155245. lajstromszámú szabadalom • Eljárás Helvetikozid és Korchorozid A előállítására

155245 fázisból Korühorosád A-t kapunk. Ha a glikozidok szelektív extrakiciójához benzol-aceton-«elegyet alkalmazunk, akkor az ellenáramú extrakció helyett a glikozidofoait alumíniuimoxiddal töltött oszlopon elválasztjuk, az eiu- 5 áláshoz pedig acetonnmetlanol-elegyet alkalmazunk. Az oldószerek lepárlását, a glikozidok szűrését és szárításét kristályosítás után mindenkor semleges gázatmoszférában végezzük az anyag 10 autooxidációjának elkerülése végett. A találmány szerinti eljárásnál igen előnyös az, hogy nem zsírtalanított magvakat alkalmazunk, amelyek 35 C°-on erjeszthetők. így a műveleti időtartaim jelentékenyen csökkenthető, 15 a hozam pedig növekszik. Előnyösnek bizonyult továbbá 100%-os metanol használata is, mivel ez csak a gliikozidokat, a zsírokat pedig egyáltalában nem extralháljia, miimellett jelentéktelen mennyiségű szennyezések: is oldatba 20 mennék. A találmány szerinti eljárás előnyeihez tartozik az is, hogy a Helvetikosidot és Korahorosid A-t benzol-aeeton eleggyel szelektív módon lelhet extralhálni, valamint a glikozidofcat metanol-jvíz-etilacetát-benzol oldószer- 25 rendszerrel ellenáramú elválasztásnak lelhet alávetni. Ezt az oldószer-rendszert egyébként különböző' polairiitású glikozidok elválasztásánál is alkalmazni lehet, amikoris a víz és etilsacetát tartalmat megfelelően változtatjuk. 30 A Helvetifcosid és KorchoTOsid A előállítására felihasznált oldószer-rendszer 0,5 : 4,5 : 4 : 1 egymás közötti komponens aránya bizonyult a legmegf elelőbbnek. A találmány szerinti eljárás előnyeihez tar- 35 tozik továbbá az is, bogy »ceton-meíanol elegy szelektív eluálószerként váló használata esetén minidkét glikozidot egy akumíniumoxiddal töltött oszlopon lehet elválasztani. 40 A találmány szerinti eljárás különböző változataitól függően a légszáraz nyersanyagra számítottt hozam 0,218—0,2l9% Helvetifcosid és '0,155%~4),r760/o Kordhorosid A. 45 A végtermék tisztaságát oxidon végzett véfconyréteges kromatografálással (J. Zurkowska, A. Oziarowstoi: Planta Med. 121/11964/2)22) határoztuk meg. A kvantitatív meghatározást pedig itatóspapíron Való előzetes elválasztás után 56 kloirknétriásan végezzük. Mindkét kiromatografálási módszernél az eluáló fázisban benzol-etilacetátMhiangyasawamid-elegyet (J. Zurkowsfca, A. Ozarowsifci: Acta Pol. Pharm. 2:2í(l'9!65)iNr 2 használtunk fel. 55 1. példa: ""' 100 g Erysiuni perofskianum magvakat 100 ml vízzel nedvesítünk, és termosztátban 35 C°- 60 on 3 napos erjesztésnek vetjük alá. Ezután a magvakat négyszer 1000—1000 ml metanollal extralhéljulk, végül a keveréket 214 óra hosszat időközbeni átfceverés mellett állni hagyjuk. Az egyesített metanolos kivonatokat 45 C°-ig ter- 65 jedő hőmérsékleten ösö'kbentett nyomáson lepároljuk', végül a desztilláció során 100 ml vizet beadagolunk és a metanol maradékát eltávolítjuk. A kb. 200 ml térfogatú vizes maradékot tisztítás céljából háromszor 100—11100 ml benzollal vagy sziéntetrakloriddal kirázzuk. A tisztított vizes maradékhoz először 0,5 g magnéziumoxidöt adunk, és a keveréket 6,5—7,0 pH-éirték eléréséig állni hagyjuk. Ezután 30 g nátriumkloridot adagolunk, majd ötször 100— 1010 ml etilaoetáttal exíüraháiunk. Az 500 g össztérfogatú, összes glikozidot tartalmazó egyesített etüacetlátos kivonatokat vízmentes nátriumszulfáton megszárítjuk, majd szűrjük és az oldószert Itedesztilláljuk. A kapott száraz maradékot 50 ml 0,5 :4,5 arányú metanol-vízMelegyben oldjuk és ellentáramú elválasztásnak vetjük alá, amelynél 0,5 : 4,5 : 1 metanol-víz-ietilaicetát-benzol elegyet alkalmazunk. Az egyesített felső fázisokból az oldószer lepárlása után sziruipszerű maradékot nyerünk, amelyet 4 ml víz 'hozzáadássá után kristályosodásra félreteszünk. A hozam 0,29% Helve tikosid. Az egyesített 1500 ml össztérfogatú alsó fázisokból a metanolt ledesztiilláljuk, a kb. 1800 ml vizes maradékhoz 65 g nátriumkloridot adunk. A nátriumkíorid hozzáadása után 2 :1 arányú benzol-aceton eleggyel hároimszoir extrahálunk. Az oldószer ledesztillálása után nyert száraz maradék tiszta Kordhorosid A. Hozam: 0,1155%. 2. példa: Az 1. példa szerint járunk el és a 200 ml tisztított vizes maradékhoz 0,5 g magnéziumoxidat adunk. A keveréket 6,6—7,0 pH-érték eléréséig állni hagyjuk, majd a kerverékben 10 g nátriumkloridot oldunk. Ezután a glikozidokiat 2. : 1 blenzol-aeeton-eleggyel szelektív módon extraháljiuk, amikoris kétszer 600—600 ml, egyszer pedig 300 ml óldÓBzerelegyet alkialmazunk. Ilyenkor a Helvetikosid és Korahorosid A keverék a szerves fázisba megy át, míg a vizes fázisba a pölárosaibb jellegű mellékgliko'zidók maradnak. A benzol-acetonos^kivonatot vízmentes nátriumszulfáton megszárítjuk, szűrjük és a szűrletből az oldószert 45 C-ig terjedő hőmérsékleten csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A kapott száraz maradékot 100 ml acetonban oldjuk, majid az oldatot 20 g alumíniúmoxiddal töltött oszlopra öntjük, végül a glikozidokiat 92 : 8 aceton-metanol elegygyel eluáljuk. Ekkor az alábbi frakciót nyerjük: 50 ml I. frakció, kizárólag Korchorosid A-t tartalmaz, kb. 1150 ml II. frafcció, Korahorosid A és Helvetikosid keveréke, 2150'—300 ml III. frakció, kizárólag Helvetikosidot tartalmaz. A III. frakció a felső fázisok feldolgozására az 1. példa szerint leírt módon kezeljük, amikoris tiszta Helvetikosidot nyerünk. Az oldószer lepárlása után a II. frakcióból száraz maradékot nyerünk, amelyet 10 ml 2