155377. lajstromszámú szabadalom • Eljárás glukozidok előállítására
155377 30 ml acetonnal kezeljük, majd nagyvákuumban 75°-on két óra hosszat szárítjuk. A 4'-karbdbenzoxi-4'-demetil-epipodofillotoxin-/?-D-glukozidot és 4'-demetil-epipodofillo- 5 toxin-^/S-D-glukozidot tartalmazó keverékből me- • tanolból való kikristályosítással nem egészen tiszta alakiban 4'-karbobenzoxi-4'-'demetil-epipodofülotoxin-/?~D-glukozid nyerhető. A terméket, kb. 100-szoros mennyiségű kovasavgélen xo kromatografálva 9 : 1 arányú izopropilacetát-metanol eleggyel (vízzel telített) eluálva tiszta á'-karbobenzoxi-é'-demetil-epipodofinotoxin-/?-D-glukozidot kapunk. A termák acetonból átkristályosítva 155—156° -on olvad. [a]alD = 15 = —92,0° (c=l,00) kloroformban. A karbobenzoxi csoport lehasítására 4'-karbobenzoxd-4'-demetil-epipodofillotoxin-yS-D-glukozid és 4'-demetil-epipodofillotoxin-^-D-glukozid keverékét 200 ml acetonban oldjuk, az oldatot hozzá- 20 adjuk 3 g palládiumszénnek (10% palládium) 50 ml vízzel készült szuszpenziójához, és a védőcsoport lehasadásának befejeztéig (1,5 óra) hidrogénezünk. A reakciót vékonyréteges kromatogrammoh a fent ismertetett módon ellen- 25 őrizzük. Ezután a katalizátort kiszűrjük, 100 ml 4 : 1 arányú aceton-víz eleggyel mossuk, és a szűredéket vákuumban kb. 40—45 ml-re sűrítjük, miközben a 4'-demetil-epipodafillotoxin-/?-D-glukozid kikristályosodik. A kristályoso- 30 dás tökéletessé tételére még 20 percig jégfürdőben állni hagyjuk, a kivált kristályokat leszívatjuk, 25 ml vízzel mossuk, és nagyvákuumban 70°-on megszárítjuk. Metanolból kikristályosítva tiszta 4'-demetil-epipodofillotoxin-/?-D- 35 -glukozidot kapunk 225—227° olvadásponttal. [G]21 D == — 38,6° (c=l,05) metanolban. Egy másik módosulatnak 262—264° az olvadáspontja. 40 7. példa: 4'-Demetil-epipodofillotoxin-^-D-glukozid. Az 5. példa szerint előállított tetra-O-aeetil- 45 ~4'-demetil-epipodafillotoxin-/?-D-glukozidból 2,0 g-ot és 1 g vízmentes cinkacetátot 30 ml vízmentes metanolban 25 óra hosszat visszafolyató hűtő alatt melegítünk. Ezután a keletkezett fehér csapadékot néhány ml jégecet hoz- 50 záadásával és az oldat enyhe melegítésével oldatba visszük, az oldószert vákuumban 40°-oii eltávolítjuk, és a maradványt 50 ml 4 :1 arányú kloroform-butanol elegybe felvesszük. A szerves fázist kétszer 10—10 ml vízzel mossuk, 55 nátriumszulfát fölött való megszárítás után vákuumban bepároljük, és a maradványt kovasavgélen kromatografáljuk. 9 :1 arányú (vízzel telített) izopropilacetát-metanol elegy előbb az apoláris alkotórészeket, majd tiszta 4'-demetil- 60 -epipodofillotoxin-/?-D-glukozidot eluál. Az egyes frakciókat kovasavgéllemezeken vékonyréteges kromatogrammon izopropilacetát-metanol 8:1 arányú elegyével (vízzel telített) vizsgáljuk,' és a glukozidfrakciókat egyesítve két- 65 szer metanolból átkristályosítjuk. A 4'-demetil-epipodofilotoxin-/S-D-íglukozid 222^230 °-on olvad, egy másik módosulat pedig 262i—2640 -on. [a]21 D =J 88 0 (c = 0,507) metanolban. 8. példa: 4'j Demetil-epipodofillotoxin-/?-D-benzilidén-glukozid. 1 g szárított 4'-demetil-epipodofillotoxin-.|ö-D-glukozidot feloldunk 20 ml tiszta benzaldehidben, és 0,5 g vízmentes cinkklorid hozzáadása után nedvesség kizárásával 5—6 óra hosszat rázógépen rázatjuk. A reakció előrehaladását folyamatosan ellenőrizzük vékonyréteges kromatográfiával. Erre kovasavgéllemezek és eluálószerként >6% metanolt tartalmazó kloroform alkalmasak. Az anyagok láthatóvá tételére a lemezeket bepermetezzük cériumi(IV)ammóniumnitrátnak 50%-os kénsawal készült 1%-os oldatával, majd 100—120°-ra melegítjük. A kondenzációs termék feldolgozására a tiszta, vörösbarna reakcióoldathoz kloroformot adunk, és vízzel kirázzuk. A vizes fázist kétszer kloroformmal extraháljuk. Valamennyi kloroformos fázist egyesítünk, vízzel kétszer mossuk, nátriumszulfát fölött megszárítjuk, és az oldószert vákuumban elpárologtatjuk. A kapott olajos maradványt a még mindig rátapadó benzaldehid eltávolítására pentánnal eldörzsöljük, amíg porszerű terméket nem kapunk. További tisztításra a benzilidénszármazékot 10 ml acetonba felvesszük, és az acetonos oldatot keverés közben 100 ml pentánba csepegtetjük, amikor is világossárga vagy fehér csapadékot kapunk. A nyerstermék kovasavgéloszlopon Végzett kromatografálással is tisztítható. E célból 1 g nyers benzilidén-származéknak kloroform és 2% metanol elegyéből készült minél töményebb oldatát átboesátjuk 200 g kovasavgélt tartalmazó oszlopon, és ugyanazzal az oldószereleggyel eluál juk. A vékonyrétegkromatográfiailag egységes frakcióikat egyesítjük és aceton és pentán elegyéből újra kicsapjuk, A kapott 4'-demetil-epipodof i llctoxm-/?-D-benzilidénglukozid fehér por 182—185° olvadásponttal. Vízmentes etanolból átkristályosítva 245—246°-on olvadó kristályokat kapunk. [ÖL]20 D = —99° metanolban és —104° kloroformban. 9. példa: 4'-Demetil-epipodofillotoxin-!/5-D-tenilidén-glukozid. 0,5 g szárított 4'-demetil-epipodofillotoxin-:/ 8--D-glukozidhoz 10 ml tiszta tiofén-2-aldehidet és 0,25 g vízmentes cinkkloridot adunk, és a keveréket nedvesség kizárásával 20°-on géppel rázatjuk, mire fokozatosan víztiszta oldat keletkezik. A kondenzáció előrehaladását a fent leírt módon vékonyréteges kromatográfiával kö-4
