158314. lajstromszámú szabadalom • Eljárás takarmányozási célokra alkalmas fehérjehidrolizátum előállítására
5 158314 6 pergillus oryzae számos törzse ugyanis fehérjedús táptalajon proteolitikus enzimek termelésére képes, melyekkel akár neutrális, akár lúgos pH-tartományban elvégezhetjük a hidrolízist. Megfelelő énz&mtermelő törzs alkalmazásával úgy végezhetjük a hidrolízist, hogy a hidrolizátumból fenntarthatjuk a fermentációt, illetve a fermentáció enzimtartalmával elvégezhetjük a hidrolízist. Enzimes hidrolízis céljára nem szükséges kész enzimpreparátumot használni, hanem a proteolitikus enziimirnennyiséget nyers alakban is adagolhatjuk vagy a megfelelő mikroba szűrt, csak az enzimeket tartalmazó fermentlevének, vagy a micéliumot is tartalmazó szüretlen femientlevének bekeverése révén, vagy pedig az inokulált fehérjeőrleményen elszaporodó mikroba tenyészetek egy részének friss szervőrleményre való átoltása révén, miközben a mikróbás alapfermentáció táptalajának fehérjeforrásaként a már elkészített szervhidrolizátumot alkalmazzuk. Az enzim-termelés és hidrolízis ilyen összekapcsolásának különleges gazdasági, technológiai előnyei vannak. batöményített hidrolizátum kisebb térfogatban, gazdaságosabban szárítható. Az állattakarimányozási. célokra alkalmas, nagy biológiád értékű féhérjehidrolizátum előállítása a kiindulóainyagként felhasználásra kerülő állati szervek és szervhulladélkok stb., finomra őrölése vízzel való elkeverése után a találmány értelmében úgy történik, hogy a szervőrlemény szuszpenziót 5—10 percre forrásig hevítjük és visszahűtjük, célszerűen tartósítószert adunk hozzá. Az őrleményhez keverünk a szárazanyagtartalomra számított 0,5—5 súly% arányban Ca-vegyületeket. Az őrlemény hőfokát 35-—45 C°-ra állítjuk és az említett módok egyikén mikróbás eredetű proteáz enzimet adunk hozzá. Az enzimaktivitás optimuma által megkívánt 6—9 pH-értékét célszerű adagolásával biztosítjuk. A hidrolízis kívánt mértékének elérése — 3—72 óra — után az elfolyósodott anyagot felforraljuk, a hozzáadott Ca(OH)2 felesleget foszforsav hozzáadásával lecsapjuk. Az emészthetetlen rostokat és egyéb durva szennyezéseiket finom drótszitán történő szűréssel eltávolítjuk. A finom szuszpenziót tartalmazó szűrletet csökkentett nyomás alatt be- -pároljuk és célszerűen porlasztásos vagy forgódobos szárítóval megszárítjuk. A fenti eljárás során a megőrölt és vízzel elkevert pépes anyagokhoz tartósítószerként — amely csupán a fent leírt gyártási folyamat során való tartósítására szolgál — előnyösen valamely illékony, az enzimhatást nem gátló szerves anyagot, pl. kloroformot, toluolt, stb. alkalmazunk, 0,5—1,0 tf% körüli mennyiségben. B. subtilis vagy Aspergillus oryzae kultúrával való beoltás, vagy egy előző ilyen hidrolízis-művelet- ' bői származó hidrolizátum egy részének (pl. 200/o-ának) inokulomként való alkalmazása esetén a szervőrlemény szuszpenzió hidrolízise előtt a baktériumok szaporodását gátló tartósítószert nem adunk a rendszerhez. A kalciumhidroxid és/vagy a foszforsav egy részét —• amennyiben más szervetlen ionokat, pl. ammóniumsófcat is be kívánunk vinni a készítménybe — más bázissal, pl. ammóniumhidroxiddal, ill. más semlegesítő savval, pl. kénsavval is helyettesíthetjük, és kívánt esetben további szervetlen sókat, nyomelemeket vagy bármely más előnyös adalékot, pl. vitaminokat, antibiotikumokat, nyugtató vagy ser'kentő hatású szereket is adhatunk különleges hatások elérése céljából a gyártási folyamat bármely fázisában az anyaghoz. A hidrolízis időtartama az alkalmazott enzimtől és a hidrolízis elérni kívánt mértékétől füg-, gően 3—72 óra lehet: célszerűen a szuszpenzió teljes elfolyósodásáig hidrolizálunk és az esetleg visszamaradó, csekély mennyiségű el nem folyósodott anyagot elkülönítjük és további emésztés céljából egy következő gyártási műveletben visszavisszük a hidrolízisbe. A hidrolízis foka azonban kívánt esetben az időtartam és egyéb eljárási körülmények megfelelő megválasztása útján ettől eltérően is beállítható és így a fehérjéket natív állapotban tartalmazó készít-Azt a meglepő felismerést tettük továbbá, 25 hogy a Ca-ionok jelenlétében történő enzimes lebontás különösen előnyös mind az enzimes hidrolízist alkalmazó eljárás menete, mind az állat takarmányozás céljára gyártott termék szempontjából. 30 Kísérleteink azt mutatták, hogy a fehérjék Ca~komplex formájában különlegesen jól hasznosíthatók takarmányozási célokra. A kapott termék nem higroszkópos. A Ca-vegyületek jelenléte a takarmányozási cél szempontjából ha- 25 tározottan előnyös. Ez az előny még fokozódik azáltal, hogy a Gallonokat Ca(OH)2 formájában adagolva, a hidrolízislhez előnyös lúgos pH-értéket ezzel biztosítják, majd a Ca-ionok feleslegét foszforsavval lecsapva a takarmányozás 40 szempontjából kívánatos Ca-foszfátot hozzuk létre a termékben. Az így végzett enzimes hidrolízis nagy biztonsággal lehetővé teszi a kiinduló fehérje-alapanyag kellő mértékű elfolyósítását és megkönnyíti a termék szárítását. Az 45 eljárás nem azt célozza, hogy a kiinduló nyersanyagot vízoldható formában szabad aminosavakig bontsa. Az elsődleges feladat az, hogy a finomra őrölt, de még darabos fehérje-anyagot oly mértékben folyósítsa el, hogy az a kor- 50 szerű szárítás céljára alkalmas legyen, ugyanakkor a megkívánt mértékben, legfeljebb 30%ban szabad aminosavakig bontsa a fehérjéket. A Ca-vegyület formájában jelenlevő fehérjék lényegesen kevésbé viszkózusak, mint a szoká- 55 sos Na-vegyületek és emiatt jobban kezelhetők és jobban száríthatok, szárítás után pedig kevésbé nedvszívók. A foszforsavas lecsapást pH 2—5 között végezve, a fehérje-Oa-vegyületek finom szuszpenzió formájában is leválaszthatók. 60 Ez a finom csapadék rácsapódik a hidrolízis során elfolyósodott szöveti részekre és jól ülepedő, élesen elváló fázisban lehetővé teszi a hidrolizátum teljes egészének betömónyítését. A dekantálással, centrifugálással vagy szeparálással $$ 10 15 20 25 30 25 40 45 50 55 60 3
