158137. lajstromszámú szabadalom • Eljárás N-karboxi-anhidridek és azok származékainak előállítására
158137 23 24 hoz, amelyet előzőleg izopropanollal készítettünk. Az oszlopot metanol :víz:amónia 80:18:2 arányú elegy ével hívjuk elő, és a kívánt tetrapeptidet, amely mentes a trifluoracetil-csoporttól, elkülönítjük. Az alábbi vegyületeket hasonló módon állítjuk elő, a megfelelő N-karboxi- vagy N-tiokarboxi-aminosavanhidridnek mind a trifluoracetil-, mind a triklóracetil-származékát használva. A terméket mindegyik esetben a védő hidroxil-csoporttól mentesen különítjük el. Az N-tiokarboxi-vegyületek esetében a kapcsolási pH 8,8, az N-karboxil-vegyületek esetében használt 9,3-as pH helyett. Az előállított vegyületek a következők: hidroxiprolil-prolil-fenilalanin-arginin /í-fenilszeril-prolil-fenilalanil-arginin /J-hidroxileucil-jproliWemlalanilarginin /5-hidroxinorvalil-prolil-fenilalanil-arginin j'-hidroxinoTvalil-prolil-fenilalanil-arginin. 6. példa O-trimetilszilil-treonin-N-karboxianhidrid előállítása Összesen 4,5 ml (35,1 millimól) trimetilklórszilánt lassan hozzáadunk 5,1 g (35,2 millimól) treonin-N-karboxianhidrid 65 ml száraz tetrahidrofuránnal készített oldatához, miközben a hőmérsékletet kb. 2 C°-on tartjuk, nitrogén-atmoszférában. Az oldathoz lassan hozzáadunk 2,98 ml (34 millimól) száraz 4-metiltiazolt. A hozzáadás közben a bázis hidroklorid-sója kicsapódik az oldatból. Ezután a reakcióelegyet szobahőmérsékletre hagyjuk melegedni, majd a csapadékot nitrogén-atmoszférában szűréssel elkülönítjük. Az oldószert csökkentett nyomáson eltávolítjuk a szüredékből, és a maradékot 35 ml etilacetátban felvesszük, majd kb. 10 C°-on 16 órán át állni hagyjuk. A felülúszó oldatot elválasztjuk, és az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A kicsapódott terméket kristályosítjuk hexános kezeléssel, majd nitrogén-atmoszférában végzett szűréssel elkülönítjük. Hasonló módon állítjuk elő az O-trietilszilil-treonin-NJkarboxianhidridet, az O-tripropilszilil-treonin-N-karboxüanhidridet, az O-tri-n-butüszilil-treonin-N-karboxianhidridet treonin-N-karboxianhidridből, kiindulási anyagként trietilklórszilánt, tripropilbrómszilánt, ill. tri-n-butilbrómszilánt használva. 7. példa O-Trimetilszilil-szerin-'N-karlboxianhidrid előállítása Nitrogén-atmoszférában összesen 3,68 milliliter (26,8 millimól) trimetilklórszilánt adunk~3,75 g (28,6 millimól) szerin-N-karboxianhidridhez 65 ml száraz tetrahidrofuránban, miközben a hőmérsékletet kb. 0 C°-on tartjuk. Ezután a reakcióelegyhez 2,51 ml (28,6 millimól) vízmentes 4--metiltiazolt adunk ugyanezen a hőmérsékleten. 5 A reakcióelegyet állni hagyjuk, amíg szobahőmérsékletre nem melegszik, majd két órán át keverjük. Ezután szűrjük, és a szüredéket vákuumban betöményítjük. A visszamaradt olajszerű anyagot 30 ml etilacetátban felvesszük. 10 Gyorsan hozzáadunk 100 ml hexánt, és a reakcióelegyet két órán át állni hagyjuk szobahőmérsékleten, majd a felülúszót dekantáljuk. A dekantált részt szárazra pároljuk, és a visszamaradó terméket megtisztítjuk olyan módon, hogy 15 hexánban felvesszük, szűrjük, majd további hexánnal mossuk. Hasonló módon állítjuk elő az 0-trietilszilil~ -szerin-N-karboxianhidridet, az O-tripropilszilil-20 -szerin-N-karboxianhidridet és az O-tri-n-hexilszilil-szerin-N-karboxianhidridet szerin-N-karkarboxianhidridből és trietilklórszilánból, tripropilbrómszilánból, ill. tri-n-hexilklórszilánból. Az O-trimetilszilil-hidroxiprolin-N-karboxian-25 hidridet hasonló módon állítjuk elő olyan eljárásban, ahol kiindulási anyagként hidroxiprolin-N-karboxianhidridet és trimetilklórszilánt használunk. 30 35 55 8. példa O-Trimetilszilil-tirozin-N-karboxianhidrid előállítása Összesen 7,36 ml (53,6 millimól) trimetilklórszilánt adunk 11,2 g (53,6 millimól) tirozin-N-karboxianhidridhez 100 ml olyan száraz etilacetátban, amely 1,89 ml (53,6 millimól) 4-metil-4Q tiazolt tartalmaz; az oldatok hőmérséklete —5 C°. A reakcióelegyet keverés közben szobahőmérsékletre hagyjuk melegedni, majd egy órán át ezen a hőmérsékleten tartjuk. Szűrés után a szüredéket csökkentett nyomáson betöményít,5 jük, majd a terméket a 7. példában leírt módon nyerjük ki. Hasonló módon állítjuk elő az O-trimetilszilil-3,5-dibrómtirozinHN-kiariboxianhidridet és az O-trimetilszilil-SjQ-^dijődtiroáin-N-ikanboxianhidri-50 det 3,5-dibrómtirozin-N-karboxi-anhidridből, ill. 3,5-dijódtirozm-N4tarboxianhidridből. 9. példa O-Trimetilszilil-^fenilszerin-N-karboxi-anhidrid előállítása Összesen 4,5 ml (35,1 millimól) trimetilklór-60 szilánt adunk nitrogén-atmoszférában 10,9 g (35,1 millimól) /?-fenilszerinhez 150 ml benzolban, miközben a hőmérsékletet gyors keverés közben kb. 5 C°-on tartjuk. Ehhez az elegyhez további keverés mellett 2,84 ml (35,1 millimól) 65 piridint adunk azonos hőmérsékleten. A reak-12
