftetrazolil-(;l)-acetilaimino]-0--dezacetil-cefalosiporánsav nátriuimsójává átalakítjuk (10,13 g). Ezt a nyersterméket 100 ml abszolút dimetilformamidban szuszpendáljuk és 046 ml tri-n-butilónoxidot [i(Bu3iSn)2 0] adunk hozzá. Utána 5 perc alatt hűtés köbben hozzáosepiegtetjük 8,1 g (10,8 ml) metilizocianát 45 ml dimetilformamiddal alkotott oldatát és még egy óráig keverjük. A reakcióelegyet szűrjük és a szűrletet nagyvákuumban szárazra pároljuk. A gyantaszerű maradékot háromszor eldörzsöljük 500— 500 ml éterrel (az éteröldható részt leválasztjuk és eldobjuk) és utána 250 ml 6,7 pH-jú 10%-os foszfátpuffeüben felvesszük. Egymásután 1,5 liter és 0,5 liter etilaeetáttal extraháljuk, a szenves fázisokat kétszer 100—100 ml 6,7 pH-jú pufferoldattal visszaextraháljuk és utána eldobjuk. A vizes fázisokat egyesítjük, 1,5 liter etilacetáttal felülrétegezzük, 5 n sósav hozzáadásával rázás közben a pH-t 2,4 értékre állítjuk be és a fázisokat szétválasztjuk. Konyhasóval való telítés után a vizes fázist még háromszor extraháljúk 1—1 liter etilacetáttal. A szerves fázisokat egymásután kétszer 200—200 ml telített konyhasóoldattal mossuk, nátriumszulfát felett szárítjuk és 100 g szilikagéllel töltött oszlopon (átmérő 4,5 cm) szűrjük. Az oszlopot 500 ml etilacetáttal utánamossük és az egyesített észtereluátumokat vákuumban szárazra pároljuk. így 4,7 g amfoter jellegű maradékot kapunk; amelyet 20 ml acetonban felveszünk, amikoris a legnagyobb rész oldatba megy. 80 ml kloroform hozzáadására világosbarna csapadék válik ki, amelyet szűréssel leválasztunk és ezt követően mégegyeszer a hasonló aceton-kloroform-kezelésnek vetjük alá. Az ebből származó csapadékot (1,2 g) 40 ml metanolban felvesszük és 1,7 ml metanolos nátrium-G-etilhexanoát (3 ml) hozzáadása után oldatba visszük. Kevés „Norit" (aiktívszén) segítségével és ezt követően „Celit"-en történő szűréssel színtelenítjük, majd kib. 10 ml térfogatra betöményítjük. Ily módon a kristályos nátriumsót kapjuk, amelyet leszűrünk és acetonnal mosunk. A fent leírt aceton/kloroformos kezelésnél keletkező szűr letet egymásután 100 g szilikagélt tartalmazó (3 cm átmérőjű és 27,5 cm magasságú) oszlopra visszük. Az acetontartalamnak az eluálószerben való lassú emelése mellett kromatograf álunk. 1:3 térfogatarányíi aoeton-kloraforim eleggyel eluáljuk a kívánt anyagot, amelyet a fent leírt módon alakítunk át a kristályos nátriumsóvá. Az egyesített (kb. 90%-os tisztaságú) nátriumsófrakciókat további tisztítás céljából mégegyszer a savvá alakítjuk. Ehhez 30 ml víziben oldjuk, 300 ml etilaeetáttal felülrétegezzük, hígított sósavval 2,4 pH értékre állítjuk be és konyhasóval telítjük. A fázisok elválasztása után a vizes fázist 200 ml és 100 ml etilacetáttal utánaextrahálju'k. Az egyesített szerves fázisokat telített konyhasóoldattal mossuk, nátriumszulfát felett szárítjuk, 10 g szilikagél tartalmú oszlopon, szűrjük és vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot 3 mólos metanolos nátrium-oHetilhexanoát oldattal közvetlenül az O-dezacetil-0-metil-kar!bamoil-7-i[tetrazolil-'(l)-acetilaminoj-cefalosparánsav tiszta, kristályos nátriumsójévá alakítjuk. UV-színkép: 2műx 262 m/t (« = 8450) Optikai foiiigatóképesség: (Ö)20 D = +127° ± ± 1° (c = 0,98 vízben). Vékonyrétegkroimatogram szilikagélen: Rf52 — = 0,17, Rf10lA = 0,40. 6. példa: 9,15 g 7-[tetrazolil^(il)-i aicetil l am.ino]-oefalosporánsavnnátriumsót 270 ml víziben oldunk és 37°-on 240 mg acetilészterázzal a 4. példában leírt módon a 74tetrazoMl-'(l)-aicetilamino]-0--dezaeetil-oefalosporánsav-nátriummá (10,3 g) átalakítjuk. 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 0
