158137. lajstromszámú szabadalom • Eljárás N-karboxi-anhidridek és azok származékainak előállítására

21 158137 22 reakcióelegyet 16 órán át kb. 25 C°-on keverjük, majd szűrjük, és a szüredéket csökkentett nyomáson betöményítjük. A maradék olajat friss dioxánban felvesszük és csökkentett nyomáson ismét betöményítjük. Maradékként a kívánt termék marad vissza. Hasonló módon állítjuk elő a treonin, hidroxiprolin, /J-fenilszerin, ß-hidroxileucin, ct-hidroxinorvalin és y-hidroxinorvalin triklóracetil-N-karboxianhidridjeit, a szerin-N-karboxianhidridet a megfelelő aminosavanhidrid ekvivalens mennyiségével helyettesítve. 3. példa Trifluoracetil-szerin-N-tiokarboxianhidrid előállítása Összesen 84 g szerint felveszünk 75 ml olyan etanolban, amely 18 ml vizet tartalmaz, és 68 ml 11,7 n káliumhidroxid-oldatban. Nitrogén-atmoszféra alatt 97,5 g metiletilxantátot adunk a reakcióelegyhez keverés közben, mialatt a hőmérsékletet hűtőfürdő segítségével kb. 25—30 C°-on tartjuk. A reakciót ezen a hőmérsékleten folytatjuk két órán át, majd a reakcióelegyet 45 C°-ra melegítjük, és további fél órán át ezen a hőmérsékleten tartjuk állandó keverés közben. Az alkohol legnagyobb részét kis nyomáson eltávolítjuk, majd 180 ml vizet adunk a reakcióelegyhez." Kétszer 100 ml éterrel extraháljuk az elegyet a reagálatlan xantát eltávolítása céljából. A vizes lúgos réteget 100 ml etilacetáttal és 73 ml 12 n sósav-oldattal felülrétegezzük, majd 70 ml vizet adunk hozzá. A reakcióelegyet kirázzuk, és a szerves réteget elkülönítjük. A vizes réteget ismét extraháljuk 100 ml etilacetáttal, és az egyesített szerves rétegeket kétszer mossuk 50—50 ml telített nátriumklorid-oldattal. A szerves réteget elkülönítjük, nátriumszulfát fölött szárítjuk, és csökkentett nyomáson betöményítjük. Ilyen módon kicsapódik a kívánt metiltionuretán-szerin. Összesen 8 g metiltionuretán-szerint felveszünk 40 ml tetrahidrofuránban, és keverés mellett 6,1 ml foszfortribromidot adunk a reakcióelegyhez, miközben a hőmérsékletet 0—5 C°-on tartjuk. A reakcióelegyet 200 ml 10%-os vizes nátriumhidrogénkarbonát-oldathoz adjuk, majd háromszor 100 ml etilacetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves rétegeket kétszer 50 ml tömény nátriumklorid-oldattal mossuk, majd nátriumszulfát fölött szárítjuk. Az oldószert csökkentett nyomáson eltávolítjuk, így az N-tiokarboxi-szerinanhidridet kapjuk termékként. A fenti módon előállított termékből összesen 5,8 g-ot adunk 200 ml frissen desztillált dioxánhoz, majd 5 ml trifluorecetsávanhidridet adunk a reakcióelegyhez. Az oldatot kb. 25 C°-on 2 órán át keverjük, majd kis nyomáson betöményítjük. A maradékot 100 ml friss dioxánban felvesszük, majd csökkentett nyomáson ismét betöményítjük. így maradékként a kívánt terméket nyerjük. 5 A treonin, hidroxiprolin, /?-fenilszerin,. /?-hidlintrifluoracetil-N-tiokarboxianhidridjeit hasonló módon állítjuk elő olyan eljárásban, ahol a szerint a megfelelő aminosav ekvivalens mennyisé-10 gével helyettesítjük. 4. példa 15 . Triklóracetil-szerin-N-tiokarboxi-anhidrid előállítása Összesen 5,8 g szerin-N-tiokarboxianhidridet felveszünk 200 ml frissen desztillált dioxánban, 2Q és 4 ml triklóracetilkloridot adunk hozzá. A reakcióelegyet 8 órán át keverjük, majd szűrjük, és a szüredéket csökkentett nyomáson betöményítjük. Maradékként a kívánt termék marad vissza. 25 Hasonló módon állítjuk elő a treonin, hidro• xiprolin, /?-fenilszerin, /?-hidroxileucin, a-hidroxinorvalin és y-hidroxinorvalin triklóracetil-N-tiokarboxi-anhidridjeit olyan eljárásban, ahol a ~„ szerin N-tiokarboxi-anhidridjét a megfelelő aminosavanhidrid ekvivalens mennyiségével helyettesítjük. . 5. példa Szeril-prolil-fenilalanil-arginin előállítása Összesen 15,75 g arginin-hidrokloridot oldunk .- 2,62 liter nátriumtetraborát puffer oldatban, 10-es pH-n. Tömény kénsav-oldattal a pH-t 3-ra állítjuk be, és 10 percen keresztül nitrogént buborékoltatunk át az oldaton. A pH-t 50%-os vizes nátriumhidroxid-oldattal 10,2-re növeljük, majd az oldatot 0 C°-ra hűtjük le. Ezután 400 g jeget, majd 200 ml acetonban oldva 82,5 millimól fenilalanin-N-karboxianhidridet adunk a reakcióelegyhez. Az elegyet ezen a hőmérsékleten egy percen át élénken keverjük, majd tömény kénsav-oldattal a pH-t 3-ra állítjuk be, miközben 10 percen át nitrogént buborékoltatunk át az oldaton. Ezután a pH-t 50%-os vizes nátriumhidroxid-oldattal 9,5-re állítjuk be, és 400 g jeget, majd 150 ml acetonban 112,5 millimól prolin-N-karboxianhidridet adunk az elegy-55 hez. Az oldatot 0 C°-on egy percen át élénken keverjük, majd a fenti módon dekarboxilezzük. Az eljárást 9,3-as pH-nál megismételjük olyan „Q módon, hogy 150 ml acetonban 15,0 millimól trifluoracetil-szerin-N-karboxianhidridet adunk a reakcióelegyhez. Egy percig tartó keverés után a pH-t 7-re állítjuk be, és az elegyet fagyasztva szárítjuk. Ezután a szilikagélt az adszorbeált ter-65 mékkel hozzáadjuk egy olyan szilikagél oszlop-11