156991. lajstromszámú szabadalom • Eljárás perorális adagolásban aktív cefalosporin antibiotikumok előállítására
1 9 4. példa: A 3. példa szerinti módon előállított 7-/2'-[4"-(N-terc.-butiloxikarbonil-l-a-amiiioetil)-fenil]-3cetamido/-cefalosporánsav 1 g-os részletét 10 ml hideg trifluorecetsavban feloldottuk, és hidegen 2 órán át állni hagytuk a védőcsoport lehasítása és a 7-/2'^[4"-i'l-Ja-aminoetil)-fenil]~acetamido/-caf alosporánsav előállítása céljából. A sót háromszor 30 ml vízmentes etiléter hozzáadásával kicsaptuk az oldatból. A kicsapódó sót elválasztottuk a folyékony fázistól, a centrifugán mostuk, és vákuumexszikkátorban szárítottuk. A 7-/2'-[4"H(!lHa-aminoetil)-feni:l]-acetamido/-caf alosporánsav trifluorecetsavas sójának súlya 820 mg volt. A.só pK'a értékei 4,7 és 9,2. Ultraibolya spektrum: Am 2 eo m^ = 6700. A 7-/2'-[4"-i(l-a-aminoetil)-fe, nil]-acétamido/-cefalosporánsav trifluorecetsavas só 500 mg-os részletét 10 ml vízben oldottuk, és 1 órán keresztül szobahőmérsékleten 20 ml, 25% acetát ciklusú Amberlite LA—1 anioncserélő gyantát tartalmazó metilizobutilketonban kevertünk. A vizes fázist elválasztottuk, metilizobutilketonnal, majd vízzel mostuk. A vizes elegyet csaknem szárazra betöményítve 275 mg (70%) 7-/2'-[4"-(l-a-aminoetil)-fenil]-acetamido/-cefalosporán sav kristályos zwitteriont (belső sót) kaptunk. Ultraibolya spektrum: Am 2 6o mP- = 7720. A vegyületnek két pK'a értéke van 4,7 és 9,3. Az infravörös spektrum megfelelt ennek a terméknek. A vegyület specifikus forgatása +97,8° volt. A 7-/2'-[4"-(l-:a:-ai minoetil)-fenil]-aceta:mido/-cefalosporánsav minimális inhibitáló koncentrációja (MIC) penicillin-rezisztens Staphylococcus aureus klinikai mintával szemben 0,1— 1 fig/ml volt emberi vérszérum jelenlétében és 0,4—0,5 /tg/ml a szérum távollétében, gradiens lemez technikával mérve. A termékek' közepes hatásos adagja (ED50) kétszer adagolva 5,14 mg/ kg egéren á-hemolitikus Streptococcus pyogenes C 203 törzzsel szemben. Gram-negatív organizmusokkal szemben az alábbi minimális inhibitáló koncentrációval rendelkezett: MIC •ganizmus /.g/ml N—9 24 N—10 10 N—26 11 X—26 7 X—68 4 X—1 750 Shigella sp. 16 5. példa: 2- [4'-(terc.-butoxikarbonil-aminometil)-f enil] --ecetsav 2,75 g-os (10,4 mmol) részletét 30 ml 6991 10 dioxán és 15 ml aceton elegy ében oldottuk. A kapott elegyhez 1,05 g (10,4 mmól) trietilamin 5 ml acetonnal készített oldatát adtuk. Az eleje gyet jég-alkohol fürdőben lehűtöttük, majd keverés közben 1,41 g izobutilklórformiát 5 ml dioxánnal készített oldatát adtuk cseppenként, 20 perc alatt hozzá. Ezután az elegyet további 10 percen át kb. 5 C°-on kevertük, hogy a kívánt kevert anhidrid keletkezését teljessé tegyük. A 10 hűtött elegyhez 2,83 g (10,4 mmol) 7—ACA és 1,05 g trietilamin 20 ml hideg vízzel frissen készített oldatát adtuk egyszerre. Az elegyet éjszakán át 0 C°-on állni hagytuk, majd vákuumban betöményítettük a dioxán és aceton eltávolítá-15 sara, 30 ml vízzel hígítottuk, és 150 ml etilacetáttal mostuk. Az elegyre ezután 200 ml etilacetátot rétegeztünk, és keverés közben a pH-t n sósavval 2,8-ra állítottuk be. A rétegeket ezután elválasztottuk, az etilacetátos réteget kétszer 100 ,0 ml vízzel mostuk, és a védett aminocsoporttal rendelkező terméket tartalmazó etilacetátos réteget 150 ml vízre rétegeztük. Az elegy pH-ját 6,5-re állítottuk be In káliumhidroxiddal a 7-_/2'-j[4"M(N-tercHb.utoxikarbonil-a.minometil)-fenil]-aeetamido/-cef alosporánsav kálium-sójának előállítása céljából. A vizes fázisban levő sót 100 ml etilacetáttal mostuk, és a vizes fázist elválasztottuk az etilacetátos fázistól. A vizes fázist vákuumban szárítottuk, hogy a só szemi-kristályos maradék maradjon. Ezt a maradékot úgy 30 tisztítottuk, hogy 15 ml meleg metanolban feloldottuk, a keletkező oldatot leszűrtük, majd a só kikristályosítására kb. 15 ml izopropanolt adtunk hozzá. A folyékony elegyben levő só-kristályokat 0 C°-ra hűtöttük, kiszűrtük és vákuum-35 ban szárítottuk. 1,0 g 7-/2'-[4"-(N-terc.-butoxiklarbonil-ammoetil)^fenil]-acetamido/-cefalosporánsav kálium-sót kaptunk. Az infravörös spektrum megfelelt ennek a vegyületnek. Ultraibolya spektrum Am2 eo mf- = 8140, pK'a = 4,8. 40 A fenti só 0,75 g-os részletét 15 ml vízben feloldottuk, majd 15 ml 98%-os hangyasavat adtunk hozzá. Az elegyet 40 C°-on 3,5 órán keresztül kevertük, majd vákuumban betöményítettük; így 45 gumiszerű anyagot kaptunk, amely kikristályosodott. A kapott 7-/2'H[4"-(aminomet: il)-fenil]-acetamido/-céfalosporanát forró vagy hideg vízben csak kevéssé oldódott, etilacetátban és ecetsavban oldhatatlan volt, de hangyasavban 50 oldódott. A sót 10 ml vízben szuszpendáltuk, pH-ját In sósavval l-re állítottuk be. Ezen a pH-értéken a szilárd anyag legnagyobb része feloldódott. Az oldatot leszűrtük, majd a pH-t 5 n nátriumhidroxiddal 4,2-re állítottuk be. Kis-55 mennyiségű flokkulálódott csapadék képződött, ezt leszűrtük. A 7-/2'-[4"-j(aminometil)-fenil]-acetamido/-cefal!Osporánsav-belső sót tartalmazó szűrlet tárfogata kb. 20 ml volt. Ezt vákuumban szárazra pároltuk, ekkor a kristályosoeo dás végbement. A kristályos savat háromszor 2 ml hideg vízzel mostuk, és mindegyik alkalommal leszűrtük. A kristályos 7-/2'-:[4"-(aminametil)-íenil]-acetamido/-cef alosporánsav pK'a értékei 4,7 és 9,4 kétharmad rész dimetilformafiS mi( ^ — víz elegyben. Az infravörös spektrum 5
