158546. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az aminocsoportok átmeneti megvédésére peptidszintéziseknél
11 158546 12 N-2-i(p-diíenil)-izopropiloxikarbonilaminosav L-tirozin-eiMdhexilammóniumsó LHfenilalanin-jdicilkldhexiil-ammóniumsó L-glutamkisav-y-tercier-butil-észter-ciklohexilarnmóniumsó L-szerm-teraier-butiléter--cikldhéxilammóniuinsó Kvantitatív lehasadás órában 2 1/3 3 1/2 4 1/5 3 7. példa: Az N-2-{p-difenil)-izopropiloxii ka i ribonil-.c3oport leihasítása N! a-2H(p-dif'enil)-ázopix>piloxiikarbonil-JNí-BOC-L-lizil-NE-BOC-É-lizin-metilészterről a) 160,0 rag Na-2-(p-difenil)-izopropiloxikarbonil-Ní-BOC-L-lizil-Ní-BOC-L-lizin-metilésztert 2,2 ml jégecet-452,8%-os hangyasav-víz (7 : .1:2 tf .rész) elegyben oldunk. Különböző időnként 0,30 ml mintákat veszünk, 4 ml dimetilformamidhoz adjuk és 0,1 n jégeoetes perklórsavval titráljuk. 55 perc múlva az Na-védőesoport kvantitatív lehasad, míg az N«-BOC-csoportok nem szenvednek változást. " b) A fenti dipeptidszármazék 240 mg-ját 1,7 ml metilénkloridban oldjuk és szobahőmérsékleten 1,3 nil 37,5 g klóreicatsav-12 ml víz oldatot adunk hozzá. A homogén oldatból különböző időpontokban 0,5 ml-es mintákat veszünk, 1,5 ml metanolhoz adjuk és azonnal szekunder butanol-jégecat-ivíz (67—10—23) rendszerben szilifcagélen kromatográfiaijuk. Az; eredmény azt mutatja, hogy az Nia^védőcsoport 15 perc alatt lehasad és az N«-BÓC-csoportok nem szenvednek változást. A kiindulási anyagot a következőképpen állítjuk elő: 666 mg (1 mmól) Nia-i2-(p-difenil)-izopropiloxikarbonil-tNí—BOC-lizin-idicilkloihexilammóniumsó 4 ml dimetilformarnidos oldatához —15°-on 0,1.25 ml pivaloiOMoridot adunk. 15 percen át —10°-on történő keverés után 320 mg Ns-BOC-lizin^metilészteraoetát (1 mmol) 3 ml diimetilifonmamidos oldatát csepegtetjük hozzá és 2 órán át 0°-on keverjük. A reaikcióelegyet etilacetátiban felvesszük, 0°-on többször 0,1 mól citromsavoldattal, 2 n szódaoldattal és vízzel mossuk, majd szárítjuk és vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot kevés éterben oldjuk, ezt követően gyors kristályosodás indul meg. 632 mg N«-2-j(p-di.fenil)-izopropiloxikairbonil-Ns-BQC-lizjil-JN^-BOC-lizin-imetilésztert kapunk, op.: 87-—-890 (bomlás közben). Etilacetát-Mpetroléter elegyből való átkristályosításkor az olvadáspont nem változik. 10 -Lr-prolil-L-leucil-L^(y-tei-cier-^buitiliészter)-glutaimil-L^fenilalanin-tercier^butilészterről 1,10 g N-2H(p-difenil)HÍ,zopropiloxikarbonil-Pro-Leu-Glu-(OtBu)-Phe-OtBu-t 6,5 ml jégecetH82,8%-os hangyasav-víz (7:1:2 tf. rész) eleggyel 2 1/4 órán át keverünk. Jégihűtés közben telített KOH-oldattal lúgosítjuk, ecsetészterrel extraháljulk, semlegességig mossuk, szárítjuk és vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot kevés petroléterrel eldörzsöljük, majd 75%-os metanollból átkristályosítjuk. 0,65 g H-Pro-Leu-Glu-(OtBu)-Bhe-OtBu-<t kapunk. Op.: 188^190°. 15 A kiindulási anyagot a következőképpen állítjuk elő: 5,35 g (10 mmol) N-2-(p-difenil)-izopropiloxikairlbonál-prolin^dicilklohexilam'móniumsó 40 ml dimetilformamidos oldatát —15°-on 1,25 ml pivaloilkloriddal elegyítjük. 15 perces —10°-on történő keverés után 5,8 g H-Leu-Glu~(Otbu)-Phe-OtBu^aoetát 30 ml dimetüformamidos oldatát csepegtetjük hozzá és az elegyet 2 órán át 0°-on reagáltatjuk. Ezután ecetészterrel hígítjuk, az oldatot 0°-on két-két ízben vízzel, 0,1 mól citromsavoldattal, 2 n szódaoldattal és vízzel kirázzuk. Az ecetészteres oldatot nútriiumszulfátos szárítás után szárazra pároljuk, a maradékot éteriben oldjuk és kristályosítjuk. 6,75 g N-2-^(p^difenil)-izopropiloxikartbonil-Pro-Leu-Glu^(OtBu)-Phe-OtBu-t kapunk, amely 85%-os metanolból' átkrisitályosítva 1880jon (bomlás) olvad. 20 25 35 40 45 50 55 8. példa: N-H2-(pHdifenil)-izopropiloxikarbanil-csopQrt lehasítása N-2-(p-difenil)-izopropiloxikartbonil-60 65 9. példa: Az N^2^(p-difenil)-izopropiloxikiarbondl-csoport alkalmazása szilárdanyaghordozás szintézis esetén Karbonbenzoxi-L-fenilalanil-L^(Ns-tercier-)bu! táloxiikarbonil)-lizilHglicin-'hidrazid előállítása 2,15 g BOC-glieingyantát (sztirol-divinilbenzol-kopolimer, 0,25 mmól BOC-gliein/g gyanta— = 0,5 mmól tartalommal) 3 percig 10 ml dioxánnal keverünk, majd szűrünk. 10 ml 4 n dioxános sósav 'hozzáadása után 30 percig szobahőmérsékleten keverjük és három-Jhárom ízben 10 ml dioxánnal és metilénMoriddal mossuk oly módon, hogy minden esetben három percig keverjük az oldószerrel. Ezután 10 percig 10 ml metilénklorid-trdetilamin (9 : .1) elegygyel keverjük és hatszor 10 ml metiléníkloriddal utánmossuk. A H-glicingyantát metilénklorid alatt tartjuk. 0,83 g Nia-:2-(p-difenil)-izopropiloxikaribonil-Ní-BOC-lizin-dMklohexilammőniumsót (1,25 mmól) metilénkloridban oldunk, 0°-on háromszor 0,2 mól citromsavoldattal és háromszor vízzel kirázzuk. A metilénkloridos fázist szárítjuk, szűrjük és vákuumban néhány ml-re sűrítjük. Ezt az oldatot a fenti gyantához adjuk, 5 percig keverjük, majd kevés metilénkloridban oldott 6
