157504. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szulfanilamidok előállítására
157504 múlva mégkezdődik. Az elegyet további 3 órán át keverjük, 30 percen keresztül jéggel hűtjük, szűrjük és a szűrőlepényt jéghideg acetonnál mossuk. A nyersterméket (18.4 g) 300 ml meleg acetonban oldjuk. Azonos térfogatú víz hozzáadása után a kristályosodás megindul. Az ily módon kapott 16 g N§-etoxiacetil-N1 -(5-metil-3-izoxazolil)-szulfanilamid 178—180 C°-on olvad. 9. példa 9,70 g propoxiecetsavanhidridből és 11,3 g NL (5-metil-3-izoxazolü)-52rulf anilamidból a 7. példában leírt módon 12.8 g N^-propoxiacetil-N1 -(5-metil-3-izoxazolil)^szulfanilamidot állítunk elő. O. p: 188—189 C°. 10. példa 14,4 g butoxiecetsavanhidridből és 14,8 g N1 (5-metil-3-izoxazolil)-szulfanilamidból a 7. példában leírt módon 13,3 g ISf'-butoxiacetil-N 1--(5-metil-3-izoxazolil)-szulfanilamidot állítunk elő. O. p: 144—145 C°. 11. példa 10,0 g Ni-metoxiacetil-N^-^-metil-S-izoxazolil)-szulfanilamid (a 2. példában ismertetett eljáráshoz hasonlóképpen készített termék) 60 ml acetonnál képezett oldatához 10,0 g metoxiecetsavanhidridet adunk. A reakcióelegyet 4 órán át állni hagyjuk, majd 120 ml petrolétert (f. p: 30—60 C°) adunk hozzá, mikoris az N1 , N 4 -bisz^etoxiacetilJ-N^-íS-metil-S-izoxazolil)-szulfanilamid kikristályosodik. (9.6 g). O. p: 124—126 C° (metanolból). 12. példa 8,5 g N^etoxiacetil-N^íö-metil-S-izoxázolil)-szulfanilamidot (a 3. példa szerint előállított termék) a 11. példában leírt módon 9,5 g etoxiecetsavarihidriddel reagáltatunk. Az ily módon kapott N1 , N^-biszíetoxiacetilJ-NMö-metil-S-izoxazolil)-szulfanilamid 105—107 C°-on olvad. (9.5 g). 13. példa N1 -etpxiaoetil-N 1 -(5-metil-3-izoxazolil)-szulfanilamidot a .11. példában leírt módon metoxiecetsavanhidriddel reagáltatunk. Az ily módon nyert termék az N1 -etoxiacetil-N 4 -metoxiacetil-N^S-metil-S-izóxazOlil^szulfanilamid. 14. példa 10 15 20 25 S0 40 45 50 55 60 aktivitását egéren az alábbi fertőzésekkel szemben határoztuk meg: 1. Escherichia coli 257 2. Klebsiella pneumoniae A 3. Proteus vulgaris 190 4. Pseudomonas aeruginosa B 5. Salmonella schottmuelleri 6. Salmonella typhosa P 58 a 7. Staphylococcus aureus Smith 8. Streptococcus hemolyticus No. 4 Az egereket intraperitoneális injekciókkal — melyek a minimális halálos dózis 100—1000-szeresét tartalmazták — fertőztük meg. 10 egérből álló csoportokat ezután a teszt-anyaggal azonnal kezeltünk. Azonos módon fertőzött különböző csoportokat ugyanazon teszt-anyag különböző mennyiségeivel kezeltünk. A kezelés módja a fertőzéstől függően a következőképpen változott : Fertőzés száma 6 -Kezelés A találmányunk tárgyát képező eljárással előállítható szulfanilamidok in vivo antibakteriális 65 utólagos kezelés nem volt (tehát csak egy kezelést alkalmaztunk) 1,3,4,5,7 A fertőzést követő első, második és harmadik napon az eredeti dózissal kezeltük (tehát négy kezelést alkalmaztunk) 2 és 8 A kezelés után 4—6 órával második kezelés, a fertőzés utáni első napon két kezelés, a fertőzés utáni második és harmadik napon egy-egy kezelés (tehát 6 kezelést alkalmaztunk). Valamennyi fertőzött állatot — a kezeletlen kontroli-csoportot is beleértve — összesen 14 napig tartottuk megfigyelés alatt. Az életben maradt állatok számát meghatároztuk. A fertőző mikroorganizmus jelenlétét oly módon mutattuk ki, hogy valamennyi állat szívéből tenyészeteket készítettünk. Az eredményeket CD50 -értékekben (mg/kg) fejezzük ki. A számítást Reed és Muench módszerével végeztük el [Am. Jour. Hygiene 27, 493 (1938)]. A toxicitás meghatározása céljából 6—6 egérből álló csoportok tagjainak különböző mennyiségű teszt-anyagot adtunk. Az életben maradt és elpusztult állatokat 72 óra múlva összeszámoltuk. Az eredményeket LDso-értékekben (mg/kg) adjuk meg. Az eredmények kiszámítását Reed és Muench módszerével [Am. Jour. Hygiene 27, 493 (1938)] számítottuk ki. A különböző N^ö-metil-S-izoxazolilJ-szulfanilamidokkal végrehajtott kísérletek eredményét az alábbi táblázatban foglaljuk össze. Összehasonlítás céljából az NMielyettesítetlen és N1 ^acetil-helyettesített Ni-íö-metil-S-izoxazolil)-szulfanilamiddkkal kapott eredményeket is közöljük. 4
