154657. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új ACTH-hatású peptidek előállítására

154657 mek nehezen oldódó sói, mint foszfátjai és pirofoszfátjai, valamint e fémek hidroxidjai. Elnyújtott hatású származékokat képző szerves anyagokként pl. a nem-antigén hatású zselatinok, mint az oxipolizselatinok, a polivinilpirrolidon és a karboximetilcellulóz, továbbá az alginsav szulfonsav- vagy foszforsavészterei, a dextrin, polifenolok és polialkoholok hasonló származékai, elsősorban a polifloretin-foszfát és a fitinsav, továbbá az aminosavak polimerizátumai és kopolimerizátumai, pl. a protamin és elsősorban a túlnyomórészt savas a-aminosavakból, mint glutaminsavból vagy aszparaginsavból felépülő aminosav-polimerizátumok, ül. -kopolimerizátumok szerepelhetnek. Ezek az új vegyületek, amint már említettük, a megfelelő, de az első aminosavban L-konfigurációt mutató vegyületeknél jóval erősebb ACTH-aktivitással rendelkeznek. Így ezek a termékek pl. a természetes hormon helyett alkalmazhatók az ember- és állatgyógyászatban. Ezek az új peptidek a nagy lánchosszúságú peptidek előállítására ismert módszerekkel állíthatók elő, D-szerin N-terminális aminosavként való alkalmazásával. A szintézis során az aminosavakat egyenként vagy kisebb peptid-egységek előzetes képzése után kapcsolhatjuk öszsze a fent megadott sorrendben. A találmány szerinti eljárást tehát az jellemzi, hogy D-szeril-L-tirozil-L-szerü-L-metionü-L-glutamil-L-ihisztidil-L-fenilalanil-L-arginü-L-triptofil-glicil-L-lizil-L-prolil-L-valil-glicil-L-lizil-L-lizil-L-lizil-L-lizinből Vagy a megfelelő, de a glutamil-csoport helyett a glutamin maradékát tartalmazó vegyületből, amelyekben legalább az a-aminocsoport és az oldalláncbeli aminocsoportok, valamint a terminális karboxilcsoport és az esetleg jelenlevő oldalláncbeli karboxilcsoport védett alakban van jelen, a védőcsoportokat lehasítjuk és kívánt esetben az így kapott vegyületet savval képezett addíciós sóvá vagy valamely származékká, ül. komplex-termékké alakítjuk át. Az aminosavak és/vagy ; peptidegységek kapcsolása oly módon történik, hogy egy védett a-aminocsoportot és aktivált terminális karboxilcsoportot tartalmazó aminosavat, ill. pepiidet egy szabad a-aminocsoportot és szabad vagy védett, pl. észterezett vagy amidált terminális karboxilcsoportot tartalmazó aminosavval vagy pepiiddel reagáltatunk, vagy pedig egy aktivált -aminocsoportot és védett terminális karboxilcsoportot tartalmazó aminosavat vagy peptidet egy szabad terminális karboxilcsoportot és védett a-aminocsoportot tartalmazó aminosavval vagy pepiiddel reagáltatunk. A karboxilcsoport pl. valamely savhalogeniddé, -aziddá, -anhidriddé, -imidazoliddá, izoxazoliddá vagy aktivált észterré, mint ciánmetilészterré, karboximetilészterré vagy p-nitrofenilészterré Való átalakítás útján, vagy pedig valamely karbodiimid (adott esetben N-hidroxi-szukcinimid hozzáadásával) vagy N,N'-karbonü-diimidazol segítségével aktiválható, az aminocsoport aktiválása pl. valamely foszfátamiddal való reagáltatás útján történhet. A leghasználatosabb módszerként a karbodiimid-módszer, az azid-módszer, az aktivált észterek módszere és az , anhidrid-módszer említhető. Kiemelendő az ún. 5 szilárd-Jhordozós szintézis is, amelynek során a peptidet az észterszerűen egy polimerhez kötött karboxil-végből kiindulva építik fel, az egyes aminosavak sorjában történő rákondenzálása útján. 10 A reakcióban részt nem vevő szabad funkcionális csoportokat célszerűen védjük, különösen oly csoportokkal, amelyek hidrolízis vagy redukció útján könnyen lehasíthatok; a karboxil!5 csoportok előnyösen pl. metanollal, terc.butanollal, benzilalkohollal, p-nitrobenzilalkohollal való észterezés vagy amidképzés útján védhetők, míg az aminocsoport pl. tozil-, tritil-, formil-, trifluoracetil-, o-nitrofenüszulfenü-, ftalil- vagy 20 karbobenzoxi-csoport, vagy valamely színes védőcsoport, mint p-fenilazo-benzilkarbonü- vagy p-(p'-metoxi^fenilazo)-benzüoxikaribonil^esoport, különösen pedig terc.butiloxikarbonil-csoport rávitele útján védhető. Az arginin guanidino-25 -csoportjában levő aminocsoport védelmére a nitrocsoport alkalmas; az arginin említett aminocsoportjának védelme azonban nem feltétlenül szükséges a reakció során. A hisztidin iminocsoportja benzil- vagy tritügyökkel védhető. 30 A védett amino- vagy imino-csoportnak a megfelelő szabad csoporttá, valamint a funkcionálisan módosított karboxilcsoportnak szabad karboxilcsoporttá való átalakítása az eljárás során önmagukban ismert módszerekkel, pl. 35 hidrolizáló, ül. redukáló hatású szerekkel való kezelés útján történhet. A találmány szerinti új peptid előállításának egy előnyös módja értelmében úgy járunk el, hogy az első három aminosavat tartalmazó H-40 -D-Ser-Tyr-Ser-OH tripeptidet (a fenti rövidített írásmód esetében az egyes aminosav-csoportokat képviselő jelek mindenkor az L-aminosavra vonatkoznak, ha csak a D- külön kitéve nincs) vagy az ezeken kívül még a negyedik 45 aminosavat is tartalmazó tetrapeptidet a következő aminosavakból felépülő heptapeptiddel, ül. hexapeptiddel az első tíz aminosavat tartalmazó szekvenciává kondenzáljuk, előnyösen azid-módszerrel, majd az így kapott dekapepti-50 det a 11—18. aminosavakból álló oktapeptidészterrel vagy oktapeptidamiddal kondenzáljuk. Ehhez a kondenzációhoz kapcsolási módszerként előnyösen a karbodiimid-módszert vagy az aktivált észterek módszerét, és pedig ez utóbbit 55 elsősorban a p-nitrofenilészter segítségével, alkalmazzuk. Ez utóbbi esetben a dekapeptid p-nitrofenilészterét nem kell elkülöníteni, hanem ez az észter a kondenzációs lépésben képezhető a szabad karboxilcsoportú dekapeptidből, p-6o -nitrofenü és diciklohexil-karbodiimid segítségével. A dekapeptid tehát az a-aminocsoportban . védett, szabad karboxilcsoportú vagy p-nitrofenüészter-csoportú peptid alakjában kerül reagáltatásra. A kondenzálandó peptid-részekben 65 jelenlevő oldalláncbeli aminocsoportokat előnyö-2