156650. lajstromszámú szabadalom • Eljárás optikailag aktív antipodok előállítására
13 156650 14 mossuk, & 60 C°-on vákuumban szárítjuk. Hozam: .13,1 g 13i/?-metil-14)a-OH-SM1 = az elméleti kitermelés 87%-a; olvadáspont: 98/99— 100 c°. Az anyagot négy rész alkoholból végzett átkristályosítással tovább lehet tisztítani. i) SM redukálása Protaminobacter alboflavusszal (ATiCC 8458). A 3h példában ismertetett azonos feltételek mellett az SM-et Protaminobacter alboflavusszal csak akkor lehet jól redukálni, ha a szubsztrátum hozzáadása után 20 órával a levegő-hozzávezetést teljesen leállítjuk, és ezt követően további 20 órán át fermentálunk. A képződött l, 3 ) 3-metil-14a-OH-SM 1- elkülönítése céljából a nyers extraktum konoentrátumát metilénkloridban oldani kell, majd át kell szűrni 10% vízzel dezaktivált kovasavgél-oszlopon, és az eluátumot a fentebb leírt módon diizopropiléterből kristályosítani kell. 4. példa: 3-MetoxiJ8(14)-«zeko-l,3,5i(10),9!(ll)-ösztratetraénHl7(/ 3-o^l4-on (IS^-^netiHV^-OH^SM!) előállítása 'élesztővel végzett fermentáció útján. a) SM redukálása Saccharomyces ellipsoid ésszel (iS 22 Tokayer törzs, Berlin). A 2a példában leírttal azonos feltételek mellett az SM-et Saccharomyces ellipsoidesHSzel (Tokayer törzs) redukálni lehet. A preparatív vékonyréteg-kroimatográfiával kapott nyers terméket kétszer átkristályosítjuk 10 rész diizopropiléterből. Ilyen módon ía^metil-l^-OH-SM!et kapunk az alábbi jellemzőkkel: olvadáspont: 110/112—114 C°; aD = ~ 39,2° (dioxán, c = 1); «264 = 20800. b) SM redukálása Saccharomyces pastorianusszal {Inst, für Gärungsgewerbe, Berlin, Kop. 127). A 2a példában leírttal azonos feltételek mellett Saccharomyces pastorianus-^zal SM-ből nß-mem-ll'ß-OHSM^et lehet élőállítani. c) SM redukálása Saccharomyces carlsbergensis-szel (CBS 2364). A 2/a példában leírttal azonos kísérleti feltételek mellett SM-ből Saccharomyces carlsbergensis^szel (CBS) végzett fermentáció útján 13/?Hmetil-íl7'/ Ő^OH-iSM 1 ^et lehet előállítani. d) SM redukálása Saccharomyces uvarum-mal (CBS 1508). ' • . (Fermentálás élesztővel fermentorban). Rozsdamentes acélból készült, 50 liter űrtartalmú fermentorba 30 liter olyan tápoldatot adagolunk be, amely 5% keményítőcukrot és 2% kukoricalekvárt tartalmaz. A tápoldatot fél órán át 120 C°-on végzett hevítéssel sterilizáljuk, majd beoltjuk Saccharomyces uvaram (CBS 1508) egy napos rázottkultúrájának egy literével. Az inokulumot a 2a példában a növesztő lombikkal kapcsolatban leírttal azonos feltételek mellett állítjuk elő. 29 C°-on keverés (220 fordulat/perc) és levegőztetés (1,)6'5 m3 /óra) mellett egy napon át végzett szaporítás után a kultúrából 1,8 litert steril körülmények között átviszünk egy azonos 5 méretű fermentorba, amely 28 liter azonos tápoldatot tartalmaz. A fenti körülmények mellett keveréssel és levegőztetéssel 6 órán át végzett növesztés után SH jelű szilikonolajat és 5% Lard-olajat adunk habzásgátlóként a tenyészet-10 hez,. továbbá 800 ml etanolban 45,0 g SM-et, majd további 19 órán át fermentálunk. Ezután a fermentációs szuszpenziót kétszer 15 liter metilizobutil-ketoninal extraháljuk., az extraktumot 45 C° fürdőhőmérsékleten vákuumban sziruppá !5 betö menyit j ük, utóbbihoz 400 ml diizopropilétert adunk, és a kapott oldatot 16 órán át 0 C°-on' állni hagyjuk. A kapott kristályokat leszívatjuk, 25 ml jéghideg diizopropiléterrel mossuk, és vákuumban 60 ~C°-on szárítjuk. 20 Hozam: 31,8 g 13^-metÜJl7/ ő-OH-SM 1 = az elméleti érték 71%^a; olvadáspont:. 106/108— 109 C°; a2°D = —04,5° (dioxán, c = 1); s26i = 20 100. A vegyületet négy rész etanolból végzett át-25 kristályosítással tovább lehet tisztítani. 5. példa: lS^-metilnlT^H-SMx előállítása SM-nek 20 Curvularia lunata-val i(NiRRL 2434) végzett redukciója útján. (Fermentálás gombákkal fermentorban). Rozsdamentes acélból készült, 50 liter hefo-35 gadóképességű fermentorba 30 liter alábbi öszszetételű tápoldatot adagolunk: 3 % glukóz 1 % kukoricalekvár 0,2 % NaN03 0,2 % K2 HP0 4 0,1 % KH2 P0 4 0,05 % MgS04 0,05 % KCl 0,002 % FeS04 Fél órán át 120 C°-on végzett hevítéssel a tápoldatot sterilizáljuk, majd beoltjuk Curvularia 50 lunata (MRRL 2434) kétnapos rázottkultúrájának 1 liter mennyiségével. ^ Az inokulumot az- la példában a tenyésztő lombikkal kapcsolatban leírtakkal azonos feltételek mellett állítjuk elő. 55 29 C°-on keverés (220 fordulat/perc) és levegőztetés (I,i65 m3 /óra) mellett két napon át végzett szaporítás után 3 liter kultúrát steril körülmények között átviszünk egy azonos méretű fermentorba, amely 27 liter azonos tápoldatot 6o tartalmaz. A fenti feltételek mellett 16 órán át keveréssel és levegőztetéssel .végzett. növesztés után hozzáadunk a tenyészethez hafozásgiát'lóként Pluronic L 81-et, továbbá 450 ml etanolban 6,0 g SM-et, és a fermentálást további 20 órán át 65 folytatjuk. Ezután a fermentorban levő szusz-1
