154656. lajstromszámú szabadalom • Eljárás ACTH-hatású peptidek előállítására

3 154656 4 sen e fémek nehezen oldódó sói, mint foszfátjai és pirofoszfátjai, valaamint e fémek hidroxidjai. Elnyújtott hatású származékokat képző szerves anyagokként pl. a nem-antigén hatású zselatinok, mint az oxipolizselatinok, a polivinilpirrolidon és a karboximetilcellulóz, továbbá az alginsav szulfon$av- vagy foszforsavészterei, a dextrin, polifenolok és polialköholok hasonló származékai, elsősorban a polifloretin-tfoszfát és a fitinsav, továbbá az aminosavak polimerizátumai és kopolimerizátumai, pl. a protamin és elsősorban a túlnyomórészt savas a-^aminosavakból, anint glutaminsavból vagy aszparaginsávból felépülő aminosavpoliimerizátumok ill. -kopolimerizátumok szerepelhetnek. Ezek a jelen találmány szerint előállítható új vegyületek, amint már említettük, a megfelelő, de az első aminosavban L-konf igurációt mutató ismert peptideknél jóval erősebb ACTH^aktivitással rendelkeznek. így ezek a termékek pl. a természetes adrenokortikotrop hormon helyett alkalmazhatók az ember- és állatgyógyászatban. Ezeket az új peptideket a nagy lánchosszúságú peptidek előállítására ismert módszerekkel állíthatjuk elő, a megfelelő D-aminosav N-terminális aminosavként való alkalmazásával. A szintézis során az aminosavakat egyenkint vagy kisebb peptid-egységek előzetes képzése után kapcsolhatjuk össze a fent megadott sorrendben felépülő tetrakozapaptiddé. A találmány szerinti eljárást tehát az jellemzi, hogy D-szeril-L-ti'rozil^L-szeril-L-metionil--L-glutaniil4L-hisztidil-LHfenilalanil-L-argmil-L-triptofil-glicil-L-lizil-L-propil-L-valdl-glicil-L-lizil-L-lizil-L-lizi'l-L-lizil-L-prolil-L-^valil-L-lizil-L-.V!aliUu-tirozil-L-prolintból vagy a megfelelő, de a glutatnil-csoport helyett a glutamin maradékát tartalmazó vegyületből, amelyekben legalább az a-a;mincsoport és az oldallánóbeli aminoesoportok, valamint a terminális karboxilcsoport és az esetleg jelenlevő oldallánóbeli karboxil-<5soport védett alakiban van jelen, a védőcsoportokat leihasítjuk és kívánt esetben az így kapott vegyületet savval képzett addíciós sóvá vagy valamely származékká, ill. komplex-termékké alakítjuk át. Az aminosavak és/vagy peptidegységek kapcsolása oly módon történik, hogy a védett a-amdnocsoportot és aktivált terminális karboxüesoportot tartalmazó aminosavat ill. pepiidet egy szabad a-aminocsoportot és szabad vagy védett, pl. észterezett vagy amidált terminális karboxilesoportot tartalmazó aminosavval vagy peptíddel reagáltatunk, vagy pedig egy aktivált ö-aiminocsoportot és védett terminális karboxilcsoportot tartalmazó aminosavat vagy peptidet egy szabad terminális karfooxilcsoportot és védett a^iminocsoportot tartalmazó aminosavval vagy peptiddel reagáltatunk. A katrboxilcsoport pl. valamely savhalogeniddé, -aziddá, -anhidriddé, -imidazoliddá, -izoxazoliddá vagy aktivált észterré, mint itiánmetilészterré, karboxinietilészterré vagy p-nitrofenilészterré való átalakítása útján, vagy pedig valamely karbodiimid (adott esetben N-hidroxid-szukoinimid hozzáadásával) vagy N,N'-karbonil-diimidazol segítségével aktiválható az amiriocsöport aktiválása pl. valamely tfoszfátamiddal való reagáltatás út'5 ján történhet. Az e célra .alkalmas módszerek közül elsősorban a karbodümid-módszer, az azid-módszer, az aktivált észterek módszere és az anhidrid-módszer alkalmazható előnyösen e találmány szerinti eljárásban. Megemlíthető, az 10 ilyen kapcsolási módszerek sorában az ún. szilárd-hordozós szintézis is, amelynek során a peptidet az észterszerűen egy polimerhez kötött 'karboxil-végből kiindulva építik fel, az egyes aminosavak sorjában történő rákondenzálása út-15 ján. A reakcióban részt nem vevő szabad f unkcicmális csoportokat célszerűen valamely védőcsoport felvitele útján védjük; e célra különösen 20 oly csoportok alkalmasak, amelyek hidrolízis vagy redukció útján könnyen lehasíthatok. A karlboxilcsoportok előnyösen pl. metanollal, tere.butanollal, benzilalkohollal, p-nitrobenzilalkohollal való észterezés vagy amidképzés útján 25 védhetők, míg az aminoesoportok pl. tozil-, tritil-, formil-, trifluoracetil-, o-nitrofenil-, szulfenil-, ftalil- vagy karbobenzoxi-csoport, vagy valamely színes védőcsoport, mint p-fenilazo-benziloxikarbonil- vagy pn(p'-metoxi-fenilazo)-'ben-30 ziloxikarbonilncsoport, különösen pedig terc.butiloxikarbonil-csoport rávitele útján védhető. Az argdnin guanidino-csoportjáfoan levő aminocsoport védelmére a nitrocsoport alkalmas; az arginin említett aminoesoportjának védelme azon£5 ban nem feltétlenül szükséges a reakció során. A hisztidin iminoesoportja benzil- vagy tritil— gyökkel védhető. A védett amino- vagy imino-csoportnak a megfelelő szabad csoporttá, valamint a funkcio-40 nálisan módosított karboxil-esoportnak szabad karboxilcsoporttá való átalakítása az eljárás sórés szintén önmagukban ismert módszerekkel, pl. hidrolizáló ill. redukáló hatású szerekkel való kezelés útján történhet. 45 A találmány szerinti új peptid előállításának egy előnyös módja értelmében úgy járunk el, hogy a három első aminosaivat tartalmazó H-D-Ser-Tyr^Ser^OH tripeptidet i(a fenti rövidített írásimód esetében az egyes aminosav-csoportokat 50 képviselő jelek mindenkor a megfelelő L-aminosavra vonatkoznak, ha csak a „D-" megjelölés külön kitéve nincs) vagy az ezeken kívül még a negyedik aminosavat is tartalmazó tetrapeptídet a szekvenciában ezek után következő 55 aminosavakból felépülő heptapeptiddel ill. hexapeptiddel az első tíz aminosavat tartalmazó dekaipeptiddé kondenzáljuk, előnyösen az azidos kapcsolási módszerrel, majd az így kapott dekapeptidet a 11—24. aminosavakból álló tetradeka-60 peptidészterrel vagy tet:rad'ekapeptidaítnid.dal kondenzáljuk. Ehhez a kondenzációhoz kapcsolási módszerként előnyösen a karbodiimid-módszert vagy az aktivált észterek módszerét, és pedig ez utóbbit 65 elsősoriban a p-nitrofenilészter segítségével, al-2