156650. lajstromszámú szabadalom • Eljárás optikailag aktív antipodok előállítására
11 156650 12 A fermentációs szuszpenziókat az la példában leírt módón dolgozzuk fel. Ilyen módon lS^metil-lea-OH^SMi-et kapunk az alábbi tulajdonságokkal: olvadáspont: 101/ /102—,104 C°; a2° D = +46,í2° (dioxán, c=l); «284 =21'000. b) SM redukálása Saocharomyces cerevisiaevel (NCYC 1021). A 2 a példában leírttal azonos feltételek mellett Saetíharamyees cerevisiae-vel (NCYC 1021) végzett fermentáció útján SM-ből 13i/kmetil-14ct-OHnSM-et állíthatunk elő. c) SM redukálása Saccharomyces carlsbernensisszel (CBS 1505) A 2a példában megadottal azonos feltételek mellett Saccharomyoes carlsbergensis-szel (CBS 1505) végzett fermentálás útján SM-ből 13/?-metil-14a-OH-SM1 -et lehet előállítani. d) SM redukálása Saccharomyces pastorianusszal [i(Inst. f. Gärungsgewerbe) Berlin; Kop. 33]. A 2a példában leírttal azonos feltételek mellett, azonban 40 óra hosszat tartó (fermentációs idővel SM-ből Saccharoimyces pastorianus-szal IS^-metil-léa-OH-SMx-et lehet előállítani, 3. példa: l^-Metil-IílaKOH-SM! előállítása baktériumokkal végzett fermentálás útján. a) SM redukálása Bacillus esterificans-szal (BBA Berlin). (Fermentálás baktériumokkal rázólombikban). 500 ml alábbi összetételű 0/5% glukóz 0,'5% élesztőkivonat 0,2% kukoricalekvár 0,1% pep'tan (Merck) oldatot 2-literes Erlenmeyer-lombikba töltünk, a lombik tártaimat sterilizáljuk, majd ferde agar kultúráról fiziológiai konyhasó-oldattal leoldott Bacillus esterificans szuszpenziójával beoltjuk. Az előkultúrát két napon át rázatjuk 30 C° hőmérsékleten, 140 fordulat/perc sebességgel. A kultúrából 50—50 ml-t átviszünk 4 darab 2-literes fermentációs lombikba, melyek mindegyike 450 ml azonos tápoldatot tartalmaz. A lombikokat 4 órán keresztül rázatjuk 30 C°on, mindegyik lombikhoz hozzáadunk 5 ml 2*/0-os etanolos SM-oídatot, és további 20 órán keresztül fermentálunk, A fermentációs szuszpenziót az la példában leírt módon dolgozzuk fel. Ilyen módon il3,^-metil-14a-OHMSM1 -et kapunk; olvadáspont: 101/102—104 C°; b) SM redukálása Bacillus laterosporus-szal (ATÖC 4517). A 3a példával leírttal azonos kísérleti körülmények között, azonban 44 órán át tartó fermentáció« idővel SM-ből Bacillus laterosporus-szal végzett fermentáció útján 13j3-metil-4a-OH-SMi-et állíthatunk elő. c) SM redukálása Brevibacterium vitarumennel (ATCC 10 234). A 3a példában leírttal azonos kísérleti feltételek mellett Brevibacterium vitarumen-nel vég-S zett fermentáció útján SM-ből l)3l/?-imetil-tl4<x-OH-SMx-et lehet előállítani redukció útján. d) SM redukálása Propionibacterium arabinosum-mal (ATCC 4965). A 3a példában leírttal azonos kísérleti felté-10 telek mellett Propionibacterium arabinosium-mal végzett fermentáció útján SM-ből 13l/9jmefll-l'4)a-OH-SMi-et lehet előállítani. e) SM redukálása Protaminobacter alboflavusszal (ATCC 8458). 15 A 3b példában megadottal azonos kísérleti feltételek mellett Protaminobacter alboflavus-szal - végzett fermentáció útján SM-ből 13'/?-metil-14a-OH-SM^t lehet előállítani. f) SM redukálása Mesentericus spec.-szel (Ro-20 bért Koch Inst., Berlin). A 3a példában leírttal azonos feltételek mellett Mesentericus spec.-szel végzett fermentáció útján SM-ből lS^-metil-^a-OH-SMi-et lehet kapni. g) SM redukálása Mycaplana dimorpha-val (ATCC 4279). A 3b példában megadottal azonos kísérleti feltételek mellett Mycoplana dimorpha-val SM-ből 13/ ő-metil-14,a:-OH-SM 1 -et lehet előállítani. h) SM redukálása Bacillus tlhuringiensis-szel (BBA Darmstadt). (Fermentálás baktériumokkal fermentorban). Rozsdamentes acélból készült, 50 liter űrtar„. talmú fermentorfoa 30 liter alábbi összetételű OR táptalajt adagolunk be: ' 0,05% glukóz 0,;5 % élesztőkivonat . 0,2 % kukoricalekváír 0,1 % pepton (Merck) Fél órán át 120 C° hőmérsékleten végzett hevítéssel sterilizálunk, majd a táptalajt beoltjuk .. 1 liter l^napos Bacillus thuringiensis (BBA Darmstadt) rázottkultúrával. Az inokulumot a 3a példában leírttal azonos feltételek mellett kapjuk. Egy napig tartó 29°-on keverés (220 fordulat/ g« perc) és levegőztetés (1,65 m3 /óra) mellett végzett szaporítás után 1,8 liter kultúrát steril körülmények között átviszünk azonos méretű, 38 liter azonos tápoldatot tartalmazó fermentorba. Hat óra hosszat tartó, keverés és levegőztegg tés mellett végzett növesztés után (feltételek mint fent) hozzáadunk habzásgátló anyagként 5% SH jelű sziiikonolajat és 15,0 g SM^et 800 ml etanolban, majd további 16 órán át fermentálunk. Ezután a szuszpenziót kétszer 15 liter 6o metíl-izobutil-ketonnal extraháljuk, az extraktumot 45 C° fürdőhőmérsékleten vákuumban sziruppá betöményítjük, és ezt a szirupot feloldjuk 150 ml izopropiléterben. 20 óra hosszat tartó, 0 C°~on való állás után a kivált kmtályoflfi kat leszívatjuk, kevés jéghideg izopropiléterrel
