156545. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 4'-demetil-epipodofillotoxin-béta-D-glukozid előállítására
156545 8 xint etilénkloridban, metilénkloridban vagy kloroformban —5 IS C°-on egy tercier szerves bázis, például piridin vagy dimetilanilin jelenlétében karbobenzoxikloriddal (klórhangyasavas benzilészter) reagáltatunk, amikor is minden mól 4'-demetil-epipodofillotoxinra 1—1,35 mól karbobenzoxikloridot használunk, hogy az 1,4'bisz-karbobenzoxi-vegyületnek nagyobb menynyiségben való keletkezését elkerüljük. A képződött 4'-karbobenzoxi-4'-demetil-epipodofillotoxint, amely még átalakulatlan 4'-demetil-epipodofillotoxint, valamint egy kevés l,4'-bisz-karbdbenzoxi-4'-dametil-epipodof:ilftotoxint is tartalmaz, önmagában ismert módon, például kristályosítással vagy kromatográfia útján, választjuk el a reakciőkeveréktől. A kiindulási anyagként szolgáló 4'-demetil-epipodofillotoxint 4'-demetil-podofillotoxin epimerizálásával állíthatjuk elő (lásd az 1. példát). A 4'-karbobenzoxi-4'-demetil-podofillotoxin analóg módon készül 4'-demetil-podofillotoxinból kiindulva, amikor is minden mól 4'-demetil-'podoifillotoxinra 1—1,6 mól karbobenzoxikloridot veszünk. Az új vegyület közbülső termékként használható igen erős citosztatikus hatású vegyületek, például a megfelelő aralkilidén-származékok szintézisére. Ezeknek az előállítását a 155 377 lajstromszámú magyar szabadalom leírása ismerteti. A 4'-demetil-epipodofillotoxin-/?-D-glukozidnak is erős és szelektív gátló hatása van a sejtmag osztódási folyamataira, és sikeresen használható olyan esetekben, amikor orvosi vagy más okokból a sejtosztódást, illetve sejtszaporodást lassítani vagy gátolni kell. Az alábbi példákban, amelyek az eljárás végrehajtását szemléltetik, a találmány oltalmi körét azonban semmiképpen sem korlátozzák, a hőmérsékleteket Celsius-fokokban adjuk meg. Az olvadás-, illetve bomláspontokat Kofler-blokkon határoztuk meg. 1. példa: 4'-Demetil-epipodofillotoxin 2 g 4'-demetil-podofillotoxint feloldunk 25 ml acetonban és 15 ml vízben, és 5 ml tömény sósav hozzáadása után 2 óra hosszat visszafolyató hűtő alatt melegítjük. Ezután a savat szilárd báriumkarbonáttal közömbösítjük, szűrünk, és a szűredéket vákuumban 340°-on megszabadítjuk az acetontól. A kivált anyagot felvesszük 5% acetont tartalmazó kloroformba, az oldatot nátriumszulfát fölött megszárítjuk, és vákuumban bepároljuk. A kapott maradványt kovasavgélen 1% metanolt tartalmazó kloroformmal kromatografáljuk, amikor is előbb kis mennyiségű szennyezést, majd tiszta 4'-demetil-epipodofillotoxint és végül átalakulatlan kiindulási anyagot kapunk. A 4'-demetil-epipodofillotoxin tiszta frakcióit kloroformból és metanolból kristályosítjuk ki. Olvadáspontja 22i8—i230°, [a]D = ©9,8°, (c = 0,630 kloroformban). 2. példa: 4'-Karbobenzoxi-4'-demetil-epipodofillotoxin 5 60 g finoman porított 4'-demetil-epipodofillotoxint 1000 ml vízmentes etilénkloridban szuszpendálunk, és 19 ml vízmentes piridin hozzáadása után —i!0°-ra hűtjük. Keverés és a nedvesség kizárása közben —10°-on 2,5 óra alatt hozzá-10 csepegtetjük 34 g klórhangyasav-benzilészternek 100 ml etilénkloriddal készült oldatát, majd további fél óra hosszat reagálni hagyjuk. Ezután a reakciókeveréket vízzel mossuk, a szerves fázist nátriumszulífát fölött megszárítjuk, vá-15 kuumban bepároljuk, és a maradványt nagyvákuumban 70—80°-on megszárítjuk. A nyersterméket aceton és éter elegyéből, majd kétszer metanolból átkristályosítva 4'-karbobenzoxi-4'-demetil-epipodofillotoxint kapunk, 117—119°/202— 20 205° kettős olvadásponttal. Nagyvákuumban előbb 95—110°-on, majd 130°-on szárítva vagy aceton és éter elegyéből kikristályosítva az oldószermentes alakot kapjuk 202—204° olvadásponttal. [a]21 D = —43,9° (c= 0,535) kloroform-25 ban. 3. példa: Tetra-0-acetil-4'-karbobenzoxi-4'-demetil-epi-30 podofillotoxin-/3-D-glukozid 26,8 g 4'-karbobenzoxi-4'-demetil-epipodofillotoxint melegítés közben feloldunk 70 ml etilénkloridban. Az oldatot 15°-ra hűtjük, és keverés 3g közben 26,0 g 2,3,4,6-tetra-0-acetil-/?-D-glukózt adunk hozzá. Amint a tetraacetil-/?-D-glukóz zöme feloldódott, nedvesség kizárásával gyorsan —ill il!2°-ra hűtjük a keveréket. Nem törődve a kevés fel nem oldott kiindulási anyaggal, 4f) —10 12° belső hőmérsékleten 10 perc alatt hozzácsepegtetjük bórtrifluorid-etiléterátnak (48% bórtrifluorid) —10°-ra előhűtött 17,5 ml mennyiségét, majd még 40 percig keverjük —10°-on. Ezután hűtés és keverés közben 17,5 ml vízmentes piridint és 35 ml etilénkloridot csepegtetünk a reakciókeverékhez, és további 200 ml etilénklorid hozzáadása után négyszer 100—100 ml vízzel kirázzuk. A szerves fázist nátriumszulfáton megszárítjuk, vákuumban bepároljuk, és a maradványt nagyvákuumban 70°-on megszárítjuk. A nyersterméket 125 ml forró etanolban oldjuk, keverés közben 375 ml vizet adunk hozzá, és külső jeges vízzel hűtve addig keverjük, amíg a kezdetben kenőcsszerű és csomós csapadék homokszerű porrá nem ala^ kul át. Ezután a csapadékot szívószűrőre viszszük, etanol és víz 1 : 3 arányú elegyével mossuk, és nagyvákuumban 70°-on megszárítjuk. Ezt a nyersterméket feloldjuk 300 ml forró metanolban, leszűrjük a kevés feloldatlan pehely-6° ről, és a szűredéket vákuumban bepároljuk. A maradványt nagyvákuumban 70°-on megszárítva tetra-0-acetil-4'-karbobenzoxi-4'-demetil-epipodofillotoxin-/3-D-glukozidot kapunk fehér hab alakjában. [a]20 D = —41,7° (kloroformban). «5 A terméket további tisztítása céljából benzol és 4
