159096. lajstromszámú szabadalom • Eljárás cefalosporin C származék fermentléből való feltárására

159096 11 12 tonnái (MIBK) extraháljuk pH 2 értéken, majd elválasztjuk és a MIBK fázist eldobjuk. Az extrahált fermentléhez negyedrész menynyiségű acetont adunk és a pH-t nátriumhidroxid-oldattal pH = 7,85 értékre állítjuk be. 100 liter fermentiere számítva 2 kg n-butil-izocianátot adunk az oldathoz lassan, keverés közben (kb. 6,1 mól n-butil-izocianát per mól cefalosporin C arányban). A pH-t 15%-os nátriumhidroxid-oldattal állandóan 7,8 és 8,0 között tartjuk és a hőmérséklet 0—10 °C között van az adagolás közben. A keverést addig folytatjuk, amíg a pH-nátriumhidroxid hozzáadása nélkül is állandó marad, ami kb. 2 óra múlva következik be. 30%-os kénsav adagolásával a pH-t 2-re állítjuk be, és az acilezett fermentlevet térfogata 3/é részének megfelelő n-butanollal extraháljuk. A butanolos fázist vízzel mossuk, majd vákuumban 36 °C-on eredeti térfogatának kb. felére koncentráljunk be. A koncentrátum víztartalma elhanyagolható. A koncentrátumot lehűtjük és pH = 4,8-ig n-butanolos nátriumetilhexanoát oldatot adunk hozzá. Az N-(N'-butilkarbamoil)-cefalosporin C nátriumsója kicsapódik és ezt szűréssel elválasztjuk. A csapadékot butanollal mossuk, petroléterben újraszuszpendáljuk, acetonnal mossuk, szűrjük és vákuumszekrénytoen 40—60 °C-on szárítva nyerjük a termékét. A használt fermentlé vizsgálata során 15%-nál kevesebb cefalosporin C aktivitás mutatható ki. A termék megfelelő tisztaságú a 7—ACA előállítás céljára. A termék kettős savnak mutatkozik. Analízis: C2iH3oN4

OgS.H20-ra számított: C 47,36% H 6,06% N 10,54% H,0 3,38% talált: C 47,85% H 6,52% N 10,54% H2

0 3,48% S 6,45%. 6. példa N-(N'-fenilkarbamoil)-cefalosporin C nátriumsójának „in situ" előállítása Az 5. példa szerinti eljárást ismételjük meg azzal a különbséggel, hogy az ott használt n-butilizocianát :cefalosporin C 6,1:1 mólarány helyett 7:1 fenilizocianát mólarányt használva, 7—ACA-vá hasításra alkalmas termék keletkezik. Az extrakció után használt fermentlé vizsgálata 15%-nál kisebb cefalosporin C aktivitást mutat. A terméket „dinsavnak" találták. Analízis: C23H26N/,09S-re számított: C 51,68% H 4,90% N 10,48% S 6,00% talált: C 51.63% H 5,27% N 10,62%, S 6,14% 7. példa 60 N-(N'-benzilkarbamoil)-cef alosporin riumsójánaik „in satu" előáflilítása. C nát-Az 5. példa szerinti eljárást ismételjük meg azzal a különbséggel, hogy az ott alkalmazott 6,1:1 n-butilizocianát-cefalosporin C mólarány helyett 7,0:1 benzilizocianát-cef alosporin C mólarányt 10 használva, N-(N'-benzilkarbamoil)-cefalosporin C nátriu'nsó keletkezik. 8. példa 15 . N-(N-/rövidszénláncú/-alkil- vagy -aril-karbamoil)-cefalosporin C származékok nátriumsóinak előállítása. 20 Az 5. példa szerinti eljárást ismételjük meg azzal a különbséggel, hogy az ott alkalmazott nbutilizocianátot p-metilfenilizocianáttal, 25 o-metoxifenilizocianáttal, o-klórfenilizocianáttal, p-metilbenzilizocianáttal, m-nitrofenilizocianáttal, metilizocianáttal, 30 etilizocianáttal, n-propilizocianáttal, izopropilizocianáttal, izobutilizocianáttal vagy t-butilizocianáttal helyettesítve, így megfele-35 lően N- N'-(p-metilfenil)-karbamoil/-cefalosporin C nátriumsó N-/N^c~mie!

tioxifeni.l)-ikarbaim.oilAcefalosporin C nátriumsó, 40 N-/N'-(o-klórfenil)-karbamoil/-cef alosporin C nátriumsó, N-/N'-(p-metilbenzil)-karbamoil/-cefalosporin C nátriumsó, N-/N'-(m-nitrofenil)-karbamoil/-cefalosporin C 45 nátriumsó, N-(N'-metilkarbamoil)-cefalosporin C nátriumsó, N-(N'-etilkarbamoil)-cefalosporin C nátriumsó, N-(N'-propilkarbamoil)-cefalosporin C nát-5Q rhímsó, N-('N-izopropilkarbamoil)-cefalosporin C nátriumsó, N-(N'-izobutilkarbamoil)-cefalosporin C nátriumsó, vagy 55 N-(N'-t-butilkarbamoil)-cefalosporin C nátriumsó keletkezik. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás cefalosporin C fenmenitléből történő feltárására, annak származékainak előáMíitásával, azzal jellemezve, hogy (A) egy sawaíl kezelt cefialosporm C tartalmú 65 fermierafűéhez 6