156602. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vashidroxid-karbohidrát-komplexek előállítására
156602 14 1 vizes oldatát adjuk hozzá 30—40 C° hőmérsékleten. Az adagolás kiegészítéseként a hőmérséklet 30 C°-on való tartása mellett további mennyiségű w/v 16%-os nátriumkarbonátot adunk lassan hozzá, hogy a pH-t 6-os értékre állítsuk be. Az oldatot 90 C°-os melegítjük 2 órán át és ezután vákuumban 55 C°-on 20 l-re pároljuk be. A sót desztillált vízzel szembeni dialízissel eltávolítjuk és a térfogatot ismét 20 l-re redukáljuk (azaz 15% vashidroxid-dextrán-iheptonsav-komplex koncentrációra). A sókoncentrációt 0,9 súly/tf%-ra állítjuk be és 0,5%-os koncentrációig fenolt adunk hozzá. A szemcséket 3-as zsugorított üvegszűrőn eltávolítjuk az oldatból és az oldatot ampullákba való töltése után autoklávban 1,3 atm. nyomáson egy óráig főzzük. Az autoklávozott oldat vaskoncentrációja 153,2 mg Fe/ml és LD50 értéke egerekbe való intravénás adagolásnál 4600 mg Fe/kg testsúly. Az oldat viszkozitása 25_C°-on 16,8 cSt, a pH pedig 6,5. 40 mg Fe/kg testsúly dózist patkányok hátsó lábába fecskendezve, az injekció után hét nappal a befecskendezés helyén átlagosan 15% vas mutatható ki. 3. példa 360 g vízmentes nátriumkarbonát 1,2 1 vizes oldatát lassan erős keverés közben 840 ml 20 súly/tf% elemi-vas tartalmú vasperklorid oldathoz adunk, melyet előzőleg 1,6 literre hígítottunk. Ezután 187,5 g dextrán-heptonsav (átlagos molekulasúly 5000) 700 ml vizes oldatát adjuk hozzá a hőmérsékletet 30 C° fölött tartva. A hőmérsékletnek 30—40 C° között tartása mellett újabb mennyiségű 16%-os nátriumkarbonát oldattal a pH-t 4,3-ra állítjuk be. Etilalkoholt adunk 60%-os koncentrációig hozzá és a kicsapott komplexet leszűrjük, majd háromszor 60%-os alkohollal mossuk. A csapadékot vízben újraoldjuk és 75 C°-ra melegítjük, hogy az alkoholt eltávolítsuk. A pH-t 2,5 n nátriumhidroxiddal 6-ra állítjuk és az oldatot 90 C°-on 2 óráig melegítjük. A térfogatot 1 literre (15% vas) redukáljuk, és az oldatot szűrjük, ampullákba töltjük és autoklávban 1,3 atm. nyomáson 1 órán keresztül sterilizáljuk. Az autoklávozott vashidroxid-dextranheptonsav-komplex oldat vaskoncentrációja 158,3 mg Fe/ml, és LD50 értéke egerekbe való intravénás adagolásnál vizsgálva legalább 4000 mg Fe/kg testsúly. 40 mg Fe/kg testsúly dózis patkányok hátsó lábába való fecskendezésekor az injekció után hét nappal a befecskendezés helyén átlagosan 14% vas mutatható ki. 4. példa A 3. példában leírt eljárást végezzük, azzal a változtatással, hogy a vas és karbohidrát arányát a kiindulási anyagokban 1:0,75-ben állapítjuk meg. A végső oldatot hozzávetőlegesen 20 eúly/tf% elemi^vas tartalmú térfogatra koncentráljuk a végső ampullázó és sterilizáló folyamat előtt. Az autoklávozott vashidroxid-5 dextránheptonsav-komplex oldat vaskoncentrációja 186 mg Fe/ml, és LD50 értéke egerekbe való intravénás adagolásnál vizsgálva több mint 4700 mg Fe/kg testsúly. Az oldat viszkozitása 25 C°-on 29,7 cSt és a pH 5,6. 10 40 mg Fe/kg testsúly dózis patkányok hátsó lábába való fecskendezésekor az injekció után hét nappal a befecskendezés helyén átlagosan 17% vas mutatható ki. 15 5. példa 840 ml vaspeflklorid oldatot ((20 súly/tf% elemi-vas tartalmú) 1,6 literre higitunk, és 900 ml '20 20%-os dextránheptonsav (átlagos molekulasúly 5000) oldathoz adjuk. Az egyesített oldatokat ismételten anioncserélő gyanta (De-Acidjte. FF) kolonnán hatjuk át, amíg az eluátum pH-ja 6 lesz. A kolonnát minden átfolyás után először 25 1 n sósavval való mosással regeneráljuk, hogy eltávolítsuk a maradék vasnyomokat, ezt követően 1 n nátriumhidroxiddal, majd vízzel mossuk. 30 Az eluátumot 90 C°-on melegítjük 2 órán át, majd desztillált vízzel szemben dializáljuk, hogy eltüntessük a maradék kloridot, és a térfogatot forgóvákuumbepárlón/literre redukáljuk. 3-as zsugorított üvegszűrőn való szűrés után a vas-35 hidroxid-dextránheptonsav-komplexoldatot ampullákba töltjük és 0,7 atm. nyomáson 30 percig autoklávozzuk. 40 6. példa 84 ml vasper oxid (20 súly%/tf% elemi-vas tartalmú) oldatot vízzel 160 ml-re higitunk, és 19 g dextránheptonsav (átlagos molekulasúly 5000) 50 ml vizes oldatához adjuk. Az egyesített 45 oldatot 100 ml 0,880 ammónia tartalmú 10 liter desztillált vízzel szemben 24 órán át dializáljuk. Az ammónia-dializis oldatot újabb 10 1, 50 ml 0,880 ammóniát tartalmazó vízzel újraoldjuk, és a dialízist újabb 24 óráig folytatjuk, 50 mely idő alatt az oldatot a dializiszsákban 8-as pH-ra állítjuk. Az ammónia-dializis oldatot desztillált vízzel neutralizáljuk és további 24 órás dialízissel a pH-t 6,5-re csökkentjük. 55 A vashidroxid-dextránheptonsav-kpmpleX oldatot autoklávban 1,3 atm. nyomános 2 órán át 100 ml-re pároljuk be, szűrjük, ampullázzuk és 1 órán át 1,3 atm. nyomáson sterilizáljuk. 60 Az autoklávozott oldat 117 mg Fe/ml tartalmú; az oldat viszkozitása 25 C°-on 6,6 cSt és a pH 6,2. 40 mg Fe/kg testsúly dózis patkányok hátsó lábába való fecskendezésekor az injekció után hét nappal a befecskendezés helyén átlago-65 san 12,5%' vas mutatható ki. 4
