158344. lajstromszámú szabadalom • Eljárás W847-antibiotikumok előállítására

158344 27 14. táblázat Kromatográfiai elválasztások eredményei 28 Vékonyréteg, Frakció Oszlopszelet Súly R/ 60:40 Titer kloro- jUg/mg formmetanol Kovasav-oszlop: WÖ47C2-28—48 1,2 g 0,65 900—100 • HCl W847d 56—58 625 mg 0,52 850—100 Florisil•oszlop: W847B 164—227 <i30%. aceton etilacetátban) 540 mg 0,38 125—175 W847A 370—397 (80% aceton etilacetátban) 283 mg 0,19 50—100 8. példa: A W847 antibiotikum-lkomplex hidrokloridja Az 5. példában leírt módon elkülönített 140 mg W847 antibiotikum-komplexet k'b. 50 ml vízben szuszpendálunk, a szuszpenzió pH-ját 0,1 n sósav hozzáadásával beállítjuk 6,5—7,0 értékre, és erőteljesen keverjük. Ezután szűréssel eltávolítjuk az esetleg visszamaradt oldhatatlan részeket, és a szűredéket liofilizálva W847 10 15 20 25 30 35 40 antibiotikum-hidrokloridot kapunk kb. 90 mg súlyban kb. 550 /ig/mg titerrel. Ugyanezt a műveletet alkalmazva a W847 antibiotikum-komplexre vagy annak különféle frakcióira, de a sósavat egyenértékű mennyiségű más savakkal, például kénsavval vagy foszforsavval helyettesítve, a megfelelő sókat állíthatjuk elő. Ebben a leírásban valamennyi sót a W847 antibiotikum-komplexhez tartozónak tekintünk, és a leírt szabad antibiotikum teljes értékű ekvivalenseinek, ennélfogva ezeket is felöleli a találmány. A 15. táblázatban közöljük az egy 232 ^.g/mg hatóképességű W847 antibiotikum-komplexből készült hidroklorid, szulfát és foszfát sók aktivitását számos Gram-pozitív és Gram-negatív mikroorganizmussal szemben élesztő-hűslevesben 8,0 pH-nál. 9. példa: A W847—C antibiotikum-komplex elkülönítése 542 g W847 komplexet (lásd az 5. példát) 5,4 liter acetonban oldunk, és a kapott oldatot 30 percig szobahőmérsékleten 81 g aktívszénnel kezeljük. Az aktívszenet szűréssel eltávolítjuk, és a szűredéket vákuumban kb. 2,0 literre koncentráljuk. 80 liter jeges Vizet adunk erőteljes keverés közben az acetonos oldathoz. A kapott szuszpenzió hőmérsékletét keverés közben kb. 25 C°-ra hagyjuk emelkedni, és a terméket szűréssel elválasztjuk. A szilárd csapadékot kevés vízzel mossuk, és vákuumban kb. 50 C°-on megszárítva 212 g W847-^C antibiotikum-komplexet kapunk 1075 (Ug/mg titerrel. K'b. 85 g további termék kapható, ha az anyalúgot bepároljuk, ez a termék azonban szenynyezve lehet A és B frakcióval. A fent leírt módon készített W847—C antibiotikum-komplex előnyösen alkalmazható az alább közölt módion savaddiciós sók előállítására. 15. táblázat A W847 antibiotikum-komplex vízben oldható savaddiciós sóinok baktériumok elleni hatása Mikroorganizmusok A sók legkisebb gátló koncentrációja (/xg/ml) hidroklorid szulfát foszfát Bacillus subtilis ATOC 6633 Staphylococcus aureus ATCC 6538P Staphylococcus aureus ATOC 11163 Sarcina lutea ATCC 9341 Streptococcus faecalis ATCC 10541 Escerichia coli ATOC 10536 Klebsiella pneumoniae ATCC 10031 Proteus vulgaris DA 121 Pseudomonas aeruginosa ATCC 8689 Salmonella schottmuelleri DA 10 0,01 0,01 0,01 0,1 0,01 0,1 0,1 0,1 0,1 0,001 0,001 0,001 0,1 0,1 0,1 2,8 2,8 2,8 1,4 1,4 2,8 5,6 11,1 11,1 1,4 1,4 1,4 1,4 2,8 2,8 14