154162. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a tetraciklin-csoportba tartozó tiszta antibiotikumok előállítására
9 anyagok gyakorlatilag teljesen az oldatban maradnak és nem szennyezik az antibiotikumot. Az antibiotikum lecsapása savas közegben történik és így az antibiotikum nem szenved bomlást, ami az alkalikus közegben történő le- 5 csapással dolgozó ismert eljárások esetében bekövetkezhet. Ismeretes, hogy egyes tetraciklin-csoportbeli antibiotikumok igen érzékenyek alkalikus vegyületekkel szemben, savas közegben azonban stabilak. . 10 Gazdasági szempontból a találmány szerinti eljárás még azt a további előnyt is mutatja az eddig ismert eljárásokkal szemben, amelyeknél az antibiotikum lecsapására alkalmazott szert ki kell selejtezni, mert az nem különíthető el 15 ill. nyerhető vissza a lecsapás és a tiszta antibiotikum elkülönítése után, hogy a találmány szerinti eljárás esetében ez a lecsapó-szer viszszanyeíhető. A lecsapószer vesztesége legfeljebb 10%, csupán ezt a veszteséget kell az eljárás 20 során folyamatosan pótolni. A találmány szerinti eljárás gyakorlati kiviteli módjait közelebbről az alábbi példák szemléltetik. 25 1. példa 20 liter fermentációs levet 20%~os sósavval 2,6 pH-értékre savanyítunk, majd „Dicalit 4108" szűrőanyagot adunk hozzá és leszűrjük. A csa- 30 padékot sósavval 1,5 és 2,0 közötti pH-értékre savanyítjuk, vízben újból szuszpendáljuk és újból leszűrjük. Az első és második szűredéiket egyesítjük és további feldolgozás céljaira 2,5 litert elveszünk a folyadékból. A fermentációs 35 lében jelenlevő klórtetraciklin mennyisége 3723 gamma/ml volt. A fermentációs lé szűredékének pH-értékét 2,0-ra állítjuk, majd Na2 W0 4 -2H 2 0 tömény oldatát adjuk hozzá, az antibiotikumra számítva 40 1,2:1 mennyiségi arányban, majd az elegy pH-értékét ismét 2,0-ra állítjuk be. A képződött csapadékot ülepedni hagyjuk, majd leszűrjük. A szűredékben a visszamaradt antibiotikum mennyisége 28 gamma/ml. Ily módon az anti- 45 biotikum teljes mennyiségének 99,25%-a (ill. a térfogatnövekedést is beleszámítva 98,6%-a) különíthető el. A képződött csapadékot a szűrőről levesszük, 400 ml desztillált víziben szuszpendáljuk, majd 50 lassan hozzáadunk annyi 10%-os nátriumhidroxidot, hogy a pH-érték 8,5 legyen. A pH-érték e felemelése során a komplex oldatba megy. Ezután 20%-os sósavat adunk fokozatosan az oldathoz, 1,5 és 2,0 közötti pH-értékig. 55 Az ennek hatására levált komplexet ismét leszűrjük és sósavval 2,5 pH-értékre savanyított vízzel mossuk. A kapott komplex infravörös abszorpciós 60 színképét a fentebb már említett 1. ábra mutatja. A kapott csapadékot vízben szuszpendáljuk és 10%-os nátrium'hidroxidoldattal 8,5 és 9,0 közötti pH-értékre lúgosítjuk. A kapott alkáli- 65 10 kus oldathoz 7,5 pH-érték eléréséig 20%-os sósavat adunk, majd 30 g szilárd ammóniumkloridot és 300 ml 10%-os kalciumkloridoldatot adunk hozzá, végül az oldat pH-értékét 10%-os nátriumhidroxidoldattal 8,0 és 8,2 közöttire állítjuk. A nátriumhidroxidot igen lassan kell hozzáadni, hogy jól szűrhető csapadékot kapjunk. A kapott csapadékot leszűrjük és némi kalciumkloridot tartalmazó desztillált vízzel mossuk. A szűr edékeket félretesszük és az antibiotikum újbóli lecsapására ill. a volframát visszanyerésére hasznosítjuk. Az antibiotikum kalciumsóját mosás után levesszük a szűrőről és vákuumban, 30—40 mm Hg-oszlop nyomás alatt, 40—45 C° hőmérsékleten szárítjuk. Szárítás után a kalciumsót oly metanollal extraháljuk, amelyet előzetesen sósavval 2,0 pH-értékre savanyítottunk. A metanolos kivonathoz aktívszenet adunk, majd ezt kiszűrjük, a szűredéket vákuumban eredeti térfogatának 1/4-re pároljuk be, majd az így kapott metanolos koncentrátumhoz 30% sósavat adunk és ismét térfogatának 1/3-ra pároljuk be. A metanol feleslegének elpárologtatása után megkezdődik a klórtetraciklin-hidroklorid kikristályosodása. A kristályosodás megkezdésekor . a desztillációt megszakítjuk; az oldat lehűlése során a klórtetraciklm-hidroklorid kikristályosodása folytatódik. A levált antibiotikum-kristályokat szűrés útján elkülönítjük, hideg metanollal mossuk és megszárítjuk. Ily módon 12,1 g antibiotikumot kapunk, amelynek tisztasági foka 800 gamma/mg. Metanolból történő átkristályosítás után 980 gamma/mg tisztaságú antibiotikumot kapunk. 2. példa Az 1. példa szerinti módon kapott 2,6 liter szűrt fermentációs levet az 1. példában leírt hasonló módon dolgozunk fel, csupán azzal az eltéréssel, hogy Na2 W0 4 • 2H2 0 helyett nátrium-paravolframátot (!Na6 W 7 0 2 4-il6H 2 0) alkalmazunk ugyanolyan 1,2:1 mennyiségi arányban az antibiotikumhoz képest, de Na2 W0 4 • 2H2 0-ra számítva. Ily módon 11,3 antibiotikumot kapunk, 850 gamma/mg tisztasági fokban. 3. példa Az 1. példa szerinti módon kapott 5 liter szűrt fermentációs léhez kálium-paravolframátot (K6 W 7 0 24 • 6H2 0) adunk, az antibiotikumhoz képest 1,3:1 mennyiségi arányban, Na2 W0 4 • 2H2 0-ra számítva. Minthogy a fermentációs lé 18,62 g antibiotikumot tartalmaz, 22,0 g kálium-paravolframát 400 ml desztillált vízzel készített oldatát kell hozzáadni. A kálium-paravolframát hozzáadása után az elegy pH-értékét 10%-os sósav hozzáadásával 2,0-ra állítjuk be, majd a kapott szuszpenziót 100 g „Dicalit 4108" hozzáadásával Büchnero
