157600. lajstromszámú szabadalom • Eljárás grizeofaginok előállítására
5 157600 6 használhatók karboxil-, ill. szulfonsav-típusú kationcserélő gyanták (pl. AmberÄe IRC—50, Dowex 50, stb.). Az extrakciós módszerrel előállított nyers antibiotikum egyes komponenseinek szétválasztására eredményesnek bizonyult a benzolos oldat kromatografálása. Az oszlop 'benzolos kifejlesztése során az A komponenst kapjuk tiszta állapotban, míg a B, ill. C komponens pl. kloroform-metanol 9:1 arányú elegyével eiuálható. Eredményesen alkalmazható a nyers termék tisztítására, ill. az egyes komponensek szétválasztására a sziliikagél-oszlopon végzett megoszlásos kroniatográfia. A Kifejlesztéshez használt rendszer pH 6,7 pufferrel telített etilacetát. A grizeofagin egyes komponenseinek megoszlási'hányadosa a szerves oldószer és a vizes fázis között különböző pH-kon eltér. A megoszlási hányadosok 10 k = c szerves c vizes a szerves és a vizes fázis között a következők (az alkalmazott fázisarány 1:1): pH = 3 pH = 4 pH = 5 pH = 5,6 pH = 6,3 pH = 6,6 pH = 7,0 A komponens B komponens C komponens ,08 0,01 0,10 0,17 0,02 0,21 0,24 0,04 0,35 0,50 0,21 0,95 10,0 . 0,30 11,0 17,0 0,91 20,0 25,0 1,8 57,0 Egységes B anyag előállítására eredményesnek bizonyult a következő módszer: A nyers antibiotikum etilacetátos oldatából 6,3 pH-n (Mc Ilvaine-féle pufferélegy) a B komponens átvihető a vizes fázisba, míg az A és C komponensek visszamaradnak. \Az A és C komponensek megoszlási hányadosa között különböző pH-kon nincs jelentős eltérés, így pl. pH 5,4-en folytatva a visszamaradt szerves fázis extrakcióját, az A, illetve C anyagok között az elválás csak részleges, kevés A komponens nyerhető ki tisztán. Az egyes komponensek szétválasztására célszerű a kromatográfiás és extrakciós módszer együttes alkalmazása. A találmány szerinti eljárás segítségével az antibiotikum-komplexből főtermékként a grizeofagin-B-t kapjuk, míg a grizeofagin-A viszonylag kis mennyiségben keletkezik. Mindhárom komponens rendelkezik fáginduüciós és rákiellenes hatással. Az A, B, ill. C komponens aránya a grizeofagin komplexben kb. 1:6:3. A komponensek bázisos jellegű, indikátor típusú vegyületek, színük sav hatására narancssárga, lúg hatására ibolya. A grizeofagin-A bázis élénk narancsvörös színű, kristályos vegyület. Olvadáspont: 159—162 C° (zsugorodás, 210 C teljes bomlás) Elemi analízis: C H N O 67,50—67,40% 7,33— 7,23% 3,80— 3,73% 20,94% (direkt) Ultraibolya abszorpciós spektrumának jellem-25 ző adatai: max. 245 m^ (E.J% m= 583) 270 m,« (Ei%m =401) 430 m/j, (Ei%m = 105), 96%-etanolban. 30 35 40 Infravörös abszorpciós spektruma az 1. ábrán látható. A grizeofagin-A jól oldódik metanolban, etanolban, acetonban, kloroformban, etilacetátban, butilacetátban, benzolban és tetraíhidrofuránban; víziben pH 5,6 alatt. Nem oldódik éterben, petroléterben és n-her xánban. ^ Stabilitás: savas pH-n bomlik, 7—9 közötti 45 pH-n stabil. A grizeofagin-B bázis narancsvörös színű vegyület. 50 55 Olvadáspont: 180—190 C° (bomlik Elemi analízis: C: 66,70—66,74% H: 7,01— 7,04% N: 3,90— 3,87% 0: 22,54% (direkt) 60 Ként és halogént nem tartalmaz. Fajlagos forgatóképesség: Fajlagos forgatóképesség: (a) = +qóú° : 10° (0,1%, etanol) 65 (a) = +350°— ±10° (a) = +345°—±10° (0,1%, etanol) (0,1%, CHCL3 ). 3
