155202. lajstromszámú szabadalom • Eljárás mikoheptin előállítására

3 155202 Ohio 1064" követelményeinek (megfelelően a kővetkező. A törzs szintetikus táptalajon általában mérsékelten nő, komplex táptalajon a növekedés gyorsabb és erőteljesebb. A közepes és jó növekedést biztosító táptalajok esetében a vegetatív micélium a flavus-brunus-ruber szincsoportba, a légmicélium a cinnarnomeus szincsoportba tartozik. A spórafelüllet elektronmikroszkóposán sima, a spóratartók típusa verticillatus és biverticillatus rectus-Keményitő-agar: légmioélium ,,Red-series, 5 eb", szubsztrátmieélium „Yellow, Co 88". oldódó pigment barna. 3—4% rectus flexibilis, 25—30% vertícillatus rectus és 65—70% biverticillatus rectus. A rectus részben retinaculum jellegű. Gliceiin-aszparagin-agar: a légmioélium nem értékelhető, a szubsztrátmicélium „Yellow, Oc 100", világos vörösesbarna. A spórázás gyenge, nem értékelhető. Burgonya^agar: gyengén fejlett, porszerű, fehéresszürke légmioélium. Fejlett, pontszerű, sötétbarna szubsztrátmicélium. Intenzív barna oldódó pigment-Gauze-féle keményitő-agar: fejlett, porszerű, rózsaszín légmicélium. Szintelen, pontszerű, közepesen fejlett szubsztrátmicélium. Oldódó pigment nincs. Nutrient ^agar: gyenge, porszerű, szürkésvörös légmicélium, erősen fejlett, pontszerű, barna szubsztrátmioélium, sötétbarna oldódó pigment. Jensen-féle kazein-agar: légmiieélium nincs, szubsztrátmicélium nyomokban, oldódó pigment nincs. Szaoharóz-nitrát-agar: fejlődés nincs. Szintetikus-agar: fejlett, porszerű, szürkésvörös légmicélium, fejlett, pontszerű barna, majd feketedő szubsztrátmicélium, sötétbarna oldódó pigment. Glukóz-aszparagin-agar: gyenge, porszerű, fehéresszürke légmicélium, fejlett, pontszerű, világosbarna szubsztrátmicélium, világossárga oldódó pigment. Triipton-élesztőkivonat-agar: légmicélium nincs szubsztrátmicélium gyenge, színtelen, pontszerű, oldódó pigment nincs. Zabpehely-agar: közepesen fejlett, szürkésvörös, porszerű légmicélium, pontszerű, fejlett, vörösesbarna szubsztrátmicélium, világosbarna oldódó pigment. Króímogenitásprólba vaspepton-agaron: pozitív. Nitrát-redukció: negatív. C-forrás-hasznosítási spektrum: (— = növekedés és értékesítés nincs; + = növekedés nyomokban; += gyenge, + -f- = közepes és + + + = erőteljes fejlődés ill. basz-5 nösítás). D-glukóz (poz. íkontr.): + + +; C-nélkül (neg. kontr.): —; 1-ar-abinóz: —; d-fruktóz: —; d-mannit: —; raffinóz: —; ramnóz: —; szacharóz: —; d-galaktóz: -\—j-; inulin: —; dulcit: —; szalicin: —; d-szorbit: —; 10 lak'tóz: —; mozit: -)—(-+; d-xilóz: —; trehalóz: 4-; melibióz: —. Rendszertani helyzet: a fenti adatok, különösen figyefembe véve elsősorban a spórafelü-15 letet, a légmicélium színét, a spóratartók típusát és a ímelanin-termelést, egybevetve Hütter 1962-ben (Arcíh. Mikrobiol. 43, 385), továbbá 1964-Jben (Zbl. Bakteriol. Őrig. II. 117, 603) közzétett és az örvös streptomicéták rendsze-20 rezesére vonatkozó publikációival arra utalnak, hogy a K 456 jelzésű törzs a Straptomyces griseocarneus fajjal azonosítható. A Streptomyces griseocarneus-szal .kapcsolatiban többek között streptomicin, hidroxi-strep-25 tomicin és rotaventin termelését írták le (Waksman-Leohevalier „The Actinomyeetes" Vol. III. pp. 32, 2®6, 360, Baltimore, 1982), de heptíaén-amtibiotikuni termelése e törzzsel kapcsolatban mindeddig nem volt ismert. £0 A fermentáció befejezése után a szűrt rnicéliuimot a nem aromás heptaénekre kidolgozott eljárások bármelyikével feldolgozhatjuk. A feldolgozási eljárások lényege, hogy a savas közegben micéliurrihoz kötődő antibiotikumot a Z5 férmentlé szűrése után aoetonnal, metanollal, kalciumklorid-tartalmú 'metanollal, normálvagy izopropanollal, normál- .vagy izobutanóllal semleges közegben leoldjuk, az extra'ktumot szűrjük, és a szűrletből az oldószer ledesztillá-40 lása után kivált hatóanyagot elkülönítjük. A hatóanyag mellől afosz. etanollal vagy kalciumkloridot tartalmazó 'metanollal kioldjuk a heptaén mellett termelődött anyagot vagy anyagokat. 45 A kapott mikoheptin sárgásbarna amorf. por. Ultraibolya elnyelési színiképének fő maximumai 364, 383 és 403 mu-nál vannak metanolban, hasonlóan a mikoheptin ízolálásako<r kapott értékekihez [E. Borowsky és munkatársai: 50 Antibiiotiiki 10, 778 (1965)]. Az antibiotikum savas hidrolizátumáiban kimutatható a mikózamin; lúgos hidrolízise nem vezet aromás amino-származékíhoz, tehát a K 456 törzs által termelt haptaén antibiotikum, hasonlóan a 55 mikoheptinlhez [lásd Borowsky és munkatársai: Antibiotiki 10, 776 (1965)], a nem aromás heptaénefe csoportjába tartozik. Papírkroimatográfias vizsgálataink során számos oldószer-rendszerben a K 456 jelű Strepto-60 myces törzs fermentátumából izolált antibiotikum és az autentikus mikoheptin teljesen azonos R/ értéket adott. A heptaén .antibiotikumok azonosítására legjobban bevált metanol : : ammónia : víz ' (20 : 1 : 4) rendszerben mindfi5 két antibiotikum R/ értéke 0,55. a