154485. lajstromszámú szabadalom • Eljárás rákellenes hatású szer előállítására

154485 11 12 9. példa: szupernatáns folyadékot (5) elkülönítjük és a csapadékot {6) ismét feloldjuk 50 ml vízben, nátriumkarbonát hozzáadásával. Az oldatot azután sósavval ismét 2 pH-értékre savanyítjuk 5 és centrifugálunk. A szupernatáns folyadékot kiselejtezzük >(7), az elkülönített csapadékot (8) pedig etanollal és acetonnal mossuk, majd 20 ml vízben oldjuk, a pH-érték szódával 7-re történő állítása mellett. Az oldatot végül lio-10 filizáljuk. Ily módon 0,8 g száraz anyagot kapunk. Ez a termék egerenként 1 mg adagban a tumor teljes nekrozisát eredményezi, mind a 20 kezelt állatnál, amelyek közül azonban vé-15 gülis csak 5 állat mutat teljes gyógyulást. A (2) fenolos fázisból 4 tf. etanol hozzáadásával kicsapjuk a hatóanyagot. A csapadékot etanollal és acetonnal mossuk, majd megszárítjuk. 20 Az így kapott szer egerenként 1 mg adagban v alkalmazva, mind a 22 kezelt egéren a tumor nekrozisát eredményezte; az egerek közül 10 végülis teljeSen meggyógyult. A 2. példa szerinti módon kapott (1) szupernatáns folyadék 500 ml-jét 500 ml 90%-os fenollal elegyítjük. Az elegyet 4 C° hőmérsékleten 1 óra hosszat élénken keverjük, majd 50Q0 g-nek megfelelő fordulatszámmal 30 percig centrifugáljuk. A vizes és fenolos fázisokat elkülönítjük egymástól. A vizes fázist sósavval 2 pH-értékre savanyítjuk. A képződött csapadékot centrifugálással elkülönítjük, etanollal és acetonnal öblítjük, majd megszárítjuk. Ily módon 1,8 g száraz anyagot kapunk. E termiek egerenként 2 mg adagban a kezelt 20 egér közül csak 12-nél eredményezte a tumor nekrozisát, végleges gyógyulást pedig csak 5 egérnél tapasztaltunk. A fenolos fázishoz nátriumacetátot adunk 1%-os koncentrációban, majd 4 tf. etanolt adunk az elegyhez. A képződött csapadékot centrifugáljuk, etanollal és acetonnal öblítjük, majd megszárítjuk. Ily módon 8,4 g száraz anyagot kapunk. Ez a termék egerenként 1 mg adagban mind a 20 kezelt állatnál a tumor nekrozisát eredményezi; 12 állat végül is teljesen meggyógyult. A termék elemzési adatai: nukleinsav 7,9%, fehérjék 84 %. 10. példa: A 2. példa szerint kapott 100 g nedves természetes baktériumsejthez 1000 ml frissen desztillált 90%-os fenolt adunk, majd 10 C° hőmérsékleten 1 óra hosszat keverjük, azután centrifugáljuk a keveréket. A fenolos réteget ennek során elkülönítjük. 100 ml fenolos oldathoz 1% nátriumacetátot, majd 4 tf. 96%-os etanolt adunk. A képződött csapadékot centrifugáljuk, majd etanollal és acetonnal öblítjük, végül megszárítjuk. Ily módon 3,2 g száraz anyagot kapunk. E termék egerenként 2 mg adagban mind a 20 kezelt állatnál a tumor nekrozisát eredményezte; 9 állat végül is teljesen meggyógyult. 11. példa: A 2. példa szerinti módon kapott 500 g nedves baktériumsejtet 1000 ml vízzel hígítunk és 1000 ml 90%-os fenollal elegyítjük. Az elegyet 4 C° hőmérsékleten 1 óra hosszat keverjük, majd 5000 g-nek megfelelő fordulatszámmal 30 percig centrifugáljuk. A vizes <l}-és a fenolos (2) fázist elkülönítjük egymástól. A vizes fázishoz 1% nátriumacetátot, majd 2 tf. etanolt adunk. Az elegyet centrifugáljuk és a szupernatáns folyadékot (3) kiselejtezzük. A csapadékot >(4). 50 ml vízben oldjuk, miközben a pH-értéket nátriumkarbonát hozzáadásával 7-re állítjuk. A kapott oldatot sósavval ,2 pH-értékre savanyítjuk, majd centrifugáljuk. A .12. példa: 10 g liofilizált baktériumsejtet 100 ml vízzel hígítunk. 100 mg lizozim hozzáadása után az elegyet 37 C° hőmérsékleten 3 óra hosszat folytosan keverjük, ezáltal teljes homogenitást érünk el. Az elegyet 1000 g-nek megfelelő fordulatszámmal 1 óra hosszat centrifugáljuk. A szupernatáns folyadékot (l) elkülönítjük és liofilizáljuk. Az így kapott termék egerenként 2 mg adagokban alkalmazva, a kezelt 20 egér közül 17-nél a tumor nekrozisát eredményezte. A centrifugálás során kapott csapadékot i(2) vízben ismét feloldjuk; az oldáshoz használt vizet sósavval 2 pH-értékre savanyítjuk, majd az oldathoz 100 mg pepszint adunk. Az elegyet 2 óra hosszat 37 C° hőmérsékleten tartjuk, majd centrifugáljuk. A szupernatáns folyadékot (3) kiselejtezzük. A csapadékot (4) feloldjuk . 7 pH-értékre semlegesített vízben. Üjbóli centrifugálás után a csapadékot (5) kiselejtezzük, a szupernatáns folyadékot <(6) pedig liofilizáljuk. Ha ezt a készítményt egerenként 1 mg adagban beadjuk a tumorral fertőzött állatoknak, valamennyi kezelt egéren a tumor teljes nekrozisát tapasztaljuk. 13. példa: 4800 g nedves természetes Lactobacillus bulgaricus LB—51 baktériumsejtet 2000 ml tojásfehérje oldattal hígítunk, 'majd normál só oldatot adunk hozzá oly mennyiségben, hogy az elegy teljes térfogata 14 000 ml legyen. A kapott szuszpenziót 37 C° hőmérsékleten 3 óra hosszat folytonosan keverjük, majd az elegyét (1) sósavval 2 pH-értékre savanyítjuk. 1000 ml fenti (1) elegyhez 1 g pepszint adunk, az elegyet azután 37 C° hőmérsékleten 4 óra hosszat folytonosan keverjük. Ezután az elegy 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 6