156545. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 4'-demetil-epipodofillotoxin-béta-D-glukozid előállítására

156545 6 higanysók eltávolítására nátriumbromid-oldattal illetve a cinksók eltávolítására 9:1 víz-metanol eleggyel mossuk. A bomlástermékek zömének a fölös a-acetobrómglukózból való eltávolítására a reakciókeveréket vagy előkromatografáljuk, vagy magasabb hőmérsékleten 5—30%-os vizes etanollal extraháljuk. További tisztításra az előkromatografálás csúcsfrakcióit utánkromatografáljuk, illetve az etanolban oldhatatlan maradványt kovasavgélen kromatografáljuk. A tiszta glukozidfrakciókból tisztítás és nagyvákuumban való szárítás után tiszta tetra-O. -acetil-4'-karbobenzoxi-4'-demetil-epipodofillotoxin-/3-D-glukozidot kapunk; ez újabb kromatografálással tovább tisztítható. Kondenzálás 2y3,4,'6-tetra-0-acetil-/

6-D-glukózzal Meglepetéssel tapasztaltuk, hogy 2,3,4,6-tetra-O-acetil-D-glukóznak tiszta /?-anomérja alakjában akár 4'-karbobenzoxi-4'-demetil-podofillotoxin, akár pedig 4'-karbobenzoxi-4'-demetilepipodofillotoxin alakjában, .azaz függetlenül az ágiikon Q-atomján levő OH-csoport sztereokémia j ától, bórtrifluorid-etiléterát j elenlétében 0 C° alatti hőmérsékleten az adott reakciókörülmények között közömbös oldószerben való reagáltatása jó hozammal a tetra-O-aeetil-4'-karb>dbenzoxi-4'-demetil-epipodofillotoxin-^-D-glukozid keletkezésére vezet, és ez a végtermék egyszerűen és nagyon tiszta állapotban elkülöníthető. A leírt reakciók alapján a technika eddigi állása szerint nem volt előre látható, hogy végtermékként gyakorlatilag csak a /?-glukozidvegyület keletkezik. Az sem volt várható, hogy az érzékeny 2,3,4,6-tetra-0-acetil-/?-D-glukóz az adott reakciókörülmények között, különösen bórtrifluorid-etiléterát jelenlétében nem, vagy csak nagyon csekély mértékiben anomerizálódik az a-anomérré. Meglepő volt továbbá, hogy a 2,3,4,6-tetra-O-aeetil-/?-D-glukózna;k bórtrif luorid-etiléterát jelenlétében akár 4'-karbobenzoxi-4'-demetil-epipodofillotoxinnal, akár pedig 4'-karbobenzoxi-4'Hdemetil-podöfillotoxinnal való reagáltatása ugyanahhoz a végtermékhez, nevezetesen csaknem kizárólag tetra-O-aoetiW-karbobenzoxi-4'-demetil-epipodafillotoxin-/?-D-glukozidhoz vezet. A 4'-karbobenzoxi-4'-demetil-podofillotoxin megfelelő glukozidja csak nyomokban keletkezik. Az eljárás egyik előnyös végrehajtási módja abban áll, hogy 4'-karbobenzoxi-4'-demetil-epipodofillotoxin vagy 4'-karbobenzoxi-4'-demetil-podofillotoxin és 2,3,4,6-tetra-0-acetü-/?-D-glukóz oldatát vagy szuszpenzióját az adott reakciókörülmények között közömbös szerves oldószerben pl. etilénkloridban, kloroformban vagy metilénkloridban, —10 és —25 C° között bórtrifluorid-etiléteráttal hozzuk össze. Az értékes aglikonok minél teljesebb átalakítása érdekében aglikon-mólonként 1,5—3 mól 2,3,4,6-tétra-0-acetil-/?-D-glukózt és 2—4 mól bórtrifluorid-etiléterátot használunk fel. A 4'-karbobenzoxi-4'-demetil-epipodofillotoxin, illetve 4'-karbobenzoxi-4'-demetil-podofillotoxin kezdő koncentrációja az oldószerben kb. 25—40% legyen. A tetra-0-acetil-4'-karbobenzoxi-4'-demetil-epipodofillotoxin-/?-D-glukozid elkülönítésére 5 a bórtrifluoridot egy tercier szerves bázis, előnyösen piridin hozzáadásával hatástalanítjuk, majd a bórtrifluorid-piridin komplexet vízzel kimossuk. A szerves oldószer elpárologtatása után kapott, 2,3,4,6-tetra-O-acetil-D-glukózt és a 10 kondenzációs terméket tartalmazó keverékből vizes etanollal való kicsapással választjuk el az átalakulatlan tetraacetilglukózt. Egy zavaró, nehezen oldható melléktermék kis mennyiségének eltávolítására a csapadékot forró metanolban j5

felvesszük, az oldatot szűrjük, és a metanolt vákuumban eltávolítjuk. Az így kapott tetra-O- acetil-4' -k arbobenzoxi-4'- deme til-epipodof illotoxin-/?-D-glukozid elég tiszta a további feldolgozásra. Benzol és pentán vagy ciklohexán ele-20 gyéből átkristályosítva analitikai tisztaságban állítható elő. 4'-Karbtíbenzoxl-4'-demetil^podafillotoxin (VII képlet) és 4'-;karbobenzoxi-4'-demetil-epipo-25 dofillotoxin (V képlet) A tetra-0-acetil-4'-karbobenzoxi-4'-demetil-epipodofillotoxin-./í-D-glukozid előállítására kiindulási anyagokként szolgáló 4'-karbobenz.,„ oxi-4'-demetil-podo;f illotoxint és 4'-karbobenzoxi-4'-demetil-epipodofillotoxint a következő eljárással állítjuk elő. (Ez az eljárás is tárgya jelen találmánynak.) 4'-Demetil-podofillotoxint (IX képlet), illetve 4'-demetil-epipodofillotoxint (X képlet) vízmentes, az adott reakciókörülmények között közömbös szerves oldószerben —20 és —5 C° között egy tercier szerves bázis jelenlétében klórhangyasavas benzilészterrel . 4'-karbobenzoxi-4'-demetil-podofillotoxinná, illetve 4'-karbobenzoxi-40 -4'-demetil-epipodofillotoxinná alakítunk át. Eddig nem volt lehetséges védőcsoportoknak, mint például acilcsoportoknak vagy a tetrahidropiranil-maradéknak szelektíven a 4'-demetil-epipodoifillotoxin 4'-helyzetélben levő fenolos OH-45 csoportjára való rávitele. Így például 4'-demetil-podofillotoxin, illetve 4'-demetil-epipodofillotoxin szokásos acetilozásával az l,4'-diacetilszármazékot kapjuk. Az ilyen l,4'-diésztereknél az 1 helyzetben lévő védőcsoportok közvetlen sze-50 lektív lehasadása nem érhető el. A 4'-demetil-podofillotoxin, illetve 4'-demetil•repipodofillotoxin dihidropiránnal való reakciója során sikerül ugyan a szelektív éteresítés, az azonban a fenolos OH-csoport szferikus akadá-55 lyozása következtében nem a 4'-, hanem az 1-helyzetben következik be (az 1-O-tetrahidropiraniléter keletkezése). Meglepetéssel tapasztaltuk, hogy sikerül olyan 4'-demetil-podofillotoxin, illetve 4'-demetil-epi-60 podofillotoxin-származékot kapni, amelynek szabad hidroxilcsoportja van az 1-helyzetben és védett hidroxilcsoportja a 4'-helyzetben. A 4'-karbobenzoxi-4'-demetil-epipodofillotoxin előállításának előnyös módja abban áll, hogy 65 igen finoman porított 4'-demetil-epipodofilloto-35 3