154246. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1,2-dehidroszteroidok előállítására
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY Bejelentés napja: 1966. VIII. 26, (GO—992) Közzététel napja: 1967. VII. 22. Megjelent: 1968. V. 15. 154246 Szabadalmi osztály: 12 o 25 Nemzetközi osztály; C 07 c6 Decimái osztályozás: Feltalálók: Dr. Wix György orvos, 30%, Albrecht Károly gyógyszerész, 30%, Dr. Ambrus Gábor vegyészmérnök, 15%, Tömörkény Endre vegyész, 15%, Dr. Magyar Károly vegyész, 10%, Budapest 3 Tulajdonos: Gyógyszerkutató Intézet, Budapest Eljárás 1,2-dehidroszteroidok előállítására 1 A találmány tárgya eljárás zlx -es kettőskötés kialakítására mikrobiológiai úton szteránvázas vegyületekben. Számos mikroorganizmusról ismert, hogy a szteroiddal együtt inkubálva jó kitermeléssel eredményezi a megfelelő 1,2 dehidro-származékot. E mikroorganizmusok tenyésztése rendszerint költséges táptalajt igényel. Számos közülük csak igen hosszú inkubációs idő alatt dehidrogénez és akkor is csak alacsony kitermeléssel. Az ismert organizmusok gyakori hátránya az is, hogy az alkalmazott mikroorganizmus dehidrogénezö képessége huzamosabb idő elteltével leromlik, s ez a termelés folyamán állandó bizonytalansági faktorként jelentkezik. Általános jelenség, hogy az organizmus zl1 -dehidrogenáz-aktivitása gyenge, s ezért a fermentléhez csak alacsony, 200 jwg/ml koncentrációban-adagolható az átalakítandó szubsztrátum. Ez a tisAgj^végtermék elkülönítésekor sokszor csak fiiá^ni^rsparatív módszerekkel megoldható problémát jelérit. Az említett hátrányok kiküszöbölése érdekében végfett kísérleteink során azt találtuk, hogy az általunk „VB" jelzéssel ellátott mikroorganizmus, amelyet az OKI-ban 1966. aug. 19-én 32. törzsszám' alatt letétbe helyeztünk, képes a Al-es kettőskötés kialakítására különféle szteránvázas vegyületékben. A Z^-szteroid dehidro-10 15 20 25 30 genáz-aktivitással rendelkező ismert organizmusokhoz viszonyítva az általunk izolált baktérium különösen magas és évek óta állandónak bizonyult enzim aktivitásával tűnik ki. A VB jelű organizmus Gram-pozitív, kb. 1 mikron x 1,5-—3 mikron nagyságú, lekerekített végű pálca egyesével, esetleg párosával, kis csoportokban néha párhuzamos elhelyezkedéssel. Két napos folyékony tenyészetben 6—8 mikron hosszú pálcák is megfigyelhetők. Bunkósan megvastagodhat, igen ritkán rövid csökevényes elágazódás is előfordul. Neisser-festéssel metachromatikus szemcséket nem találtunk. Hosszabb ideig inkubált tenyészetben több rövid pálca látható, nem saválló. Marhahúskrém-agar táptalajon 3 nap múlva 1—3 mm átmérőjű kerek, domború, tömött, fényes, nyálkás benyomást keltő, éles-szélű, halvány rózsaszín-sárgás, vaj szerűen kenhető telepek. Véragar táptalajon az egyszerű agárhoz hasonlóan növekszik, nem hemolizál. Bizmut-szulfit agáron 3—4 nap alatt gatoltán növő, nem redukáló nyálkás telepek. Brillant-zöld agáron 3—4 nap múlva színtelen, tömött nyálkás, 3—4 mm átmérőjű telepek. Dezoxikolát-citrát agáron, eozinmetilénkék-agaron nem növekszik. Clauberg-féle tellursós agáron 2 nap múlva 1 mm átmérőjű, domború, kerek, barnásfekete, fokhagymaszagú telepek, további szobahőn történő inkubálás után nyálkás, 3—4 mm 154246
